Kulturel metode-udskillelse og akkumulering af ren kulturtank-th med sin sidste. Identifikator.Nogle.tank-og område med modstand, så tank.analysen kan omfatte definitionen af ​​følsomhed. Pure-to-ry til en \ b

Funktion: flertrins. Minus - varighed.

Undersøgelser: blod, urin, cerebrospinalvæske, slim fra svælg og næse, afføring

Til isolering anvendes et tæt medium Stadier: isolering af ren kultur

Præklassificeringsmetoder:

1) morf.analyse af bakteriekolonier og deres karakteristika på specielle \ differentielle medier

2) mikroskop - jeg farvede tank

For den endelige identifikation af tanken: undersøgelse b \ x handlinger (biotyping);

detektionsbeholder Ag (serotype-e) -1) r-tion agglutination på glas-pr. for enterobakterier

2) immunodiff i agar (corinebac-ii difteri)

def-e følsomhed over for bakteriofager (fag typer-e)

IMMUNOLOGI

Antigengenkendende receptorer på lymfocytter.

Sammenlignende karakteristika for BCR og TCR

2. Begrebet "kloning" i immunologi betyder:

1. Hver B/T-lymfocyts evne til at reagere på et enkelt antigen (epitop). 2. Hver B/T-lymfocyts evne til at reagere på flere epitoper. 3. Selektiv binding af antigene peptider af HLA-molekyler af antigen-præsenterende celler. 4. Specificitet (epitopkomplementaritet) af antigengenkendende receptorer af lymfocytter. 5. Klonospecificitet af CD-fænotypen af ​​T- og B-lymfocytter.

Lymfocytter er heterogene i deres evne til at genkende og reagere med antigener. Desuden er hver lymfocyt og dens afkom (klon) indstillet til at interagere med et enkelt antigen (mere præcist, en epitop). Med andre ord klones lymfocytter af følsomhed over for antigener, og det er det, der bestemmer selektiviteten (antigen specificitet) af immunresponset. Det molekylære grundlag for kloning er specificiteten af ​​de receptorer, der binder antigener: receptorerne for hver klon er unikke og reagerer kun med ét antigen. Det betyder, at antallet af kloner og afstamningsspecifikke receptorer skal være enormt, svarende til et uendeligt antal potentielle antigener. Før man støder på antigenet, er hver klon repræsenteret af et lille antal modne hvilende celler (de kaldes "naive"). Ved at binde til komplementære receptorer giver antigenet aktivering af lymfocytten, der fungerer som en selektionsfaktor (klonselektion). Antallet af klonen stiger (udvidelsen af ​​klonen), og dens bestanddele lymfocytter differentieres til effektorceller og hukommelsesceller.

BAKTERIOLOGI

3. Tegn på Mycobacterium tuberculosis forbundet med deres cellevægs egenskaber:

1. Syrebestandighed. 2. Langsom reproduktionshastighed. 3. Resistens mod fagocytter. 4. Stabilitet i det ydre miljø. 5. Høj følsomhed over for antibiotika.

TUBERKULOSE. slægten Mycobacterium Generisk egenskab - syre-, alkohol- og alkaliresistens. familie Mycobacteriaceae (saprophytes) afdeling Firmicutes. Ikke-bevægelige, aerobe gr + stavformede bakterier. Nogle gange danner de strukturer, der ligner mycelium, deraf navnet. Til farvning anvendes Ziehl-Neelsen metoden. Sygdommen er forårsaget af 3 typer mykobakterier: Mycobacterium tuberculosis - menneskeart, Mycobacterium bovis - kvægart, Mycobacterium africanum - mellemart. [De forårsagende stoffer til mykobakterielle antroponoser: M.leprae, m.tuberculosis. forårsagende middel til mycobakteriel zoonose: M.bovis.] reservoir - syg, smittevej - aerogen. Forekomsten stiger på grund af dårlig hygiejne mv. Kochs tryllestav er tynd, lige eller let buet, tilbøjelig til at forgrene sig. Ziehl-Neelsen metoden farver rødt, indeholdende syregranulat (Fluekorn i cytoplasmaet) Vækstfaktorer er nødvendige. I flydende medier syntetiserer den ledningsfaktoren, virulensfaktoren. Syntetiserer en masse nikotinsyre - niacin (niacin testmetode differn mikobakt). Cellevægslipider: mycolsyrer, ledningsfaktor, mycosider, sulfatider. Derfor er hun syrefast, et "pansret monster". resistens over for fagocytter. stabil i miljøet. Faktorer af antifagocytisk aktivitet: cellevægslipider, sideroforer.

Patogenese: penetration i alveolerne; reproduktion i alveolære makrofager (snorfaktorhæmning af phagosomal-lysosomal fusion); dannelsen af ​​et ikke-specifikt præ-immunt granulom (et skaft dannet omkring de inficerede celler, fra en makrofag); penetration af bakterier i regionale lymfeknuder; induktion af T-celleimmunitet; T-afhængig aktivering af makrofager (først Thelp, øge biocidaliteten af ​​inficerede makrofager, derefter Tkil, ødelægge infektionen af ​​makrofager); dannelsen af ​​et specifikt postimmunt granulom. Afslutning af processen - fibrose, forkalkning, dannelse af latente infektioner, former for immunitet mod eksogen geninfektion. [Start af processen - intramakrofager invasion. Mekanismer: ikke-aggressiv fagocytose, undertrykkelse af dannelse ved fagolyse, aktiv modstand mod biotoksiske faktorer af fagolysosomer, undertrykkelse af funktionelt samarbejde mellem makrofager og T-lymfocytter.] Primær tuberkulose-fordel i barndomsmanifestation (+ subfeb temp) - Primært immunkompleks - fokus på Gon. I granulomet er der Pirogov-Lnghans-celler langs omkredsen - lymfocytter, mononukleære celler. Reaktivering af endogen inf (sekundært rør) eller exogen er mulig, geninfektion er sjælden, udvikler sig på baggrund af allergi over for tuberkuloproteiner Dissemineret tuberkulose er mulig hos immunkompromitterede individer. Tuberkulin er et kompleks af tuberkuloproteiner (proteinderivater), der anvendes til allergidiagnostik. [Freunds adjuvans anvendes: peptidoglycan + cellevægslipider]. Tuberkuloproteiner har immunologisk afhængig patogenicitet, er involveret i implementeringen af ​​beskyttende immunitet og bruges i allergidiagnostik. Cellevægslipider: antimakrofager aktivitet, deltager i induktionen af ​​T-celle-immunitet som adjuvanser, bestemmer bakteriers kulturelle og tinktielle egenskaber. Hovedfunktionen af ​​makrofager i zonen af ​​uspecifik granulom er excitationen af ​​cellulære immunitetsreaktioner. Post-immun granulom: opstår på baggrund af en forsinket overfølsomhedsreaktion over for tuberkuloproteiner, en zone for funktionelt samarbejde mellem makrofager og T-effektorer, grundlaget for destruktive reaktioner, grundlaget for sanogenese (recovery), ender med asymptomatisk persistens af patogenet. Destruktive processer i tuberkulose bestemmes af: immunologisk medierede effekter af mycobacter AG, cytokinafhængig aktivering af makrofager, allergi over for tuberkuloproteiner. Immunitet Anti-tuberkulose immunitet ikke-steril infektiøs, [på grund af tilstedeværelsen af ​​L-former af mykobakterier i kroppen.] cellulær, antibakteriel

Laboratoriediagnostik Obligatoriske undersøgelsesmetoder omfatter bakterioskopisk, bakteriologisk undersøgelse, biologisk test, tuberkulindiagnostik, baseret på bestemmelse af kroppens overfølsomhed over for tuberkulin (blandingen af ​​proteiner renses af tuberkulin). Oftere, for at opdage infektion og allergiske reaktioner, satte de en intradermal Mantoux-test med renset tuberkulin i en standardfortynding (op til 14 år). Fluorografi. Behandling-antibiotisk terapi, kirurg vil gribe ind.

Specifik profylakse udføres ved at introducere en levende attenuir-vaccine - BCG (BCG), intradermalt på den 5. dag efter barnets fødsel. Efterfølgende revaccinationer udføres i 7, 13 år.

VIROLOGI

4. Hæmagglutinin af orthomyxovirus:

1. Starter virussens interaktion med cellen. 2. Bliver aktiv efter begrænset proteolyse. 3. Sammenlægningsfaktor. 4. Beskyttende antigen. 6. Fås i alle typer (arter) af slægten influenza.

Orthomyxovirus Slægten influenzavirus af familien orthomixoviridae (slim, dem med mucin-affinitet). Der er 3 typer - A, B, C. "-" RNA (8 segmenter, enkeltstrenget er A og B, 7 for C) En sådan segmentering gør det muligt for to vira let at udveksle genetisk information under interaktion og bidrager derved til den høje variabilitet af virus., spiralformet nukleocapsid (sammensat af RNA, nukleoprotein (strukturerer og regulerer rollen og type-specielt ag) og protein), supercapsid-er (= "kompleks"). Proteiner (enzymer) af RNA-polymerasekomplekset: PB1-protein (transkriptase), PB2-protein (endonuklease), PA-protein (replikase). Dernæst kommer M-proteinet (deltager i samlingen af ​​viruspartikler, typespecifik AG), derefter bilipidlaget (tidligere fra værtscellens membran, følelser for æteren), hvorfra glykoproteinet spikes, bestående af hæmagglutinin (H) ) og neurominidase (N (type C gør ikke hende))

AG struktur: intern - NP, protein-M, proteiner af RNA-polymerasekomplekset. Ekstern - H (sort 15, hos mennesker: H1-3) og N (9, hos mennesker: N1, N2). Replikation h/z mRNA.

(transkriptase, endonuklease, replikase). Repl i kernen og syntese

Ved endocytose af hz H ind i endosomet, der ændrer det sure miljø konformation, eksponerer peptider (F-proteiner), hvilket forårsager fusionen af ​​den virale og phagolysosomale membran => deprotenisering

Drift, skift. viræmi. Remantadin.

Tegn: -RNA (=> det kan ikke udføre funktionerne af mRNA uden transkription, fragmentarisk), skal (internt omfatter M-protein, nucleoprote, ferm polymersæt), excitation af akutte luftvejsinfektioner, nucleocapsid helix sim. Inddel i typer: (A, B, C) AG-arter af indre proteiner (nukleoprotein). A, B, C er forskellige i: økolog, omfanget af AH-isme, spektret af virionfarme, Epidem-ti-trinnet (lederen inden for patogener er type A-virus, type B er mellemliggende, type C er årsagen til sporadiske udbrud). Supercaps-proteiner: N, H. H: initiering af interaktionen af ​​vir med CL (TK har en affinitet for sialylerede glycopeptider og glycolipider på grund af dette, virioner fikseres på plasmamembraner), aktiveret ved proteolyse (syntese i form af en precursor kat metoden reagerer med celleordination, men sikrer ikke fusionen af ​​obolovirion med membrancellerne => skal gennemgå begrænset proteolyse, proteaserne spalter hæmagluten i H1 og H2, og efter yderligere konformation i det sure miljø af endosomer, initierer H2 fusion), f-r fusion (måden nuklecapsidet frigives til cytoplasmaet: i det sure miljø af endosomer, de udsættes for speciel struktur hæmaglut (fusionssteder) kat excitable kombineret viral og cellemembraner), beskytte-AG (de blokerer virussen) til det og undertrykke infektionen), i alle typer af influenza, spaltning af sialinsyre fra glycolepider og glycopeptider, som i det væsentlige inaktiverer receptorer for hæmagglutinin), er forskellen i epitop variabel. AG-skift (dette skift, uventet, brat kat fører til en fuldstændig ændring i H, N-antigenprofilen og nye undertyper dukker op): kun type A, økologisk determinant-n (binding af vira til luftvejene), genetisk determinant (afhænger af om genetisk rekombination af gener, når celler samtidigt inficeres med flere stammer), ændring af undertyper af virionprotein, pandemi (H1N1 (dette er en spanier) H3N2 (Hong Kong virus) Drift (langsom delvis påvisning ved hjælp af punktmutationer af H, N) -epitoper, samtidig med at antigenet af slægtskab med forælderen bibeholdes oven på AG-stammen, bestemmer stammekarakteristika inden for undertypen, giver anledning til en stamme med øget epidemisk permeabilitet) epid Det er svært at få en vaccine: AG-ændring, drift .

Eksamensbillet 58.

GENEREL MIKROBIOLOGI

Begrebet specifik forebyggelse af infektionssygdomme. Immunologiske grundlag for vaccination. Værker af E Jenner og L. Pasteur. Typer af vacciner (dræbt, levende, underenhed; mono- og associerede). Rekombinante vacciner, princippet om at opnå. konjugerede vacciner. Slimhindevacciner.

Immuniteten er passiv (1. naturligt erhvervet efter infektion og 2. kunst erhvervet efter en vaccine) og aktiv (1. naturligt erhvervet af mors AT gennem mælk eller placenta og 2. kunst erhvervet ved seroterapi). Uspecifik prof-ka er rettet mod at undgå infektion, og specifikt er rettet mod en konkret excitation. Essensen af ​​vaccination er at danne en hukommelse om hypertension, som vil give et hurtigt immunrespons. Til vaccinen er det kun nødvendigt med beskyttende antigener (dvs. som forårsager produktion af antistoffer)

HISTORIE: I 1778 beviste Jenner, at "kokopper"-podning beskyttede mod at blive smittet med kopper. Det var et produkt af ren eksperimentering. Dette er fødselsdatoen for vaccinologi. Udtrykket "vaccine" blev opfundet af Pasteur. I 1881 svækkede han "bevidst" bakteriernes virulens ved at dyrke dem i en ugunstig tilstand. Han forberedte de første vacciner mod kyllingekolera og miltbrand. I 885 fik han vacciner mod besh-wa (senere viste det sig, at det var en dræbt vaccine)

Typer af vacciner:

1. LEVENDE - introducere svækkede (svækkede) bakterier. Osl-t fysiske, kemiske metoder. "+" - høj immunogenicitet og varighed af virkningen (fordi svækkede bakterier er i stand til at udvide sig i org-me, fortsætter "-" - øget reaktogenicitet, ustabilitet, ubetydelig. Men sandsynligheden for en reversion af den virulente fænotype. Eksempel: BCG

2. KILLED-sod-t inaktiveret bact, prost, svampe eller virioner. Deres ulemper og fordele er det modsatte af levende vacciner. Skal gøres oftere. Eksempel: n-influenza, abdominal tyfus

3. UNDERENHED - består af oprensede beskyttende antigener. Reaktiviteten er minimal. O lav immunogenicitet forstærket ved hjælp af adjuvanser

1) Konjugeret - isp-t til oprettelse af imm-that mod T-uafhængig AG. T-uafhængig AG efterlader ikke hukommelsen.

2) Anatoksiner - neutraliserede toksiner af bakterier. Problemet er, at monointoxication er sjælden. Eksotoksiner behandles med formalin, og de mister deres giftige egenskaber, men deres immunitet forbliver. De beskytter ikke mod bakterier. Eksempel: tetanustoksoid

3) Rekombinant - disse er rekombinante DNA-molekyler, lavet på basis af bakterieplasmider, hvori generne af beskyttende antigener indsættes. Sådan DNA synth-t AG, inducerer humoral og cellulær imm.

1) Nøgne under anvendelse af frie plasmider eller dem, der er adsorberet på art-bærere. De er sikre. Eksempel: Hepatitis B

2)Vektor - til levering brug svækket bact

4. MUCOSALE - skabt specielt til imm-at slimhinder mod infektioner i luftveje, tarm og kønsorganer. Pomiso d-I på stedet, de påvirker også den samlede imm-t. Deres nødvendigvis sopr-t adjuvanser. Men deres indførelse i praksis er meget langsom.

9. Bakteriologisk metode til diagnosticering af infektionssygdomme

Hovedmetoden til mikrobiologisk diagnostik og mikrobiologiens "guldstandard" er den bakteriologiske metode.

Formålet med den bakteriologiske metode består i at isolere en ren kultur af patogenet fra testmaterialet, akkumulere en ren kultur og identificere denne kultur ved hjælp af et sæt egenskaber: morfologisk, tinktorisk, kulturel, biokemisk, antigen, ved tilstedeværelsen af ​​patogenicitet, toksicitetsfaktorer og bestemmelse af dens følsomhed til antimikrobielle lægemidler og bakteriofager.

Den bakteriologiske undersøgelsesmetode omfatter:

1. inokulering af testmaterialet i næringsmedier

2. ren kultur isolation

3. identifikation af mikroorganismer (bestemmelse af tilhørsforhold til en art).

Isolering og identifikation af rene kulturer af aerobe og anaerobe bakterier involverer følgende undersøgelser:

Fase I (arbejde med indbygget materiale)

Formål: opnå isolerede kolonier

1. Foreløbig mikroskopi giver en omtrentlig idé om mikrofloraen

2. Udarbejdelse af materiale til forskning

3. Såning på tætte næringsmedier for at opnå isolerede kolonier

4. Inkubation ved optimal temperatur, oftest 37°C, i 18-24 timer

II fase

Formål: at opnå en ren kultur

1. Makroskopisk undersøgelse af kolonier i transmitteret og reflekteret lys (karakterisering af koloniernes størrelse, form, farve, transparens, konsistens, struktur, kontur, overflade).

2. Mikroskopisk undersøgelse af isolerede kolonier

3. Test for aerotolerance (for at bekræfte tilstedeværelsen af ​​strenge anaerober i testmaterialet).

4. Såning af kolonier, der er karakteristiske for en bestemt art, på rene kulturakkumuleringsmedier eller elektive medier og inkubation under optimale forhold.

Fase III

Formål: Identifikation af isoleret renkultur

1. For at identificere den isolerede kultur ved et kompleks af biologiske egenskaber studeres følgende:

morfologi og farveegenskaber

kulturelle egenskaber (naturen af ​​vækst på næringsmedier)

biokemiske egenskaber (enzymatisk aktivitet af mikroorganismer)

serologiske egenskaber (antigene)

virulente egenskaber (evne til at producere patogenicitetsfaktorer: toksiner, enzymer, forsvars- og aggressionsfaktorer)

patogenicitet for dyr

fag lizability (følsomhed over for diagnostiske bakteriofager)

følsomhed over for antibiotika

andre individuelle ejendomme

Fase IV (konklusion)

Ifølge de undersøgte egenskaber drages en konklusion om den isolerede kultur

Første fase af forskning. Studiet af patologisk materiale begynder med mikroskopi. Mikroskopi af farvet naturligt materiale gør det muligt at fastslå omtrentlig sammensætningen af ​​det mikrobielle landskab af det undersøgte objekt, nogle morfologiske træk ved mikroorganismer. Resultaterne af mikroskopi af naturligt materiale bestemmer i høj grad forløbet af yderligere forskning, og efterfølgende sammenlignes de med data opnået under podning på næringsmedier.

Med et tilstrækkeligt indhold af patogene mikroorganismer i prøven udføres podning på tætte næringsmedier (for at opnå isolerede kolonier). Hvis der er få bakterier i testmaterialet, så udføres podningen på flydende næringsstofberigelsesmedie. Næringsmedier udvælges i henhold til mikroorganismernes krav.

Dyrkning af mikroorganismer er kun mulig, når der skabes optimale betingelser for deres vitale aktivitet og overholder reglerne, der udelukker forurening (tilfældig kontaminering af fremmede mikrober) af testmaterialet. Kunstige forhold, der ville udelukke kulturkontamination med andre arter, kan skabes i et reagensglas, en kolbe eller en petriskål. Alle redskaber og næringsmedier skal være sterile og, efter podning af mikrobielt materiale, beskyttet mod forurening udefra, hvilket opnås ved hjælp af propper eller metalhætter og låg. Manipulationer med testmaterialet bør udføres i flammezonen af ​​en alkohollampe for at udelukke kontaminering af materialet fra det ydre miljø samt for at overholde sikkerhedsbestemmelserne.

Podning af materialet på næringsmedier bør foretages senest 2 timer fra tidspunktet for indsamlingen.

Anden fase af forskning. Studie af kolonier og isolering af renkulturer. Efter en dag med inkubation vokser kolonier på pladerne, og på det første slag er væksten kontinuerlig, og på de næste - isolerede kolonier. En koloni er en samling af mikrober af samme art, der er vokset fra en enkelt celle. Da materialet oftest er en blanding af mikrober, vokser flere typer kolonier. Forskellige kolonier er markeret med en blyant, skitserer dem med en cirkel fra siden af ​​bunden og studerer dem (tabel 11). Først og fremmest skal du studere kolonierne med det blotte øje: makroskopiske tegn. Skålen ses (uden at åbne den) fra bunden i transmitteret lys, koloniernes gennemsigtighed noteres (gennemsigtig, hvis den ikke fanger lys; gennemskinnelig, hvis den delvist fanger lys; uigennemsigtig, hvis lys ikke passerer igennem kolonien), mål (i mm) størrelsen af ​​kolonierne. Derefter studerer de kolonierne fra siden af ​​låget, noterer formen (regelmæssig rund, uregelmæssig, flad, konveks), overfladens beskaffenhed (glat, skinnende, mat, ru, rynket, våd, tør, slimet), farve (farveløs, farvet).

Tabel 11. Skema for undersøgelse af kolonier

Bemærk: 5-7 punkter studeres ved lav forstørrelse af mikroskopet.

Du kan se forskellen mellem kolonierne endnu bedre, når du zoomer ind på dem. For at gøre dette placeres en lukket skål på hovedet på et objektbord, kondensatoren sænkes lidt, en lille forstørrelse af objektivet (x8) bruges, flytter skålen, mikroskopiske tegn studeres i kolonierne: arten af kant (glat, bølget, takket, bølget), struktur (homogen, granulær, fibrøs, homogen eller forskellig i midten og langs periferien).

Dernæst studeres morfologien af ​​mikrobielle celler fra kolonierne. For at gøre dette laves udstrygninger fra en del af hver af de markerede kolonier, farvet efter Gram. Når du tager kolonier, skal du være opmærksom på konsistensen (tør, hvis kolonien smuldrer og er svær at tage; blød, hvis den let tages på løkken; slimet, hvis kolonien rækker ud efter løkken; hård, hvis en del af kolonien tages ikke af løkken, kun hele kolonien kan fjernes).

Når man ser udstrygninger, fastslås det, at kolonien er repræsenteret af én type mikrobe, derfor kan rene bakteriekulturer isoleres. For at gøre dette fra de undersøgte kolonier udføres gensåning på en skrå agar. Ved gensåning fra kolonier skal man passe på at tage præcis de tilsigtede kolonier, uden at røre løkken af ​​nærliggende kolonier. Rørene signeres og inkuberes i en termostat ved 37°C i 24 timer.

Den tredje fase af forskning. Identifikation af den isolerede kultur. Identifikation af mikrober - bestemmelse af den systematiske position af kulturen isoleret fra materialet til arten og varianten. Den første betingelse for pålideligheden af ​​identifikation er kulturens ubetingede renhed. For at identificere mikrober bruges et sæt af tegn: morfologiske (form, størrelse, tilstedeværelse af flageller, kapsler, sporer, relativ position i en udstrygning), tinktorial (relation til Gram-farvning eller andre metoder), kemisk (guanin + cytosin-forhold i DNA-molekyle), kulturelt (næringsstofbehov, dyrkningsbetingelser, væksthastighed og art på forskellige næringsmedier), enzymatisk (spaltning af forskellige stoffer med dannelse af mellem- og slutprodukter), serologisk (antigen struktur, specificitet), biologisk (virulens) for dyr, toksicitet , allergifremkaldende virkning, virkningen af ​​antibiotika osv.).

Til biokemisk differentiering, bakteriers evne til at fermentere kulhydrater med dannelse af mellem- og slutprodukter, evnen til at nedbryde proteiner og peptoner og studere redoxenzymer.

For at studere saccharolytiske enzymer inokuleres isolerede kulturer i reagensglas med semi-flydende medier indeholdende lactose, glucose og andre kulhydrater og polyoler. På semi-flydende medier udføres podning ved injektion i mediets dybde. Ved såning ved injektion holdes reagensglasset med mediet på skrå, proppen fjernes, og kanten af ​​reagensglasset brændes. Materialet tages med en steril løkke, og en søjle af næringsmedium gennembores næsten til bunden med det.

For at bestemme proteolytiske enzymer inokuleres den isolerede kultur på peptonvand eller MPB. For at gøre dette tager de et reagensglas med podning tættere på sig selv, og et reagensglas med mediet - længere væk fra dem selv. Begge reagensglas åbnes samtidigt, der fanger deres propper med lillefingeren og kanten af ​​håndfladen, kanterne af reagensglassene brændes, lidt kultur fanges med en calcineret afkølet sløjfe og overføres til det andet reagensglas, tritureret i et flydende medium på væggen af ​​reagensglasset og vasket af med mediet.

Ved såning og gensåning skal man være opmærksom på overholdelse af sterilitetsreglerne for ikke at forurene deres afgrøder med fremmed mikroflora og heller ikke for at forurene miljøet. Rørene mærkes og placeres i en termostat til inkubation ved 37°C i en dag.

Konklusion

Regnskab for resultater. Forskningskonklusion. Resultaterne af identifikation tages i betragtning, og baseret på de samlede data, der er opnået, baseret på klassificeringen og karakteristika for typestammerne beskrevet i manualen (Bergy's guide, 1994-1996), bestemmes typen af ​​isolerede kulturer.

Laboratorieforskningsmetoder i en række nosologiske former spiller en førende, og i en række kliniske situationer, en afgørende rolle, ikke kun ved diagnosticering, men også ved bestemmelse af det endelige udfald af sygdommen. Diagnostikkens rolle er, at en tidlig, præcis, omfattende og mest specifik diagnose er grundlaget for rationel og effektiv terapi, giver i de fleste tilfælde mulighed for at forudsige mulige muligheder for sygdommens videre forløb og udfald, og fungerer som udgangspunkt i gennemføre rettidige og målrettede anti-epidemi- og forebyggende foranstaltninger.
Diagnose af infektionssygdomme involverer næsten altid brugen af ​​et kompleks af laboratoriemetoder.

Under moderne forhold bevarer diagnosen af ​​infektionssygdomme alle sine traditionelle træk, der er blevet dannet i løbet af de sidste årtier. Samtidig er det kendetegnet ved den løbende forbedring af allerede fundne teknikker og metoder til genkendelse af sygdomme og søgen efter nye, mere effektive, herunder ekspres.
Der er følgende metoder til mikrobiologisk diagnose af bakterielle infektioner: bakterioskopisk (mikroskopisk), bakteriologisk (kulturel), biologisk (eksperimentel), immunologisk (serologisk), allergisk.
Hovedmetoden er bakteriologisk forskning. Det består i at så testmaterialet på næringsmedier, isolere en ren kultur af patogenet og identificere det. Typen af ​​patogen bestemmes af en række funktioner: morfologi, tinktorielle egenskaber (evnen til at farve med forskellige farvestoffer), kulturelle egenskaber (naturen af ​​vækst på kunstige næringsmedier), biokemiske egenskaber (fermentering af kulhydrater og proteiner). Den endelige tilhørsforhold af den isolerede kultur til en bestemt type mikroorganismer etableres efter at have studeret den antigene struktur ved hjælp af forskellige immunologiske reaktioner (agglutination, præcipitation, neutralisering osv.). Generelt er den bakteriologiske forskningsmetode en flertrins bakteriologisk forskning, som varer fra 18-24 timer til flere dage.

Den bakteriologiske metode har mange fordele. En af de første er at studere med dens hjælp den kvalitative sammensætning af mikrofloraen af ​​det biologiske materiale, der undersøges. Til diagnosticering er antallet af mikroorganismer i 1 g af det undersøgte stof og 1 ml væske, det såkaldte totale mikrobielle antal, målt i kolonidannende enheder (CFU/g eller CFU/ml). For at gøre dette sås en vis mængde af det undersøgte materiale på tætte næringsmedier, efter inkubation i en termostat tælles antallet af dyrkede kolonier (en koloni er en synlig isoleret ophobning af repræsentanter for en type mikroorganismer, dannet under reproduktion af en kolonidannende enhed på et tæt næringsmedium).
De mest imponerende resultater opnået af mikrobiologi omfatter skabelse og introduktion i praksis af antibiotika. På grund af den brede spredning af lægemiddelresistente former for bakterier, for udnævnelse af rationel kemoterapi, er det nødvendigt at bestemme antibiogrammet - følsomhed over for antibakterielle lægemidler af den isolerede renkultur af patogenet. Til et antibiogram anvendes enten papirskivemetoden eller seriefortyndingsmetoden.
Papirskivemetoden er baseret på identifikation af en zone med hæmning af bakterievækst omkring skiver, der er imprægneret med antibiotika. Ved anvendelse af metoden med seriefortyndinger fortyndes antibiotikaen i reagensglas med et flydende næringsmedium, hvorefter det samme antal bakterier podes i reagensglassene. Ved fravær eller tilstedeværelse af bakterievækst registreres resultaterne. Ved hjælp af metoden til serielle fortyndinger bestemmes den minimale hæmmende koncentration (MIC) af et antibiotikum, som tjener til at beregne den terapeutiske dosis af lægemidlet.

Den bakteriologiske metode gør det muligt at undersøge mekanismerne for antibiotikaresistens i isolerede kulturer (methicillinresistens, produktion af b-lactamase). Det er også muligt at vurdere koncentrationen af ​​antibiotika i fokus for den infektiøse proces, ændringen i antibiotikafølsomhed i behandlingens dynamik.
For en kliniker er det vigtigt at vide, hvor effektiv den antimikrobielle behandling er, så det er muligt at vurdere dynamikken i ændringer i den kvalitative og kvantitative sammensætning i sygdoms- og terapiforløbet. Ved hjælp af den bakteriologiske diagnostiske metode er det muligt at bestemme, hvad der er resultatet af den infektiøse proces - genopretning, transport, kronicitet.
De vigtigste årsager til infektionssygdomme er i øjeblikket opportunistiske patogener, hvis rolle i sygdommens tilblivelse er vanskelig at bevise. Derfor er det vigtigt at vurdere patogeniciteten af ​​den isolerede opportunistiske mikroflora.
Den menneskelige krop er beboet af repræsentanter for den såkaldte normale mikroflora, en ændring i den kvalitative og kvantitative sammensætning kan spille en rolle i udviklingen af ​​dysbiotiske lidelser. Derfor er det muligt at udføre en undersøgelse af mikrofloraen i den menneskelige krop - i normen og med dysbiose, intermikrobielle forhold under terapi med eubiotika.
Enhver sundhedsfacilitet er i risiko for at udvikle nosokomielle infektioner. At diagnosticere det, bestemme patogenet, identificere infektionskilden, bevise stammernes identitet er en integreret del af arbejdet i det bakteriologiske laboratorium (3).
Den nuværende fase i udviklingen af ​​mikrobiologi er kendetegnet ved nye opdagelser i studiet af mekanismerne for dannelsen af ​​patologiske tilstande. De vigtigste er etableringen af ​​det faktum, at der findes bakterier i den menneskelige krop som en del af forskellige samfund, samlet kaldet biofilm, og identifikation af den indirekte virkning af mikrober på den menneskelige krop. Bakteriers egenskaber i biofilm adskiller sig fra isolerede cellers, hvilket påvirker alle aspekter af mikrobens og miljøets interaktion, herunder immunforsvarsfaktorer og antimikrobielle stoffer (4,5).
Biofilm er et velorganiseret, interagerende fællesskab af mikroorganismer (Quorum sensing). 99 % af bakterierne i naturlige økosystemer, 80 % af bakterierne i infektionssygdomme findes i form af en biofilm.

Biofilmen binder celler, organiske og uorganiske substrater, øger vedhæftningen af ​​bakterier til epitelet og eventuelle overflader (levende og ikke-levende oprindelse), reducerer effektiviteten af ​​antibiotikabehandling og hjælper bakterier med at overleve i et foranderligt miljø. Mikroorganismer i biofilmen er mere modstandsdygtige over for virkningen af ​​både antibakterielle lægemidler og faktorer af ikke-specifik anti-infektionsbeskyttelse af den menneskelige krop.
Mekanismer til at øge bakteriel resistens over for antibiotika i biofilm er forbundet med begrænset penetration af antibiotika gennem det, et fald i hastigheden af ​​bakteriel deling, som et resultat af hvilket der er færre mål for antibiotikavirkning, og genetiske ændringer i bakterier, der fortsætter i en biofilm .
Ved hjælp af den bakteriologiske metode kan man studere mekanismerne for beskyttelse af en mikrobe mod kroppens immunsystem, dens overlevelsesstrategi i en makroorganisme - persistens. Mikrober har mekanismer til beskyttelse mod det menneskelige immunsystem - anti-lysozym, anti-komplementær, anti-lactoferrin aktivitet.
På nuværende tidspunkt gør den bakteriologiske diagnostiske metode det således muligt at studere mange aspekter af den vitale aktivitet af patogene bakterier, mekanismerne for deres udvikling, overlevelse og undertrykkelse.

Litteratur

1. Tets V.V. Mikroorganismer og antibiotika. Infektioner i hud, blødt væv, knogler og led. - St. Petersborg: KLE T, 2006. - 128 s.
2. En praktisk guide til anti-infektiøs kemoterapi /Red. L. S. Strachunsky, Yu. B. Belousov, S. N. Kozlov. Smolensk: MACMAH, 2007. - 464 s.
3. Rudnov V.A. Moderne klinisk betydning af Pseudomonas aeruginosa-infektion og muligheden for dens behandling hos patienter på intensivafdelinger Infektion og antimikrobiel terapi 2002. - V. 4, nr. 3
4. Sidorenko S.V. Bakterielle biofilms rolle i human patologi Infektioner i kirurgi. 2004. - V. 2, nr. 3. - S. 16-20.
5. Anwar H., Strap J.L., Costerton J.W. Udryddelse af bio?lm-celler fra Staphylococcus aureus med tobramycin og cephalexin. // Kan. J. Microbiol. 1992. - V. 38. - P. 618-625.

Hovedmetoden til mikrobiologisk diagnostik og mikrobiologiens "guldstandard" er den bakteriologiske metode.

Formålet med den bakteriologiske metode består i at isolere en ren kultur af patogenet fra testmaterialet, akkumulere en ren kultur og identificere denne kultur ved hjælp af et sæt egenskaber: morfologisk, tinktorisk, kulturel, biokemisk, antigen, ved tilstedeværelsen af ​​patogenicitet, toksicitetsfaktorer og bestemmelse af dens følsomhed til antimikrobielle lægemidler og bakteriofager.

Den bakteriologiske undersøgelsesmetode omfatter:

1. inokulering af testmaterialet i næringsmedier

2. ren kultur isolation

3. identifikation af mikroorganismer (bestemmelse af tilhørsforhold til en art).

Isolering og identifikation af rene kulturer af aerobe og anaerobe bakterier involverer følgende undersøgelser:

Fase I (arbejde med indbygget materiale)

Formål: opnå isolerede kolonier

1. Foreløbig mikroskopi giver en omtrentlig idé om mikrofloraen

2. Forberedelse af materialet til undersøgelsen (fortynding med isotonisk NaCl-opløsning osv.)

3. Såning på tætte næringsmedier for at opnå isolerede kolonier

4. Inkubation ved optimal temperatur, oftest 37°C, i 18-24 timer

II fase

Formål: at opnå en ren kultur

1. Makroskopisk undersøgelse kolonier i transmitteret og reflekteret lys (karakteristisk for koloniernes størrelse, form, farve, gennemsigtighed, konsistens, struktur, kontur, overflade).

2. Mikroskopisk undersøgelse af isolerede kolonier

3. Test for aerotolerance (for at bekræfte tilstedeværelsen af ​​strenge anaerober i testmaterialet).

4. Såning af kolonier, der er karakteristiske for en bestemt art, på rene kulturakkumuleringsmedier eller elektive medier og inkubation under optimale forhold.

Fase III

Formål: Identifikation af isoleret renkultur

1. For at identificere den isolerede kultur ved et kompleks af biologiske egenskaber studeres følgende:

morfologi og farveegenskaber

kulturelle egenskaber (karakter af vækst på næringsmedier)

biokemiske egenskaber (enzymatisk aktivitet af mikroorganismer, glykolytisk, proteolytisk og anden aktivitet)

Serologiske egenskaber (antigene)

Virulente egenskaber (evne til at producere patogenicitetsfaktorer: toksiner, enzymer, forsvars- og aggressionsfaktorer)

patogenicitet for dyr

fagoliserbarhed (følsomhed over for diagnostiske bakteriofager)

følsomhed over for antibiotika

Andre individuelle ejendomme

Fase IV (konklusion)

Ifølge de undersøgte egenskaber drages en konklusion om den isolerede kultur

Første fase af forskning. Studiet af patologisk materiale begynder med mikroskopi. Mikroskopi af farvet naturligt materiale gør det muligt at fastslå omtrentlig sammensætningen af ​​det mikrobielle landskab af det undersøgte objekt, nogle morfologiske træk ved mikroorganismer. Resultaterne af mikroskopi af naturligt materiale bestemmer i høj grad forløbet af yderligere forskning, og efterfølgende sammenlignes de med data opnået under podning på næringsmedier.

Med et tilstrækkeligt indhold af patogene mikroorganismer i prøven udføres podning på tætte næringsmedier (for at opnå isolerede kolonier). Hvis der er få bakterier i testmaterialet, så udføres podningen på flydende næringsstofberigelsesmedie. Næringsmedier udvælges i henhold til mikroorganismernes krav.

Dyrkning af mikroorganismer er kun mulig, når der skabes optimale betingelser for deres vitale aktivitet og overholder reglerne, der udelukker forurening (tilfældig kontaminering af fremmede mikrober) af testmaterialet. Kunstige forhold, der ville udelukke kulturkontamination med andre arter, kan skabes i et reagensglas, en kolbe eller en petriskål. Alle redskaber og næringsmedier skal være sterile og, efter podning af mikrobielt materiale, beskyttet mod forurening udefra, hvilket opnås ved hjælp af propper eller metalhætter og låg. Manipulationer med testmaterialet bør udføres i flammezonen af ​​en alkohollampe for at udelukke kontaminering af materialet fra det ydre miljø samt for at overholde sikkerhedsbestemmelserne.

Podning af materialet på næringsmedier bør foretages senest 2 timer fra tidspunktet for indsamlingen.

Anden fase af forskning. Studie af kolonier og isolering af renkulturer. Efter en dag med inkubation vokser kolonier på pladerne, og på det første slag er væksten kontinuerlig, og på de næste - isolerede kolonier. En koloni er en samling af mikrober af samme art, der er vokset fra en enkelt celle. Da materialet oftest er en blanding af mikrober, vokser flere typer kolonier. Forskellige kolonier er markeret med en blyant, skitserer dem med en cirkel fra siden af ​​bunden og studerer dem (tabel 12). Først og fremmest skal du studere kolonierne med det blotte øje: makroskopiske tegn. Skålen ses (uden at åbne den) fra bunden i transmitteret lys, gennemsigtigheden af ​​kolonierne noteres (gennemsigtig, hvis den ikke fanger lys; gennemskinnelig, hvis den delvist fanger lys; uigennemsigtig, hvis lys ikke passerer gennem koloni), mål (i mm) størrelsen af ​​kolonierne. Derefter studerer de kolonierne fra siden af ​​låget, noterer formen (regelmæssig rund, uregelmæssig, flad, konveks), overfladens beskaffenhed (glat, skinnende, mat, ru, rynket, våd, tør, slimet), farve (farveløs, farvet).

Tabel 12. Skema for undersøgelse af kolonier

Bemærk: Punkterne 5-7 studeres med et mikroskop med lav forstørrelse eller under et forstørrelsesglas.

Du kan se forskellen mellem kolonierne endnu bedre, når du zoomer ind på dem. For at gøre dette placeres en lukket skål på hovedet på et objektbord, kondensatoren sænkes lidt, en lille forstørrelse af objektivet (x8) bruges, flytter skålen, mikroskopiske tegn studeres i kolonierne: arten af kant (glat, bølget, takket, bølget), struktur (homogen, granulær, fibrøs, homogen eller forskellig i midten og langs periferien).

Dernæst studeres morfologien af ​​mikrobielle celler fra kolonierne. For at gøre dette laves udstrygninger fra en del af hver af de markerede kolonier, farvet efter Gram. Når du tager kolonier, skal du være opmærksom på konsistensen (tør, hvis kolonien smuldrer og er svær at tage; blød, hvis den let tages på løkken; slimet, hvis kolonien rækker ud efter løkken; hård, hvis en del af kolonien tages ikke af løkken, kun hele kolonien kan fjernes).

Når man ser udstrygninger, fastslås det, at kolonien er repræsenteret af én type mikrobe, derfor kan rene bakteriekulturer isoleres. For at gøre dette fra de undersøgte kolonier udføres gensåning på en skrå agar. Ved gensåning fra kolonier skal man passe på at tage præcis de tilsigtede kolonier, uden at røre løkken af ​​nærliggende kolonier. Rørene signeres og inkuberes i en termostat ved 37°C i 24 timer.

Den tredje fase af forskning. Identifikation af den isolerede kultur. Identifikation af mikrober - bestemmelse af den systematiske position af kulturen isoleret fra materialet til arten og varianten. Den første betingelse for pålideligheden af ​​identifikation er kulturens ubetingede renhed. For at identificere mikrober bruges et sæt af tegn: morfologiske (form, størrelse, tilstedeværelse af flageller, kapsler, sporer, indbyrdes arrangement i en smear), tinktorial (relation til Gram-farvning eller andre metoder), kemisk (guanin + cytosin-forhold i et DNA-molekyle), kulturelt (ernæringsmæssige krav, dyrkningsbetingelser, væksthastighed og art på forskellige næringsmedier), enzymatisk (spaltning af forskellige stoffer med dannelse af mellem- og slutprodukter), serologisk (antigen struktur, specificitet), biologisk ( virulens for dyr, toksicitet, allergenicitet, virkningen af ​​antibiotika osv.).

Til biokemisk differentiering studerer de bakteriers evne til at fermentere kulhydrater med dannelse af mellemliggende slutprodukter, evnen til at nedbryde proteiner og peptoner og studerer redoxenzymer.

Til undersøgelse af sakkarolytiske enzymer Isolerede kulturer inokuleres i reagensglas med semi-flydende medier indeholdende lactose, glucose og andre kulhydrater og polyvalente alkoholer. På semi-flydende medier udføres podning ved injektion i mediets dybde. Ved såning ved injektion holdes reagensglasset med mediet på skrå, proppen fjernes, og kanten af ​​reagensglasset brændes. Materialet tages med en steril løkke, og en søjle af næringsmedium gennembores næsten til bunden med det.

Til bestemmelse af proteolytiske enzymer den isolerede kultur inokuleres i peptonvand eller BCH. For at gøre dette tager de et reagensglas med podning tættere på sig selv, og et reagensglas med mediet - længere væk fra dem selv. Begge reagensglas åbnes samtidigt, der fanger deres propper med lillefingeren og kanten af ​​håndfladen, kanterne af reagensglassene brændes, lidt kultur fanges med en calcineret afkølet sløjfe og overføres til det andet reagensglas, tritureret i et flydende medium på væggen af ​​reagensglasset og vasket af med mediet.

Ved såning og gensåning skal man være opmærksom på overholdelse af sterilitetsreglerne for ikke at forurene deres afgrøder med fremmed mikroflora og heller ikke for at forurene miljøet. Rørene mærkes og placeres i en termostat til inkubation ved en temperatur på 37°C i en dag.

Konklusion

Regnskab for resultater. Forskningskonklusion. Resultaterne af identifikation tages i betragtning, og baseret på de samlede data, der er opnået, baseret på klassificeringen og karakteristika for typestammerne beskrevet i manualen (Bergy's guide, 1994-1996), bestemmes typen af ​​isolerede kulturer.

Praktisk lektion nummer 2.

Emne: Bakteriologisk metode til diagnosticering af infektionssygdomme.

Formål: At studere metoder til isolering af rene bakteriekulturer og at beherske den bakteriologiske metode til diagnosticering af infektionssygdomme.

Spørgsmål til selvforberedelse:

1. Regler for indsamling og transport af testmaterialet til bakteriologisk undersøgelse.

2 Regler for udstedelse af henvisning til bakteriologisk undersøgelse.

3. Metoder til isolering af rene kulturer af mikroorganismer.

4. Bakteriologisk diagnostisk metode. Mål. Niveauer. diagnostisk værdi.

Grundlæggende begreber for emnet.

Den bakteriologiske metode er den vigtigste metode til diagnosticering af infektionssygdomme. Dens essens er bestemmelsen af ​​typen af ​​infektiøst middel, derfor kan der, baseret på resultaterne af den bakteriologiske metode, stilles en ætiologisk (endelig) diagnose. Den største ulempe ved metoden er undersøgelsens varighed - fra 3 til 5 dage, og i nogle tilfælde endnu mere.

Succesen med den bakteriologiske metode afhænger i høj grad af den indledende fase, herunder prøveudtagningen af ​​testmaterialet og dets transport, og designet af en henvisning til et bakteriologisk laboratorium. I dette tilfælde skal en række regler overholdes.

Prøveudtagningen af ​​testmaterialet skal udføres før start af antibiotikabehandling eller 8-10 timer efter sidste dosis. For at undgå kontaminering af prøven med mikroflora i miljøet er det nødvendigt at observere den strengeste asepsis. For at gøre dette skal du bruge sterilt materiale: a) vatpinde til at tage materiale fra såret, fra slimhinderne (øjne, svælg, næse); b) en trådløkke til materiale fra skeden, anus; c) en sprøjte til at tage blod, pus; d) sterile retter til direkte opsamling af urin, sputum, afføring i den. Transport af det modtagne materiale bør udføres hurtigst muligt (2-3 timer) i særlige kasser eller kufferter. Henvisningen vedlægges den kliniske prøve som et ledsagedokument. Den indeholder de grundlæggende oplysninger, der er nødvendige for at udføre en mikrobiologisk undersøgelse:

efternavn, navn, patronym, patientens alder; den foreslåede diagnose af sygdommen; forudgående antimikrobiel terapi; materialets art; dato og tidspunkt for at tage materialet; formålet med undersøgelsen; navnet på den medicinske institution, nummeret på afdelingen, afdelingen; den behandlende læges underskrift.

Den bakteriologiske metode udføres i to trin (fig. 2.1.):

I første fase sås testmaterialet på et fast eller flydende næringsmedium, kulturegenskaber vurderes, mistænkelige kolonier udvælges og screenes på en skrå agar. Identifikationsstadiet omfatter en obligatorisk undersøgelse af egenskaberne og strukturen af ​​den isolerede renkultur, samt yderligere undersøgelser for at bestemme antibiotikafølsomhed, fagfølsomhed, fagtypebestemmelse, undersøgelse af patogenicitet og persistente egenskaber.

Elevernes selvstændige arbejde i klasseværelset.

Job 1

Formål: At mestre den bakteriologiske diagnosemetode.

Opgave. Det bakteriologiske laboratorium modtog testmaterialet (fæces) fra en patient med en foreløbig diagnose: "Madforgiftning?". Mikroskopisk undersøgelse af materialet afslørede gram-positive kokker og gram-negative stave.

Isoler rene kulturer af mikroorganismer, udfør deres identifikation. Bestem ætiologien for madforgiftning.

Metode:

Alle stadier af den bakteriologiske metode udføres betinget i løbet af en lektion: eleven udfører manipulationerne af det næste trin, tager materialet til termostaten og modtager straks det færdige resultat til næste trin af undersøgelsen.

1. Såning af testmaterialet på agar i en petriskål ved mekanisk adskillelse for at opnå individuelle kolonier (1. dag).

Steriliseret i flammen fra en brænder og en afkølet sløjfe, tag materialet til såning og bring det ind i koppen, åbne låget lidt. På overfladen af ​​næringsmediet er materialet fordelt i en sløjfe som følger: Ved kanten af ​​bægeret dannes et ovalt område med hyppige strøg, hvorpå en betydelig del af materialet forbliver, derefter foretages parallelle strøg kl. en afstand på 0,5 cm fra den ene kant af koppen til den anden. Ved såning skal løkken holdes parallelt med agaren for ikke at ridse den (fig. 2.2.a). Efter sigtning fjernes løkken fra fadet og brændes straks i en flamme, mens petriskålen lukkes med låg. Koppen mærkes og stilles på hovedet i en termostat i en dag.

2. Studiet af dyrkede koloniers kulturelle egenskaber (2. dag).

En dag senere, med korrekt såning, vokser individuelle kolonier på de sidste strøg (fig. 2.2.b). Differentiere forskellige typer kolonier efter størrelse, farve (fig. 2.3.a), form, gennemsigtighed, overfladekarakter (glat, ru) og kant (glat, takket) (fig. 2.3.b). En udstrygning fremstilles af materialet fra en del af kolonierne, farves efter Gram og mikroskoperes. Resten af ​​den undersøgte koloni føres i et reagensglas på en skrå af næringsagar for at opnå en ren kultur. Såning placeres i en termostat i en dag.

3. Identifikation af isoleret ren kultur (3. dag).

En dag senere identificeres den dyrkede renkultur ved de vigtigste artskarakteristika. Morfologi studeres ved mikroskopi af en udstrygning fra en ren kultur. Renkultur sås på testsystemer (stafitest, enterotest) for at studere aktivitet. For at gøre dette tilberedes en 1-milliards suspension af bakterier i fysiologisk saltvand, derefter tilsættes 0,1 ml af suspensionen til brøndene i testsystemet med dosering eller Pasteur-pipetter. Tabletten placeres i en termostat i en dag.

4. Bestemmelse af typen af ​​isolerede mikroorganismer (4. dag).

Efter 24 timer skal du evaluere resultaterne af biokemisk aktivitet ved at ændre farven på indikatoren i brønden og sammenligne dem med tabellerne i testsystemet. Ifølge resultaterne af at studere egenskaberne af isolerede renkulturer bestemmes typerne af mikroorganismer, hvilket er et af de ultimative mål for den bakteriologiske diagnostiske metode. Burgeys determinant bruges.

Resultatet dokumenteres i form af en undersøgelsesprotokol.

FORSKNINGSPROTOKOL.