एक सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण विशिष्ट है। कॉम्ब्स टेस्ट: नैदानिक ​​और प्रयोगशाला पहलू

चिकित्सा पद्धति में मौजूद कई एंटीजन में से तीन प्रकार के रक्त एग्लूटीनोजेन को सबसे अधिक महत्व दिया जाता है। उनमें से एक आरएच कारक के प्रकट होने के लिए जिम्मेदार प्रकार है: यदि यह एरिथ्रोसाइट झिल्ली पर मौजूद है, तो आरएच + रक्त समूह का निदान किया जाता है, यदि यह अनुपस्थित है - आरएच-। यदि आरएच + एग्लूटीनोजेन वाले एरिथ्रोसाइट्स आरएच-नकारात्मक रक्त की संरचना में प्रवेश करते हैं, तो शरीर एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया को ट्रिगर करता है और इस एंटीजन के लिए एंटीबॉडी का उत्पादन करना शुरू कर देता है, जो रोग संबंधी स्थितियों का कारण बनता है।

संदर्भ! आरएच कारक कई दर्जन प्रतिजनों की एक जटिल बहुघटक प्रणाली है। इनमें से सबसे आम टाइप डी एग्लूटीनोजेन (85% मामले), साथ ही ई और सी हैं।

Coombs का परीक्षण केवल प्रत्यक्ष संकेतों की उपस्थिति में किया जाता है। कॉम्ब्स परीक्षण निर्धारित करने के कारणों की एक सामान्य सूची:

• गर्भावस्था की योजना और प्रबंधन (माता-पिता के पास अलग-अलग आरएच हैं);
• रक्त आधान के लिए दान और तैयारी (आरएच में बेमेल रक्त AB0 प्रणाली में बेमेल से कम हानिकारक नहीं है);
• नियोजित सर्जिकल हस्तक्षेप (रक्त आधान के साथ रक्त की कमी को फिर से भरने के मामले में);
• हेमोलिटिक रोगों का निदान

अधिक विशिष्ट संकेत किए जा रहे अध्ययन के प्रकार पर निर्भर करते हैं।

डायरेक्ट कॉम्ब्स टेस्ट

एक सीधा परीक्षण लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर एंटीबॉडी का पता लगाता है। मौजूदा के निदान के लिए यह आवश्यक है हेमोलिटिक पैथोलॉजी:

• ऑटोइम्यून (एरिथ्रोसाइट्स और हीमोग्लोबिन शरीर के अपने एंटीबॉडी के हमले के परिणामस्वरूप नष्ट हो जाते हैं);
• दवा (पैथोलॉजिकल प्रक्रिया कुछ दवाओं जैसे क्विनिडाइन या प्रोकेनामाइड के सेवन को ट्रिगर करती है);
• आधान के बाद (आधान के दौरान रक्त के प्रकार के बेमेल के साथ), साथ ही गर्भावस्था के दौरान आरएच संघर्ष के रूप में (नवजात शिशुओं के एरिथ्रोब्लास्टोसिस)।

संदर्भ! हेमोलिटिक एनीमिया हेमोलिसिस के परिणामस्वरूप लाल रक्त कोशिकाओं के समय से पहले विनाश से जुड़ी बीमारी है, जो अपर्याप्त रक्त ऑक्सीजन संतृप्ति और मस्तिष्क और / या आंतरिक अंगों के हाइपोक्सिया की ओर जाता है।

ऑन्कोलॉजिकल, संक्रामक, आमवाती रोगों में रक्त तत्वों का हेमोलिसिस देखा जाता है, इसलिए पैथोलॉजिकल स्थिति के निदान के अतिरिक्त साधन के रूप में प्रत्यक्ष Coombs परीक्षण का उपयोग किया जा सकता है। साथ ही, यह याद रखने योग्य है: विश्लेषण का नकारात्मक मूल्य हेमोलिसिस की संभावना को बाहर नहीं करता है, लेकिन अतिरिक्त परीक्षा का कारण है।

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण

पैथोलॉजिकल स्थितियों को रोकने के लिए एक अप्रत्यक्ष परीक्षण का अधिक बार उपयोग किया जाता है।यह रक्त प्लाज्मा में एंटीबॉडी का पता लगाने में मदद करता है, जो गर्भावस्था के दौरान आधान अनुकूलता का आकलन करने और आरएच संघर्ष के जोखिमों का निदान करने के लिए आवश्यक है।

80% से अधिक लोगों के पास सकारात्मक आरएच कारक (आरएच +) है, क्रमशः 20% से कम आरएच-नकारात्मक हैं। यदि एक Rh- माता एक Rh+ बच्चे को विकसित करती है, तो उसका शरीर एंटीबॉडी का उत्पादन करना शुरू कर देता है जो भ्रूण की लाल रक्त कोशिकाओं पर हमला करता है, जिससे हेमोलिसिस होता है।

इस तथ्य को ध्यान में रखते हुए कि "अलग-अलग-रीसस" विवाहों का प्रतिशत 12-15% तक पहुंच जाता है, नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग का जोखिम अधिक होना चाहिए, लेकिन वास्तव में, महिलाओं में ऐसे 25 में से केवल 1 मामले में, घटना संवेदीकरण मनाया जाता है (200 सफल जन्मों के लिए, हेमोलिटिक पैथोलॉजी का 1 उदाहरण)। यह आंशिक रूप से इस तथ्य के कारण है कि पहला आरएच-पॉजिटिव बच्चा आमतौर पर मां के शरीर की खुली आक्रामकता का कारण नहीं बनता है; अधिकांश मामले दूसरे और बाद के बच्चों में होते हैं। एक विशेष एलर्जेन के लिए पारंपरिक संवेदीकरण के साथ भी यही सिद्धांत लागू होता है।

पहले संपर्क पर कोई प्रतिक्रिया नहीं होती है। शरीर केवल इसके लिए एक नए एंटीजन से परिचित होता है, आईजीएम वर्ग के एंटीबॉडी का उत्पादन करता है, जो तेजी से प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए जिम्मेदार होते हैं, लेकिन शायद ही कभी बच्चे के रक्त में प्लेसेंटल बाधा में प्रवेश करते हैं। सभी पैथोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं बार-बार "मिलने" पर प्रकट होती हैं, जब शरीर में आईजीजी वर्ग के एंटीबॉडी का उत्पादन शुरू होता है, आसानी से भ्रूण के रक्तप्रवाह में घुसना, हेमोलिसिस की प्रक्रिया शुरू करना।

गर्भावस्था के दौरान अप्रत्यक्ष Coumbs परीक्षणआपको मां के शरीर में एंटीबॉडी की उपस्थिति का पता लगाने और समय पर संवेदीकरण के प्रारंभिक चरण की पहचान करने की अनुमति देता है। एक सकारात्मक उत्तर के लिए प्रसव से 3-4 सप्ताह पहले एंटीबॉडी टिटर के मासिक अध्ययन और अनिवार्य अस्पताल में भर्ती होने की आवश्यकता होती है।

संदर्भ! आरएच कारक असंगति किसी भी तरह से मां की स्थिति को प्रभावित नहीं करती है, हेमोलिटिक रोग केवल एक बच्चे में विकसित होता है। गंभीर मामलों में और समय पर प्रतिक्रिया के अभाव में, गर्भ में या जन्म के तुरंत बाद भ्रूण की मृत्यु हो सकती है।

प्रक्रिया और इसके कार्यान्वयन की तैयारी

निदान के लिए शिरापरक रक्त का उपयोग किया जाता है। कॉम्ब्स परीक्षण के लिए विशेष दीर्घकालिक तैयारी की आवश्यकता नहीं होती है। विश्लेषण के लिए नस से रक्त लेने से पहले नियमों के एक मानक सेट का पालन करने का प्रयास करें:

• 3 दिनों के लिए शराब, दवाएं (यदि संभव हो तो) छोड़ दें;
• विश्लेषण के लिए रक्त लेने से पहले 8 घंटे से पहले अंतिम भोजन की योजना बनाएं;
• 1 घंटे में धूम्रपान, शारीरिक, मानसिक और भावनात्मक तनाव छोड़ दें;
• प्रक्रिया से पहले, एक गिलास साफ गैर-कार्बोनेटेड पानी पिएं।

शोध पद्धति रक्तगुल्म प्रतिक्रिया पर आधारित है।

प्रत्यक्ष परीक्षण करते समयरक्त के नमूने को ज्ञात संकेतकों के साथ पहले से तैयार एंटीग्लोबुलिन सीरम के संपर्क में लाया जाता है, मिश्रण को कुछ समय के लिए रखा जाता है और एग्लूटिनेट्स के लिए जाँच की जाती है, जो एरिथ्रोसाइट्स पर एंटीबॉडी मौजूद होने पर बनते हैं। एग्लुटिनेटिंग टिटर का उपयोग करके एग्लूटिनेट्स के स्तर का निदान किया जाता है।

अप्रत्यक्ष परीक्षण Coombs की एक समान तकनीक है, लेकिन क्रियाओं का एक अधिक जटिल क्रम है। एंटीजेनिक एरिथ्रोसाइट्स (आरएच कारक के साथ) को अलग किए गए रक्त सीरम में पेश किया जाता है, और इन जोड़तोड़ के बाद ही एंटीग्लोबुलिन सीरम को एग्लूटिनेट्स के निदान और टिटर के लिए जोड़ा जाता है।

शोध का परिणाम

आम तौर पर, प्रत्यक्ष और दोनों अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षणएक नकारात्मक परिणाम देना चाहिए:

• एक नकारात्मक प्रत्यक्ष परीक्षण इंगित करता है कि लाल रक्त कोशिकाओं से जुड़े आरएच कारक के विशिष्ट एंटीबॉडी रक्त में अनुपस्थित हैं और हेमोलिसिस का कारण नहीं हो सकते हैं
• एक नकारात्मक अप्रत्यक्ष परीक्षण से पता चलता है कि रक्त प्लाज्मा में आरएच कारक के लिए कोई मुक्त एंटीबॉडी भी नहीं हैं; तथ्य आरएच कारक के अनुसार प्राप्तकर्ता के रक्त (या मां और बच्चे के रक्त) के साथ दाता के रक्त की अनुकूलता को इंगित करता है।

एक सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण शरीर के आरएच संवेदीकरण के तथ्य को इंगित करता है, जो रक्त आधान की स्थिति में या एक अलग आरएच स्थिति वाले बच्चे को ले जाने पर आरएच संघर्ष का मुख्य कारण है। इस मामले में, परिणाम 3 महीने (एरिथ्रोसाइट जीवन काल) के लिए अपरिवर्तित रहते हैं। यदि कारण ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया है, तो एक सकारात्मक परीक्षण रोगी को कई वर्षों तक (कुछ मामलों में, जीवन के लिए) परेशान कर सकता है।

संदर्भ! एंटीग्लोबुलिन परीक्षण अत्यधिक संवेदनशील होता है, लेकिन इसमें सूचना सामग्री बहुत कम होती है। यह हेमोलिटिक प्रक्रिया की गतिविधि को पंजीकृत नहीं करता है, एंटीबॉडी के प्रकार को निर्धारित नहीं करता है और पैथोलॉजी के कारण की पहचान करने में सक्षम नहीं है। अधिक संपूर्ण चित्र प्राप्त करने के लिए, उपस्थित चिकित्सक आवश्यक रूप से अतिरिक्त अध्ययन (रक्त माइक्रोस्कोपी, सामान्य और जैव रासायनिक विश्लेषण, आमवाती परीक्षण, ईएसआर, लोहा और फेरिटिन स्तर) निर्धारित करता है।

संवेदीकरण की डिग्री में एक गुणात्मक अभिव्यक्ति हो सकती है ("+" से "++++") या मात्रात्मक - एक कैप्शन के रूप में:

• 1:2 - कम मूल्य, कोई खतरा नहीं;
• 1:4 - 1:8 - प्रतिरक्षात्मक प्रतिक्रिया के विकास की शुरुआत; कोई खतरा नहीं है, लेकिन निरंतर निगरानी की आवश्यकता है;
• 1:16 -1:1024 - संवेदनशीलता का एक उज्ज्वल रूप, तुरंत उपाय किए जाने चाहिए।

सकारात्मक परीक्षण का कारण हो सकता है:

• दाता और प्राप्तकर्ता के आरएच कारक से मेल नहीं खाने पर, बिना टाइप किए रक्त का आधान (या टाइपिंग त्रुटि के साथ);
• गर्भावस्था के दौरान रीसस संघर्ष (यदि पिता और माता में रक्त प्रतिजनों की संरचना मेल नहीं खाती);
• ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया - दोनों जन्मजात (प्राथमिक) और माध्यमिक, जो कुछ बीमारियों (इवांस सिंड्रोम, संक्रामक निमोनिया, सिफलिस, ठंड हीमोग्लोबिनुरिया, लिम्फोमा) का परिणाम है;
• दवा हेमोलिटिक प्रतिक्रिया।

उपरोक्त समस्याओं में से कोई भी रोगी बिना चिकित्सकीय सहायता के हल नहीं कर सकता है। सभी मामलों में, तत्काल परामर्श, पंजीकरण या आपातकालीन अस्पताल में भर्ती की आवश्यकता होगी।

ध्यान! दुर्लभ मामलों में, झूठी सकारात्मक कॉम्ब्स परीक्षण संभव है। इसका कारण बार-बार रक्त संक्रमण हो सकता है, साथ ही साथ कई बीमारियां भी हो सकती हैं: संधिशोथ, ल्यूपस एरिथेमेटोसस, सारकॉइडोसिस। इसके अलावा, इस घटना को तिल्ली को हटाने के साथ-साथ प्रतिक्रिया के दौरान उल्लंघन (सामग्री के लगातार हिलने, दूषित पदार्थों की उपस्थिति) के उल्लंघन के बाद देखा जा सकता है।

Coombs परीक्षण एक प्रयोगशाला परीक्षण है जो रक्तगुल्म को प्रभावित करके किया जाता है। यह इम्युनोग्लोबुलिन और एंजाइम तत्वों के प्रति एंटीबॉडी की संवेदनशीलता के साथ-साथ C3 या Lg के साथ लेपित एरिथ्रोसाइट्स को जोड़ने की उनकी क्षमता पर आधारित है।

कॉम्ब्स का प्रत्यक्ष निदान

कोशिकाओं के बाहर घुड़सवार एंटीबॉडी या पूरक घटकों का पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है। प्रत्यक्ष Coombs परीक्षण निम्न चरणों द्वारा किया जाता है।

ऐसे परीक्षण का उपयोग

डायरेक्ट कॉम्ब्स डायग्नोसिस का उपयोग कुछ मामलों में किया जाता है, जैसे:

• आधान प्रभाव;
• ऑटोइम्यून हेमोलिसिस;
• दवा-प्रेरित हेमोलिटिक एनीमिया।

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण

यह डायग्नोस्टिक सीरम में कोशिकाओं के लिए एंटीबॉडी का पता लगाना संभव बनाता है, जो एक नियम के रूप में, डोनर टाइप 0 एरिथ्रोसाइट्स के साथ होता है, और फिर एक सीधा परीक्षण किया जाता है। निम्नलिखित मामलों में अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स डायग्नोस्टिक्स लागू करें:

विश्लेषण की तैयारी कैसे करें

सर्वेक्षण की तैयारी के कुछ नियम हैं।

1. यदि रोगी नवजात है, तो माता-पिता को पता होना चाहिए कि परीक्षण एचएन (नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग) का निदान करने में मदद करेगा।
2. यदि रोगी को हेमोलिटिक एनीमिया का संदेह है, तो उसे समझाया जाना चाहिए कि विश्लेषण उसे यह पता लगाने की अनुमति देगा कि क्या यह सुरक्षात्मक विकारों, दवाओं या अन्य कारकों के कारण होता है।
3. Coombs परीक्षण, प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष, कोई आहार या आहार प्रतिबंध नहीं लगाता है।
4. रोगी को सूचित करना आवश्यक है कि परीक्षा के लिए एक नस से रक्त लिया जाएगा, और उसे यह भी बताना होगा कि वास्तव में वेनिपंक्चर कब किया जाएगा।
5. आपको बांह पर पट्टी बांधने की अवधि और प्रक्रिया के दौरान असुविधा की संभावना के बारे में भी चेतावनी दी जानी चाहिए।
6. ड्रग्स जो नमूना के परिणाम को प्रभावित कर सकते हैं उन्हें बंद कर दिया जाना चाहिए।

इन दवाओं में शामिल हैं:

• "स्ट्रेप्टोमाइसिन";
• "मिथाइलडोपा";
• "प्रोकैनामाइड";
• सल्फोनामाइड्स;
• "मेलफलन";
• "क्विनिडाइन";
• "रिफैम्पिन";
• "आइसोनियाज़िड";
• सेफलोस्पोरिन;
• "हाइड्रालज़ीन";
• "क्लोरप्रोमेज़ीन";
• "लेवोडोपा";
• "टेट्रासाइक्लिन";
• "डिफेनिलहाइडेंटोइन";
• "एथोसुक्सिमाइड";
• "पेनिसिलिन";
• मेफ़ानामिक एसिड।

ब्लड सैंपलिंग सुबह खाली पेट की जाती है।

आयोजन कैसे होता है

Coombs परीक्षण निम्न क्रम में किया जाता है:

1. एक वयस्क रोगी में डायग्नोस्टिक्स करते समय, वेनिपंक्चर के बाद, रक्त को EDTA (एथिलीनिडामिनेटेट्रासेटेट) के साथ ट्यूबों में ले जाया जाता है।
2. नवजात शिशु से, रक्त गर्भनाल से ईडीटीए के साथ एक बीकर में लिया जाता है।
3. रक्तस्राव बंद होने तक पंचर क्षेत्र को कपास झाड़ू से दबाया जाता है।
4. जब वेनिपंक्चर साइट पर एक खरोंच दिखाई देती है, तो गर्म सेक निर्धारित किया जाता है।
5. रक्त निकालने के बाद, रोगी को वापसी की दवाएं लेने के लिए वापस जाने की अनुमति दी जाती है।
6. नवजात शिशु के माता-पिता को सूचित किया जाना चाहिए कि एनीमिया की गतिशीलता की निगरानी के लिए द्वितीयक विश्लेषण की आवश्यकता हो सकती है।

कॉम्ब्स परीक्षण के लाभ

इस तरह के एक अध्ययन के कुछ फायदे हैं, अर्थात्:

विश्लेषण के विपक्ष

पॉज़िटिव कॉम्ब्स टेस्ट परीक्षा का एक श्रमसाध्य तरीका है, जो निष्पादन की एक विशिष्ट सटीकता का सुझाव देता है। इसका उपयोग करते समय, कुछ कठिनाइयों का सामना करना पड़ सकता है, विशेष रूप से कमजोर सकारात्मक प्रभावों की व्याख्या से संबंधित।

यह स्थापित किया गया है कि Coombs के नमूनों के उत्पादन में गलत नकारात्मक या कमजोर सकारात्मक प्रतिक्रियाएं कोशिकाओं की असंतोषजनक सक्रिय धुलाई, सीरम अवशेषों द्वारा एंटीग्लोबुलिन अभिकर्मक को कमजोर करने के साथ-साथ एक गैर-वसा उपस्थिति वाले यौगिकों के परिणाम हो सकती हैं, जिस पर एंटीग्लोबुलिन को ठीक किया जा सकता है, इसकी प्रभावशीलता खो रही है।

Coombs परीक्षण में एक और खामी है - एंटीग्लोबुलिन अभिकर्मक की कम स्थिरता, जिसके अधिग्रहण और भंडारण में व्यक्तिगत विशेषताएं होती हैं, जो समान रूप से रक्तगुल्म पर एंटीग्लोबुलिन सीरम के प्रभाव का आकलन करना मुश्किल बना देता है।

अध्ययन के दौरान जिन रोगों का पता लगाया जा सकता है

कॉम्ब्स डायग्नोस्टिक्स कुछ प्रकार की बीमारियों का पता लगाना संभव बनाता है, जैसे:

• नवजात शिशुओं के हेमोलिटिक अस्वस्थता;
• विभिन्न आधान प्रतिक्रियाएं;
• ऑटोइम्यून हेमोलिसिस;
• औषधीय हेमोलिटिक एनीमिया।

आज तक, Coombs परीक्षण को एक वयस्क और नवजात शिशु दोनों में काफी लोकप्रिय रक्त परीक्षण प्रणाली माना जाता है। यह कई अलग-अलग बीमारियों की पहचान करना संभव बनाता है।

Coombs परीक्षण एक नैदानिक ​​रक्त परीक्षण है जो यह देखने के लिए किया जाता है कि क्या रक्त में कुछ ऐसे एंटीबॉडी हैं जो सुरक्षित नहीं हो सकते हैं। ये एंटीबॉडी लाल रक्त कोशिकाओं से चिपक जाते हैं और प्रतिरक्षा प्रणाली पर आक्रमण कर सकते हैं और अन्य तरीकों से नुकसान पहुंचा सकते हैं। चिकित्सा शब्दावली में, इस परीक्षण को एंटीग्लोबुलिन टेस्ट (एजीटी) भी कहा जाता है।

कॉम्ब्स टेस्ट के प्रकार

Coombs परीक्षण दो प्रकार के होते हैं - प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष।

डायरेक्ट कॉम्ब्स टेस्ट, जिसे डायरेक्ट (DAT) के रूप में भी जाना जाता है, ऑटो-एंटीबॉडी का पता लगाता है जो लाल रक्त कोशिकाओं की सतह से जुड़ जाता है। ये एंटीबॉडी कभी-कभी शरीर में कुछ बीमारियों के कारण या प्रोकेनामाइड, मेथिल्डोपा, या क्विनिडाइन जैसी कुछ दवाएं लेते समय उत्पन्न होते हैं।

ये एंटीबॉडीज खतरनाक होते हैं क्योंकि ये कभी-कभी लाल रक्त कोशिकाओं को नष्ट करके एनीमिया का कारण बनते हैं।

यह परीक्षण कभी-कभी पीलिया या एनीमिया के कारण का निदान करने के लिए निर्धारित किया जाता है।

आम तौर पर, कॉम्ब्स प्रतिक्रिया नकारात्मक होती है।

के लिए सकारात्मक:

• नवजात शिशु की हेमोलिटिक बीमारी;
• ऑटोइम्यून हेमोलिसिस;
• हेमोलिटिक आधान प्रतिक्रियाएं;
• दवा-प्रेरित प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया।

अप्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण, के रूप में भी जाना जाता है, रक्त सीरम में निहित लाल रक्त कोशिकाओं के एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए प्रयोग किया जाता है (सीरम स्पष्ट पीला रक्त तरल है जो लाल रक्त कोशिकाओं और कौयगुलांट के उत्सर्जित होने के बाद रहता है)।

अप्रत्यक्ष Coombs परीक्षण का उपयोग रक्त आधान में यह निर्धारित करने के लिए किया जाता है कि दाता का रक्त प्राप्तकर्ता के रक्त से मेल खाता है या नहीं। इसे संगतता परीक्षण कहा जाता है और दाता के रक्त पर किसी भी प्रतिकूल प्रतिक्रिया को रोकने में मदद करता है। गर्भवती महिलाओं के लिए भी इस विश्लेषण की सिफारिश की जाती है। कुछ महिलाओं में आईजीजी एंटीबॉडी होते हैं जो भ्रूण में प्लेसेंटा को पार कर सकते हैं और नवजात शिशु को नुकसान पहुंचा सकते हैं, जिससे हेमोलिटिक एनीमिया नामक हेमोलिटिक बीमारी हो सकती है।

प्रक्रिया

रक्त एक नस से सिरिंज के माध्यम से लिया जाता है, आमतौर पर हाथ के पीछे या कोहनी के टेढ़े भाग से। इससे पहले पंचर वाली जगह को पूरी तरह से कीटाणुरहित किया जाता है, और रक्त परीक्षण लेने के बाद, साफ धुंध या रूई लगाई जाती है।

परिणामी रक्त को प्रयोगशाला में शुद्ध किया जाता है, और लाल रक्त कोशिकाओं को अलग किया जाता है। फिर नमूने की विभिन्न सीरम और कॉम्ब्स अभिकर्मकों का उपयोग करके क्रमिक रूप से जांच की जाती है, जिसे काउंटर किया जाता है। अगर एग्लूटिनेशन (लाल रक्त कोशिकाओं का जमाव) नहीं है, तो इसका मतलब सकारात्मक परिणाम है।

हालांकि, यदि परीक्षण नकारात्मक है, तो इसका मतलब है कि रक्त में एंटीबॉडी हैं जो लाल रक्त कोशिकाओं के खिलाफ कार्य करते हैं। यह विभिन्न रोगों जैसे एनीमिया (या तो प्राकृतिक या दवा-प्रेरित), सिफलिस या माइकोप्लाज़्मा संक्रमण का संकेत दे सकता है। परिणाम प्राप्त करने के बाद, उपस्थित चिकित्सक उचित उपचार निर्धारित करेगा।

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1945 में Coombs, Morant, Reis द्वारा अपूर्ण एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए डिज़ाइन किया गया एक एंटीग्लोबुलिन परीक्षण प्रस्तावित किया गया था और बाद में इसे Coombs परीक्षण कहा गया। इस पद्धति का सार इस तथ्य में निहित है कि मानव इम्युनोग्लोबुलिन के प्रति एंटीबॉडी वाले एंटीग्लोबुलिन सीरम, जब अपूर्ण एंटीबॉडी के साथ संवेदनशील एरिथ्रोसाइट्स के साथ प्रतिक्रिया करते हैं, तो उनके समूहन की ओर जाता है।

लाल रक्त कोशिकाओं की सतह पर एंटीबॉडी स्थिर हैं या रक्त प्लाज्मा में मुक्त हैं, इस पर निर्भर करते हुए, प्रत्यक्ष या अप्रत्यक्ष Coombs परीक्षण का उपयोग किया जाता है।

सीधे कॉम्ब्स परीक्षण उन मामलों में किया जाता है जहां यह मानने का कारण है कि अध्ययन के तहत लाल रक्त कोशिकाएं पहले से ही हैं विवो मेंउपयुक्त एंटीबॉडी के साथ संवेदीकृत किया गया है, अर्थात प्रतिक्रिया का पहला चरण - एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर एंटीबॉडी का निर्धारण - शरीर में हुआ और एंटीग्लोबुलिन सीरम के बाद के अतिरिक्त संवेदी कोशिकाओं के एग्लूटिनेशन का कारण बनता है।

इनडायरेक्ट कॉम्ब्स टेस्ट के इस्तेमाल से टेस्ट सीरम में मौजूद अधूरे एंटीबॉडी का पता लगाया जाता है। इस मामले में, प्रतिक्रिया दो चरणों में आगे बढ़ती है। पहला चरण परीक्षण सीरम के साथ परीक्षण एरिथ्रोसाइट्स का ऊष्मायन है, जिसके दौरान परीक्षण सीरम नमूने में निहित एंटीबॉडी एरिथ्रोसाइट सतह पर तय की जाती हैं। दूसरा चरण एंटीग्लोबुलिन सीरम का जोड़ है।

अब तक, इम्यूनोपैथोलॉजिकल स्थितियों के निदान के लिए प्रयोगशाला अभ्यास में Coombs परीक्षण का व्यापक रूप से उपयोग किया गया है, विशेष रूप से, ऑटोइम्यून हेमोलिटिक एनीमिया में, एंटीबॉडी के लिए कोशिका झिल्ली के बंधन के कारण एरिथ्रोसाइट्स के विनाश की विशेषता और (या) के घटक पूरक प्रणाली। इसकी मदद से, एरिथ्रोसाइट झिल्ली पर Ig G (आमतौर पर Ig G1 और Ig G3) की उपस्थिति का पता लगाया जाता है, जो पूरक को सक्रिय कर सकता है, और कभी-कभी पूरक (C3d)। हालांकि, रोग की तीव्र अवधि में, एरिथ्रोसाइट्स के विनाश के कारण, जिस पर बड़ी संख्या में एंटीबॉडी तय किए गए थे, हेमोलिटिक संकट के दौरान, साथ ही रोग के जीर्ण पाठ्यक्रम में एंटीबॉडी की अपर्याप्त मात्रा के साथ, ए नेगेटिव डायरेक्ट कॉम्ब्स टेस्ट नोट किया जा सकता है।

इस बात पर जोर दिया जाना चाहिए कि अप्रत्यक्ष Coombs परीक्षण आधान मीडिया के व्यक्तिगत चयन के लिए सबसे अच्छा तरीका है, क्योंकि यह एरिथ्रोसाइट एंटीजन के लिए दाता और प्राप्तकर्ता की व्यक्तिगत अनुकूलता का सबसे सटीक निर्धारण करने की अनुमति देता है।

पूर्व-प्रत्यारोपण अवधि में अंगों और ऊतकों के सभी प्राप्तकर्ताओं और प्रत्यारोपण के बाद भी हेमटोपोइएटिक स्टेम कोशिकाओं के प्राप्तकर्ताओं की जांच में स्वप्रतिपिंडों की उपस्थिति के लिए एक अतिरिक्त प्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण की सिफारिश की जाती है।

इम्यूनोहेमेटोलॉजी और ट्रांसफ्यूजियोलॉजी के अलावा, एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों का व्यापक रूप से कई रोग स्थितियों के निदान में उपयोग किया जाता है: हेमटोलॉजिकल रोगों में, लिम्फोप्रोलिफेरेटिव रोगों सहित, प्रणालीगत संयोजी ऊतक रोगों में, सजोग्रेन रोग, पुरानी सक्रिय हेपेटाइटिस, आदि।

सतह एरिथ्रोसाइट एंटीजन को निर्धारित करने के लिए Coombs के परीक्षण सक्रिय रूप से चिकित्सा आनुवंशिकी और फोरेंसिक चिकित्सा में उपयोग किए जाते हैं।

Coombs परीक्षण एक काफी समय लेने वाली शोध पद्धति है जिसके कार्यान्वयन में विशेष देखभाल की आवश्यकता होती है। इसका उपयोग करते समय, कुछ कठिनाइयाँ जुड़ी होती हैं, विशेष रूप से, कमजोर सकारात्मक प्रतिक्रियाओं की व्याख्या के साथ। यह ज्ञात है कि Coombs परीक्षण करते समय झूठी कमजोर सकारात्मक या नकारात्मक प्रतिक्रियाएं एरिथ्रोसाइट्स की अपर्याप्त प्रभावी धुलाई का परिणाम हो सकती हैं, सीरम के निशान के साथ एंटीग्लोब्युलिन अभिकर्मक के निष्क्रियकरण, और एक गैर-विकृत सतह के साथ संपर्क, जिस पर एंटीग्लोब्युलिन तय किया जा सकता है, अपनी गतिविधि खो रहा है। Coombs परीक्षण का एक और दोष एंटीग्लोबुलिन अभिकर्मक की अस्थिरता है, जिसकी तैयारी और भंडारण में कुछ विशेषताएं होती हैं, जिससे एंटीग्लोबुलिन सीरम के साथ रक्तगुल्म प्रतिक्रिया की मात्रा निर्धारित करना भी मुश्किल हो जाता है।

इसके अलावा, ए होलबर्न, डी वोक एट अल द्वारा किए गए अध्ययन। , ने दिखाया कि लाल कोशिका निलंबन के पुन: निलंबन के दौरान अत्यधिक हिलना गलत नकारात्मक परिणामों का कारण हो सकता है। एंटीग्लोबुलिन परीक्षण करते समय त्रुटिपूर्ण परिणाम एंटीग्लोबुलिन अभिकर्मक में एंटीकोम्प्लीमेंट्री एंटीबॉडी के मिश्रण की उपस्थिति के कारण भी हो सकते हैं, विशेष रूप से C3d, C3c, C4c और C4d पूरक घटकों के लिए, जो ऊष्मायन के दौरान परीक्षण एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर सोख लिए जाते हैं और बनाते हैं एक सकारात्मक परिणाम की उपस्थिति।

परीक्षण के नमूनों को अच्छी तरह से धोने और प्रतिक्रिया की स्थिति को नियंत्रित करके इन कमियों को आसानी से दूर किया जा सकता है।

पिछले एक दशक में, अप्रत्यक्ष Coombs परीक्षण के समय और संवेदनशीलता को कम करने के लिए कम आयनिक शक्ति आइसोटोनिक सलाइन (LISS) का उपयोग किया गया है।

कई लेखकों के अनुसार, एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों का निर्विवाद लाभ उनकी उच्च संवेदनशीलता है, जो गैर-समूहनकारी एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए उपयोग किए जाने वाले वैकल्पिक अनुसंधान विधियों के संकल्प से काफी अधिक है।

हमने पॉलीग्लुसीन, जिलेटिन और एंटीग्लोबुलिन सीरम का उपयोग करके अधूरे एंटीबॉडी की उपस्थिति के लिए रक्त सीरम का अध्ययन करने के तरीकों की तुलना की। अध्ययन के दौरान, जिलेटिन, पॉलीग्लुसीन और अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों का उपयोग करके आइसोइम्यून दाताओं के 140 रक्त सीरम नमूनों में अपूर्ण एंटी-डी एंटीबॉडी के टाइटर्स की निगरानी की गई। इन विधियों का विवरण आम तौर पर स्वीकृत विधियों के अनुसार किया गया था।

यह पाया गया कि, उनके संकल्प के संदर्भ में, एंटी-डी एंटीबॉडी द्वारा एरिथ्रोसाइट संवेदीकरण का पता लगाने के तरीकों को निम्नानुसार व्यवस्थित किया गया है: सबसे संवेदनशील अप्रत्यक्ष Coombs परीक्षण है, फिर जिलेटिन परीक्षण, और सबसे कम जानकारीपूर्ण पॉलीग्लुसीन परीक्षण है। प्रयोगों की इस श्रृंखला में प्राप्त परिणाम पूरी तरह से साहित्य डेटा के अनुरूप हैं, जो हमें यह निष्कर्ष निकालने की अनुमति देता है कि कॉम्ब्स के परीक्षणों की संवेदनशीलता पर्याप्त रूप से उच्च है, जो उच्च स्तर की निश्चितता के साथ एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी की उपस्थिति की पहचान करना संभव बनाता है। शरीर में जो लाल रक्त कोशिकाओं के एग्लूटिनेशन का कारण नहीं बनता है।

हालांकि, कॉम्ब्स के परीक्षणों के अभ्यास में, ऐसे मामले होते हैं जब अधूरे एंटीबॉडी का पता नहीं लगाया जाता है, हालांकि रोग की नैदानिक ​​तस्वीर या पिछले टीकाकरण से उनकी संभावित उपस्थिति का संकेत मिलता है। ऐसे मामलों में, यह माना जा सकता है कि एंटीग्लोबुलिन सीरम एंटीबॉडी द्वारा अवक्षेपित होने के लिए एंटीबॉडी की मात्रा पर्याप्त नहीं है।

इस निष्कर्ष की हमारे अपने प्रयोग द्वारा पुष्टि की गई थी, जिसमें कोशिकाओं के विश्लेषणात्मक माइक्रोइलेक्ट्रोफोरेसिस की विधि का उपयोग करते हुए, परीक्षण एरिथ्रोसाइट्स पर एंटी-डी एंटीबॉडी की उपस्थिति स्थापित की गई थी, जो कि अप्रत्यक्ष Coombs परीक्षण में नहीं पाई गई थी। प्रयोगों की इस श्रृंखला में, एंटीग्लोबुलिन सीरम को एरिथ्रोसाइट्स में जोड़ा गया था, जो पहले प्रतिरक्षित दाताओं के रक्त से प्राप्त सेरा के साथ ऊष्मायन किया गया था, एंटीबॉडी उत्पत्ति की अवधि के दौरान, यानी। उस अवधि के दौरान जब Coombs परीक्षण सहित ज्ञात विधियों ने उनमें एंटीबॉडी का पता नहीं लगाया।

आयोजित अध्ययनों में, एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर अपूर्ण एंटीबॉडी की उपस्थिति का प्रमाण एंटीग्लोबुलिन सीरम के अतिरिक्त होने के बाद संवेदनशील लाल रक्त कोशिकाओं की इलेक्ट्रोफोरेटिक गतिशीलता में सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण परिवर्तन था। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि बाद में अप्रत्यक्ष Coombs परीक्षण में सभी प्रतिरक्षित दाताओं के रक्त सीरम में एंटी-डी एंटीबॉडी पाए गए।

गिलरैंड एट अल। यह भी दिखाया गया है कि एंटीग्लोब्युलिन परीक्षणों को संवेदनशीलता की एक निश्चित सीमा से चिह्नित किया जाता है: एक सकारात्मक परिणाम तभी नोट किया जाता है जब एक एरिथ्रोसाइट की सतह पर कम से कम 500 आईजीजी अणु तय होते हैं।

इसके अलावा, साहित्य में सबूत हैं कि एक संभावित नकारात्मक Coombs परिणाम एंटीबॉडी की कम आत्मीयता के कारण हो सकता है जो लाल रक्त कोशिकाओं को संवेदनशील बनाता है, जिसके परिणामस्वरूप वे धोने के दौरान लाल रक्त कोशिकाओं की सतह से आसानी से निकल जाते हैं।

पूर्वगामी को देखते हुए, यह निष्कर्ष निकाला जा सकता है कि कुछ मामलों में Coombs परीक्षण का एक नकारात्मक परिणाम अभी तक एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर तय किए गए एंटीबॉडी की अनुपस्थिति का प्रमाण नहीं है।

यह ज्ञात है कि कॉम्ब्स की प्रतिक्रियाएं अत्यधिक विशिष्ट हैं और अधिकांश प्रकार के अधूरे एंटीबॉडी का पता लगाने की अनुमति देती हैं। हालांकि, जैसा कि कुछ प्रयोगात्मक डेटा दिखाते हैं, एंटीग्लोबुलिन परीक्षण गैर-प्रतिरक्षात्मक स्थितियों में भी सकारात्मक हो सकते हैं। ई। मुइरहेड एट अल। फेनिलहाइड्राज़िन के प्रशासन के दूसरे दिन, कुत्तों को एक सकारात्मक Coombs परीक्षण के लिए मनाया गया। एक सकारात्मक प्रतिक्रिया की इतनी तेजी से उपस्थिति इसकी प्रतिरक्षात्मक प्रकृति के खिलाफ गवाही देती है और, बल्कि, एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर प्रोटीन के गैर-विशिष्ट सोखना से जुड़ी होती है।

एम विलियम्स एट अल। पाया गया कि क्लैवुलानिक एसिड भी एक सकारात्मक प्रतिक्रिया पैदा कर सकता है, जो लेखकों के अनुसार, एरिथ्रोसाइट सतह पर प्लाज्मा प्रोटीन के गैर-विशिष्ट सोखना से जुड़ा हुआ है। सेफलोस्पोरिन एंटीबायोटिक दवाओं के उपचार में एक समान प्रभाव देखा गया।

उपरोक्त अध्ययनों के लेखक Coombs के परीक्षणों के प्राप्त सकारात्मक परिणामों की गैर-प्रतिरक्षात्मक प्रकृति पर जोर देते हैं और जोर देते हैं कि ये पदार्थ लाल रक्त कोशिका झिल्ली में संशोधन करने में सक्षम हैं, जिसके परिणामस्वरूप एरिथ्रोसाइट्स प्रोटीन को अवशोषित कर सकते हैं (विशेष रूप से, एल्ब्यूमिन), जो आम तौर पर रक्त प्लाज्मा में मौजूद होते हैं और इनमें एंटीबॉडी के गुण नहीं होते हैं। इसके अलावा, यह संभव है कि यह कोशिका की सतह पर अधिशोषित ज़ेनोबायोटिक है, जो कोशिका झिल्ली और प्लाज्मा प्रोटीन के बीच एक कड़ी के रूप में कार्य करता है।

एंटीग्लोबुलिन परीक्षण स्थापित करने के परिणामों की सही व्याख्या के लिए, परिधीय रक्त में युवा और परिपक्व एरिथ्रोसाइट्स के बीच मात्रात्मक अनुपात को भी ध्यान में रखा जाना चाहिए। यह पाया गया कि बढ़े हुए एरिथ्रोन पुनर्जनन की अवधि के दौरान शरीर से पृथक किए गए रेटिकुलोसाइट्स को एंटीग्लोबुलिन सीरम द्वारा समूहित किया जा सकता है।

सकारात्मक प्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण परिणाम यह प्रतिरक्षा प्रणाली के विकारों के साथ विभिन्न रोग स्थितियों में भी प्रयोग किया जाता है, भड़काऊ प्रक्रियाएं एरिथ्रोसाइट झिल्ली पर विभिन्न विशिष्टता के एंटीबॉडी के गैर-विशिष्ट सोखना के लिए अग्रणी होती हैं। इससे पता चलता है कि आईजी जी अणु विशिष्ट एरिथ्रोसाइट एंटीजन के साथ बातचीत नहीं करते हैं, लेकिन केवल अध्ययन के तहत कोशिकाओं की सतह पर तय होते हैं।

यह ध्यान में रखा जाना चाहिए कि डिस्प्रोटीनेमिया के विकास या पैराप्रोटीन की उपस्थिति की विशेषता वाले रोगों के मामलों में Coombs परीक्षण की स्थापना करते समय, प्रोटीन के एरिथ्रोसाइट्स की सतह पर उपस्थिति के कारण एक सकारात्मक परिणाम होता है जिसमें गुण नहीं होते हैं एंटीबॉडी, जो उनकी मदद से पता चला प्रोटीन की प्रकृति के बारे में एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों की अपर्याप्त विशिष्टता को भी इंगित करता है।

इस प्रकार, जैसा कि कई अध्ययनों द्वारा दिखाया गया है, प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों के सकारात्मक परिणाम एंटीबॉडी की उपस्थिति का पूर्ण प्रमाण नहीं हैं, क्योंकि विभिन्न रोग स्थितियों में सकारात्मक प्रतिक्रियाएं भी देखी जा सकती हैं जो शरीर के आइसोसेंसिटाइजेशन या ऑटोसेंसिटाइजेशन से जुड़ी नहीं हैं। इसलिए, रोग की नैदानिक ​​​​तस्वीर के साथ कई इम्यूनोसेरोलॉजिकल तरीकों के परिणामों की तुलना हमें विकासशील रोग प्रक्रिया का पूरी तरह से न्याय करने की अनुमति देती है।

एक नकारात्मक प्रत्यक्ष परीक्षण के साथ एक सकारात्मक अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण आमतौर पर पिछले रक्त आधान या गर्भधारण से जुड़े परीक्षण सीरम में मुक्त एलोएंटीबॉडी की उपस्थिति को इंगित करता है।

Coombs का परीक्षण अक्सर पैरॉक्सिस्मल नोक्टर्नल हेमोग्लोबिनुरिया के विस्तार के दौरान सकारात्मक होता है; एंटी-सी3 और एंटी-सी3डीजी के साथ पॉज़िटिव कॉम्ब्स टेस्ट कोल्ड एग्लूटिनिन बीमारी का एक मार्कर है।

ऐसे मामलों में जहां नवजात शिशु के हेमोलिटिक रोग के विकास का उच्च जोखिम होता है, निदान करने के लिए प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षणों के परिणाम बहुत महत्वपूर्ण होते हैं (अक्सर गर्भावस्था के दौरान) और, यदि आवश्यक हो, उपस्थिति और परिवर्तन की गतिशील निगरानी एंटीबॉडी टिटर में। सबसे अधिक बार, नवजात शिशु की हेमोलिटिक बीमारी डी एंटीजन के लिए मां और भ्रूण के बीच असंगति से जुड़ी होती है, कम बार AB0 प्रणाली के एंटीजन के लिए, और अन्य एंटीजन (सी, सी, के, आदि) के लिए भी कम। परिणामी एंटीबॉडी la, एक नियम के रूप में, Ig G वर्ग के अधूरे एंटीबॉडी, एक अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण में स्पष्ट रूप से पाए जाते हैं। इस बीमारी में, सही ढंग से स्थापित अनुमापांक और पता लगाए गए एंटीबॉडी की विशिष्टता का बहुत महत्व है, क्योंकि गर्भवती महिला के रक्त में एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी के स्तर और हेमोलिटिक रोग की गंभीरता के संभावित पूर्वानुमान के बीच एक निश्चित संबंध है।

सुरक्षित आधान चिकित्सा सुनिश्चित करने के लिए नैदानिक ​​​​अभ्यास में अप्रत्यक्ष Coombs परीक्षण की भी आवश्यकता होती है। इसका कार्यान्वयन दाताओं और प्राप्तकर्ताओं की विभिन्न श्रेणियों के साथ-साथ चिकित्सा संस्थानों के सभी रोगियों की नियमित परीक्षाओं के लिए एक अनिवार्य घटक है, जिन्हें रक्त और इसके घटकों के आधान की आवश्यकता हो सकती है।

निम्नलिखित मामलों में एक अप्रत्यक्ष एंटीग्लोबुलिन परीक्षण का उपयोग किया जाता है:

अन्य तरीकों (पॉलीग्लुसीन, जिलेटिन, आदि) द्वारा आरएच कारक के निर्धारण के फजी परिणामों के साथ आरएच संबद्धता (एंटीजन डी) के अधिक सटीक निर्धारण के लिए;

कमजोर एरिथ्रोसाइट एंटीजन (केल, डफी, किड, लुईस, आदि सिस्टम) और इन एंटीजन के एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए;

एलोइम्यून एंटी-एरिथ्रोसाइट एंटीबॉडी का पता लगाने और पहचान के लिए, एंटीबॉडी सहित जो हेमोलिटिक पोस्ट-ट्रांसफ्यूजन प्रतिक्रियाओं का कारण बनता है;

आधान हेमोलिटिक जटिलताओं में AB0 प्रणाली के प्रतिरक्षा एंटीबॉडी की उपस्थिति का निर्धारण करने के लिए;

ट्रांसफ़्यूज़ किए गए रक्त और उसके घटकों के व्यक्तिगत चयन के लिए अनुकूलता परीक्षण के रूप में।

इस प्रकार, Coombs परीक्षण चिकित्सा के विभिन्न क्षेत्रों (हेमटोलॉजी, प्रसूति, रुमेटोलॉजी, ट्रांसफ्यूसियोलॉजी, नैदानिक ​​और प्रयोगशाला निदान, आदि) में उपयोग किया जाने वाला एक महत्वपूर्ण नैदानिक ​​​​परीक्षण है। कॉम्ब्स परीक्षण की विशेषताओं का ज्ञान परिणामों की विश्वसनीयता बढ़ाने में मदद करेगा और प्रयोगशाला डेटा की सही व्याख्या में योगदान देगा।

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हीमोलिटिक अरक्ततास्व-प्रतिरक्षित निकायों के कारण जो अपने स्वयं के लाल रक्त कोशिकाओं के विरुद्ध निर्देशित होते हैं, ठीक से स्पष्ट नहीं किया गया है। हालांकि, यह माना जाता है कि कुछ कारक (उदाहरण के लिए, एक वायरस, एक असामान्य प्रोटीन) एरिथ्रोसाइट्स को इस तरह से बदलते हैं कि शरीर पहले से ही उन्हें "कुछ विदेशी" मानता है और एंटीबॉडी की मदद से उनके साथ पकड़ में आता है। एक अन्य सिद्धांत के अनुसार, एरिथ्रोसाइट्स के खिलाफ निर्देशित एंटीबॉडी कुछ बीमारियों में असामान्य प्लाज्मा प्रोटीन निकायों के गठन के दौरान संयोग से उत्पन्न होती हैं। इस तरह के प्रोटीन निकाय, "दुर्घटनावश" ​​के रूप में, प्रतिक्रियाएं दे सकते हैं जिनका उपयोग निदान करने के लिए किया जा सकता है (उदाहरण के लिए, वायरल निमोनिया एक सकारात्मक वासरमैन प्रतिक्रिया, एक सकारात्मक पॉल-बनल प्रतिक्रिया और एक ठंडी समूहन प्रतिक्रिया देने के लिए जाना जाता है)।

वहाँ दो हैं प्रमुख प्रकार के स्वप्रतिपिंडहेमोलिटिक एनीमिया के साथ, अर्थात्: गर्म एंटीबॉडी (37 ° पर प्रतिक्रिया) और ठंडे एंटीबॉडी (जिसकी प्रतिक्रियाशीलता तापमान शून्य के करीब पहुंचने पर बढ़ जाती है)। ठंडे एंटीबॉडी की तुलना में गर्म एंटीबॉडी अधिक आम हैं। डेसी ने पाया कि गर्म हेमोलिसिन ठंडे हेमोलिसिन से दोगुने आम हैं। हेमोलिसिन और एग्लूटीनिन मौलिक रूप से भिन्न एंटीबॉडी नहीं हैं: वे केवल उनकी क्रिया की प्रकृति में भिन्न होते हैं। एग्लूटीनिन लाल रक्त कोशिकाओं को समूहित करते हैं, और हेमोलिसिन उन्हें हेमोलिसिस (पूरक!) की जटिल प्रक्रिया के प्रति अधिक संवेदनशील बनाते हैं। स्वप्रतिपिंड, एरिथ्रोसाइट्स पर फिक्सिंग, एक एरिथ्रोसाइट-ग्लोबिन कॉम्प्लेक्स बनाते हैं। एंटीग्लोबिन कॉम्ब्स टेस्ट का उपयोग करके इस कॉम्प्लेक्स का पता लगाया जाता है।

कॉम्ब्स परीक्षणकूम्ब्स सीरम के साथ किया जाता है, जिसकी तैयारी के लिए खरगोश को मानव सीरम के साथ संवेदनशील किया जाता है, जिसके खिलाफ खरगोश के सीरम में एंटीबॉडी बनते हैं। मानव एरिथ्रोसाइट्स पर इस तरह के एक संवेदनशील सीरम की कार्रवाई के तहत, एंटीबॉडी को अवरुद्ध करके एरिथ्रोसाइट रिसेप्टर्स पर कब्जा कर लिया जाता है, तो उनका समूहन होता है। चूंकि ये अवरोधक एंटीबॉडी मानव सीरम से प्राप्त होते हैं, वे मानव प्लाज्मा के प्रति संवेदनशील खरगोश सीरम के साथ जुड़ते हैं और इसमें अवक्षेप होते हैं। इस प्रतिक्रिया को कॉम्ब्स परीक्षण कहा जाता है; ऑटोइम्यून बॉडीज (लो टिट) के आधार पर हेमोलिटिक एनीमिया के लिए यह लगभग विशिष्ट है (विवरण के लिए, मैयर देखें)।

सामान्य तौर पर, हेमोलिटिक एनीमिया के साथएरिथ्रोसाइट्स के प्राथमिक उल्लंघन के साथ, कॉम्ब्स परीक्षण नकारात्मक है, और अधिग्रहित लोगों के साथ, यह सकारात्मक है। हालांकि, इस नियम के कुछ अपवाद हैं: संवैधानिक हेमोलिटिक एनीमिया के संकट के दौरान एक गलत-सकारात्मक Coombs परीक्षण पाया गया था, और कुछ हद तक - कभी-कभी स्प्लेनेक्टोमी के बाद भी, आमवाती पॉलीआर्थराइटिस, सारकॉइडोसिस के साथ, लगातार रक्त आधान के बाद और प्रणालीगत एक प्रकार का वृक्ष के साथ एरिथेमेटोसस। स्वाभाविक रूप से, ऑटोइम्यून निकायों के गठन के बिना अधिग्रहित हेमोलिटिक एनीमिया के साथ, यह नकारात्मक है।

हीमोलिटिक अरक्तताऑटोइम्यून निकायों के कारण उप-विभाजित किया जा सकता है:
ए) तीव्र, सबस्यूट और जीर्ण रूप, साथ ही साथ
बी) अज्ञात एटियलजि के साथ इडियोपैथिक और सी) रोगसूचक [वायरल निमोनिया (केवल ठंडा एग्लूटीनिन), क्रोनिक लिम्फैटिक ल्यूकेमिया, रेटिकुलोसारकोमा, लिम्फोसरकोमा, सिस्टमिक ल्यूपस एरिथेमेटोसस (मुख्य रूप से गर्म, शायद ही कभी ठंडा एग्लूटीनिन), सिफलिस (कोल्ड एग्लूटीनिन), ओवेरियन ट्यूमर (मिशर एस) कर्मचारी))।
सी) रोगसूचक [वायरल निमोनिया (केवल ठंडा एग्लूटीनिन), क्रोनिक लिम्फैटिक ल्यूकेमिया, रेटिकुलोसारकोमा, लिम्फोसरकोमा, सिस्टमिक ल्यूपस एरिथेमेटोसस (मुख्य रूप से गर्म, कम अक्सर ठंडा एग्लूटीनिन), सिफलिस (कोल्ड एग्लूटीनिन), ओवेरियन ट्यूमर (मिशर एट अल।))।

हेमोलिटिक एनीमिया का क्लिनिक, ऑटोइम्यून निकायों के प्रभाव में विकसित होना, बहुत विविध है, और इसलिए उनकी सामान्य नैदानिक ​​​​तस्वीर खींचना संभव नहीं है। सभी उम्र और दोनों लिंगों के व्यक्ति समान रूप से प्रभावित होते हैं। फिर भी इडियोपैथिक रूप महिलाओं में अधिक सामान्य प्रतीत होते हैं (सैक और वर्कमैन)।

इडियोपैथिक रूप की नैदानिक ​​​​तस्वीररोग की गंभीरता के आधार पर भिन्न होता है। पुराने मामलों में, शुरुआत धीरे-धीरे होती है, रोग कई वर्षों तक लगातार तेज होने के साथ रहता है। हेमोलिसिस की डिग्री के आधार पर एनीमिया की गंभीरता भिन्न होती है। 10% तक हीमोग्लोबिन की बूंदों को देखा जाता है, अन्य मामलों में हीमोग्लोबिन को 50-60% तक लंबे समय तक बनाए रखा जाता है। त्वचा और सीरम के रेटिकुलोसाइटोसिस और प्रतिष्ठित रंगाई की तीव्रता हेमोलिसिस की डिग्री से मेल खाती है। बिलीरुबिन मूत्र में बहुत कम पाया जाता है, क्योंकि यह गुर्दे से नहीं गुजरता है, लेकिन हीमोग्लोबिनुरिया मनाया जाता है। पुराने मामलों में तिल्ली अक्सर बढ़ जाती है और यहां तक ​​कि बहुत महत्वपूर्ण आकार तक पहुंच सकती है, जबकि अन्य मामलों में यह अभी भी स्पष्ट है। यकृत शायद ही कभी बढ़ा हो।

ज्यादातर मामलों में खून मेंमैक्रोसाइटोसिस मनाया जाता है, तीव्र चरणों में भी कई माइक्रोसाइट्स होते हैं, नॉरमोबलास्टोसिस और पॉलीक्रोमेशिया शायद ही कभी अनुपस्थित होते हैं, ल्यूकोसाइटोसिस 30,000 तक पहुंच सकता है, प्लेटलेट्स सामान्य हैं। हालांकि, कुछ मामलों में, चिह्नित थ्रोम्बोसाइटोपेनिया है। इवांस इन मामलों को प्लेटलेट्स के खिलाफ एंटीबॉडी की एक साथ उपस्थिति से समझाते हैं, ताकि ऑटोइम्यून बॉडीज - इवांस सिंड्रोम (इवांस) की कार्रवाई के कारण हेमोलिटिक एनीमिया और थ्रोम्बोसाइटोपेनिया दोनों हों। आसमाटिक प्रतिरोध थोड़ा कम हो जाता है, लेकिन उसी सीमा तक नहीं और स्थायी रूप से संवैधानिक गोलाकार सेल एनीमिया के रूप में नहीं। गर्मी प्रतिरोध परीक्षण (हेग्लिन-मायर) 6 घंटे के बाद भी मामूली हेमोलिसिस (स्वयं अवलोकन) दे सकता है, लेकिन मार्चियाफवा के एनीमिया की तुलना में कुछ हद तक। हेमोसाइडरिन मूत्र (स्वयं अवलोकन) में भी पाया जाता है।