MU 2.1.4.1057-01. 2.1.4. Drikkevand og vandforsyning af befolkede områder. Organisering af intern kvalitetskontrol af sanitære og mikrobiologiske undersøgelser af vand. Retningslinier
1 anvendelsesområde
2. Lovmæssige referencer
3. Begreber og definitioner
4. Generelle bestemmelser for tilrettelæggelse af intern kvalitetskontrol af den sanitære og mikrobiologiske undersøgelse af vand
5. Temperaturkontrol af inkubation og opbevaring
5.1. Fremgangsmåde for temperaturstyring i termostater
5.2. Temperaturkontrolprocedure i køleskabe
6. Kvalitetskontrol af sterilisering og desinfektion
6.1. Kontrolprocedure for damp- og tørluftsteriliseringstilstande
6.1.1. Kemisk test kontrol
6.1.2. Termisk kontrol
6.1.3. biologisk kontrol
6.2. Luftmikrobiel kontrolprocedure
6.3. Procedure for testning af mikrobiel kontaminering af overflader
6.4. Evaluering af effektiviteten af ​​ultraviolet bakteriedræbende stråling
6.5. Procedure for kontrol af steriliteten af ​​filterenheder
6.6. Prøveflaskekontaminationsprocedure
7. Kvalitetskontrol af destilleret vand
8. Krav til fremstilling af laboratorieglas
9. Regler for fremstilling af serielle fortyndinger
10. Procedure for vedligeholdelse af referencebakteriekulturer
10.1. Generelle bestemmelser
10.2. Vedligeholdelse af referencebakteriekulturer uden at skabe et lager af langtidsreferencekulturer
10.2.1. Genvinding af frysetørret referencekultur
10.2.2. Opbygning af en arbejdskultur
10.2.3. Genopfyldning af lagre af arbejdskultur
10.2.4. Klargøring af kulturen til den tilsigtede anvendelse i assayet
10.3. Optimal styring af referencekulturer
10.3.1. Genvinding og kontrol af frysetørret kultur
10.3.2. Etablering af referenceafgrødelagre
10.3.3. Opbygning af en arbejdskultur
10.3.4. Forberedelse af kulturen til den påtænkte anvendelse
10.4. Kontrol af referencebakteriekulturer
10.4.1. Vurdering af graden af ​​dissociation af E. coli kulturen. M17-02
10.4.2. Kontrol af artsegenskaber af E.coli M17-02 og E.coli K12 + F Str-r
+ 10.4.3. Test af E. coli K12 F Str-rs følsomhed over for fag
+ 10.4.4. Kontrol af kulturen af ​​E. coli K12 F Str-r for fagkontamination
10.4.5. Artskontrol af Pseudomonas aeruginosa og Pseudomonas fluorescens
10.5. Dyrkning, opbevaring og kontrol af referencekulturer af bakteriofager
10.5.1. Genvinding af frysetørret kultur
10.5.2. Etablere lagre af referencefagkulturer og kulturer til påtænkt brug
10.5.3. Fagtiterbestemmelse
11. Mediekontrol
11.1. Kontrol af dokumentation og visuel inspektion af kulturmedier
11.2. Kontrol af forhold og perioder med opbevaring af dyrkningsmedier
11.3. Kontrol af dyrkningsmedier under tilberedning
11.3.1. Evaluering af det færdige miljøs udseende
11.3.2. pH-måling
11.3.3. Definition af sterilitet
11.4. Kontrol af biologiske egenskaber af dyrkningsmedier
11.4.1. Kvalitetskontrol
11.4.2. kvantitativ kontrol
11.4.2.1. Forberedende fase
11.4.2.2. Såningsmetoder
11.4.2.3. Definition af indikatorer for "følsomhed" og "vækstrate"
11.4.2.4. Estimering af differentierende egenskaber af Endo-mediet og dets analoger
11.4.2.5. Bestemmelse af procentdelen af ​​genvindelighed (% spiring)
11.4.2.6. Evaluering af hæmningsindekset
11.4.3. Anbefalinger til komparativ evaluering af effektiviteten af ​​dyrkningsmedier ved hjælp af filtermaterialer
11.4.3.1. Forberedende fase
11.4.3.2. Såning ved membranfiltrering
11.4.3.3. Metodik for sammenlignende undersøgelser
11.5. Kontrol på tidspunktet for brug af dyrkningsmedier
11.5.1. Temperaturkontrol af vandbade designet til at holde tætte næringsmedier i smeltet tilstand
11.5.2. Kontrol af opholdstiden for næringsmediet i smeltet tilstand
11.5.3. Opsætning af positive og negative kontroller
11.6. Vækstkarakteristika for en række indenlandsk producerede medier, der anvendes til sanitær og bakteriologisk vandanalyse
12. Overvågning af filtermediets effektivitet
12.1. Generelle bestemmelser
12.2. Forberedende fase
12.3. Forskningsmetodik
12.3.1. Såning ved membranfiltrering
12.3.2. Såning ved direkte overflademetode
12.3.3. Beregning af "Procent Recoverability" og evaluering af resultater
12.3.4. Anbefalinger til komparativ evaluering af effektiviteten af ​​forskellige filtermedier
13. Funktioner ved indstilling af test på identifikationsstadiet
13.1. Definition af gram-tilknytning
13.2. Opsætning af en oxidasetest
13.3. Definition af kulhydratgæring
Bibliografi
Bilag 1. Strukturen af ​​intern kvalitetskontrol ved kontrolobjekter
Bilag 2. Strukturen for tilrettelæggelsen af ​​intern kvalitetskontrol i laboratoriet
Bilag 3. Temperaturkontrolark
Bilag 4
Bilag 5. Prøveskema til registrering af resultaterne af luftforureningskontrol
Bilag 6
Bilag 7.2. Ordning for udførelse af kulturer af testmikroorganismer (bedste mulighed)
Bilag 8.1.
Bilag 8.2. Protokol til kvantitativ kontrol af dyrkningsmedier
Bilag 9. Protokol for kontrol med filtermaterialer
Bilag 10. Estimering af betydningen af ​​forskellen mellem middelværdierne ved hjælp af Student-Fisher testen
Bilag 11. Liste over avanceret udstyr til sanitær og mikrobiologisk vandanalyse, som forbedrer kvaliteten af ​​analyseresultaterne
Bilag 12 Test for inhibitorrester på laboratorieglas (bilag til ISO 9998:1991 (E))

den russiske Føderation MU (retningslinjer)

MU 2.1.4.2899-11 Organisering af intern kvalitetskontrol af sanitære og mikrobiologiske undersøgelser af vand. Ændring 1 til MU 2.1.4.1057-01

GODKENDE

Leder af Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare, Chief State Sanitary Doctor of the Russian Federation G.G. Onishchenko 12. juli 2011

Foretag følgende ændringer til MU 2.1.4.1057-01:

• erstatte navnet på tabellen "Protokol for kontrol af membranfiltre" med "Protokol for kontrol af filtermaterialer", samt teksten i dens fodnote til "*Udfyldes ved sammenligning af filtermaterialer af forskellige serier af en fabrikant eller filtre fra forskellige producenter";
• fanen. 7 at anføre i ordlyden:

"7. Bestemmelse af % tilbageholdelse af FM

23. Første afsnit "Evaluering af betydningen af ​​forskellen i gennemsnitsværdierne ved hjælp af Student-Fisher-testen" ændres: "Betydningen af ​​forskellen i gennemsnitsværdierne af antallet af kolonier dyrket på kontrol- og testmedium/filtermateriale vurderes ved hjælp af Elevens t-test med en sandsynlighed på 95 %".

24. I tabellen "Liste over avanceret udstyr til udførelse af sanitær og mikrobiologisk vandanalyse, som forbedrer kvaliteten af ​​analyseresultater", skal teksten i linje 3 i anden kolonne "Udstyrsnavn" begynde med ordene "Moderne niveau" filtreringsmaterialer, karakteriseret ved:" og videre i teksten.

Retningslinjer MU 2.1.4.2899-11
"Organisation af intern kvalitetskontrol af sanitære og mikrobiologiske undersøgelser af vand"
Ændring 1 til MU 2.1.4.1057-01
(godkendt af Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare den 12. juli 2011)

Foretag følgende ændringer til MU 2.1.4.1057-01:

1. I afsnit 4 "Almindelige bestemmelser om tilrettelæggelse af intern kvalitetskontrol af sanitære og mikrobiologiske undersøgelser af vand":

Punkt 4 i afsnittet "De vigtigste retningslinjer for tilrettelæggelsen af ​​intern kvalitetskontrol:" ændres som følger:

"4. Kvalitetskontrol af filtermaterialer (eller yderligere - filtre).".

I afsnittet, der begynder med ordene "Beskrivelse af procedurer til overvågning af overholdelsen af ​​kravene til analysebetingelserne..." bør udtrykket "og membranfiltre" erstattes af "og filtermaterialer".

2. I afsnit 6.5 "Procedure for overvågning af filterinstallationers sterilitet":

Tredje afsnit i underafsnittet "Forberedende fase" ændres som følger:

"-sterilt filtermateriale til mikrobiologiske formål (membranfiltre, analytiske spormembraner og andre filtermaterialer med en porediameter på højst 0,45 µm og en skivestørrelse på 35 eller 47 mm) af en tidligere testet batch (afsnit 12)." ;

I første afsnit i underafsnittet "Bekæmpelsesmetode" efter ordene "Brug en steril pincet, anbring ..." skal udtrykket "membranfilter" erstattes af "filtermateriale";

Stk. 3 i underafsnittet "Kontrolmetoden skal anføres i ordlyden:

"Støvsugeren tændes og indholdet i tragten filtreres. Vakuumet slukkes, filtertragten fjernes og filtermaterialet overføres fra bunden til mellemskålen med en steril pincet. Der må ikke være luftbobler mellem kl. filtermaterialet og overfladen af ​​agaren. Pladerne med podningerne vendes og inkuberes i en termostat ved (37 +/- 1)°C i (24 +/- 2) timer.".

3. I afsnit 6.6 "Procedure til kontrol af kontaminering af prøvehætteglas":

Femte afsnit i underafsnittet "Forberedende fase" ændres som følger:

"- sterilt filtermateriale til mikrobiologiske formål (membranfiltre, analytiske spormembraner og andre filtermaterialer med en porediameter på højst 0,45 µm og en skivestørrelse på 35 eller 47 mm) af en tidligere testet batch (afsnit 12)." ;

I syvende afsnit i underafsnittet "Bekæmpelsesmetode" efter ordene "100 ml sterilt postevand (negativ kontrol), derefter gennem en anden ...", skal udtrykket "membranfilter" erstattes med "filtermateriale".

4. Fjerde afsnit i afsnit 9 "Regler for fremstilling af serielle fortyndinger" ændres som følger:

"- til opstilling af undersøgelser, der kræver en kvantitativ redegørelse for de anvendte modelmikroorganismer, fx i den kvantitative vurdering af kvaliteten af ​​næringsmedier, filtermaterialer mv."

5. Punkt 1 i det ellevte afsnit i paragraf 10.1 "Generelle bestemmelser" skal ændres som følger:

"1. E. coli M17-02 som en positiv kontrol for biokemiske test og en negativ kontrol for et oxidasereagens; til kontrol af filtermaterialer; til kvalitetskontrol af dyrkningsmedier ved hjælp af biologiske indikatorer."

6. Titlen på paragraf 11.4.3 skal ændres som følger:

"11.4.3. Anbefalinger til sammenlignende evaluering af effektiviteten af ​​næringsmedier, der anvender filtermaterialer."

Første afsnit bør ændres som følger:

"Hovedkoncentreringsmetoden i sanitære og bakteriologiske undersøgelser af vand er filtrering gennem et filtermateriale. Indførelsen af ​​en yderligere faktor, et filtermateriale, i systemet "mikroorganisme-næringsstof" kan påvirke væksthastigheden af ​​mikroorganismer og den biologiske mediets egenskaber.";

I andet afsnit, efter ordene "at give deres sammensætning optimale betingelser for vækst af mikroorganismer ved brug af ...", bør udtrykket "membranfiltre" erstattes af "filtermaterialer";

I fjerde afsnit skal udtrykket "membranfiltre" efter ordene "vurdering af mediets kvalitet i kombination med dem, der er anvendt i analysen..." erstattes af "filtermaterialer".

8. I afsnit 11.4.3.1 "Forberedende fase" ændres underafsnittene "Membranfiltre" og "Næringsmedier" som følger:

"Filter materialer

Procentdelen af ​​ekstraherbarhed af de brugte filtermaterialer bør være mindst 80 % på et komplet ikke-selektivt medium. Filtermediet skal være sterilt.

Næringsmedier

Næringsmedier til såning af filtermaterialer tørres ikke, men der må ikke være synlig fugt på overfladen af ​​medierne, der hældes i skåle.

9. I afsnit 11.4.3.2 "Inokulation ved membranfiltrering":

I andet afsnit, efter ordene "Anbring med steril pincet..." skal udtrykket "membranfilter" erstattes af "filtermateriale";

"Støvsugeren slukkes, filtertragten fjernes, og filtermaterialet overføres fra bunden til næringsmediet med en steril pincet. Der må ikke være luftbobler mellem filtermaterialet og agaroverfladen. inden for 18 - 24 timer. ".

10. I afsnit 11.4.3.3 "Metode for sammenlignende undersøgelser":

I andet og tredje afsnit foretages følgende ændringer:

"På andet trin vurderes de udvalgte medier med hensyn til "genvindbarhedens procentdel" ved hjælp af to såmetoder: direkte (ifølge punkt 11.4.2.5) og metoden med filtermaterialer. For hvert undersøgt medium og såningsmulighed, kl. der skal udføres mindst 5 gentagelser Kontroller er direkte podning (kontrol N 1) og podning ved metoden med filtermaterialer (kontrol N 2) på et ikke-selektivt medium.

Om nødvendigt kan der udføres parallelle yderligere undersøgelser med naturligt vandpodestof. Naturlige vandpodestoffer med eller uden testmikroorganismer inokuleres ved hjælp af metoden med filtermaterialer på de undersøgte selektive medier."

Andet afsnit i underafsnittet "Regnskab for resultater" ændres som følger:

"I henhold til § 12 bekræftes kvaliteten af ​​de filtermaterialer, der er brugt i forsøget ved at beregne "genvindingsprocenten" for filtermaterialerne ud fra de gennemsnitlige resultater af kontrolpodninger (direkte nr. 1 og membran nr. 2) på ikke- selektiv agar."

11. Overskriften til § 12 skal have følgende ordlyd:

"12. Overvågning af filtermediets effektivitet".

12. Afsnit 12.1 "Generelle bestemmelser" skal ændres som følger:

"I praksis af laboratorier, der udfører sanitær og bakteriologisk kontrol af vand, anvendes filtermaterialer med en diameter på 47 eller 35 mm og en gennemsnitlig porestørrelse på 0,45 mikron.

Der anvendes filtermaterialer:

I analysen for almindelige og termotolerante coliforme mikroorganismer;

I analysen for sporer af sulfit-reducerende Clostridia.

Kvaliteten af ​​de anvendte filtermedier kan have en væsentlig indflydelse på analysens resultater. Samtidig kan kvaliteten af ​​filtermaterialer fra en producent variere fra batch til batch. Ved modtagelse af hvert nyt parti filtre, samt når det er nødvendigt at træffe en beslutning om muligheden for at forlænge holdbarheden, overvåges filtermaterialernes effektivitet.

Hvis der er flere serier af filtre i den indgående batch, udføres kontrol for hver serie.

Filtermaterialer godkendt til analyse anvendes én gang. Genbrug af filtermaterialer er forbudt.

Metodeprincip

Effektiviteten af ​​filtermaterialer bestemmes ved at sammenligne antallet af kolonier af mikroorganismer dyrket på et komplet næringsmedium som et resultat af direkte overfladepodning af en kontrog antallet af kolonier dyrket på samme medium som et resultat af podning vha. membranfiltrering.

Evaluering af effektiviteten af ​​filtreringsmaterialer udføres i henhold til indikatoren "genvindingsprocent". Filtermaterialer anses for at være egnede, hvis mindst 80 % af antallet af kolonier opnået ved direkte podning vokser, når de inokuleres ved membranfiltrering.

Udvælgelsen af ​​filtre til kontrolundersøgelsen bør udføres i en "blind" metode, dvs. filtre til kontrol skal vælges tilfældigt fra forskellige pakker af den analyserede batch."

13. I afsnit 12.2 "Forberedende fase" skal underafsnit "Membranfiltre" ændres som følger:

"Filtermateriale

Filtermaterialet, der skal testes, skal være sterilt."

14. Første afsnit i paragraf 12.3 "Forskningsmetodologi" ændres som følger:

"Parallelle podninger af en suspension af en ren kultur af testmikroorganismen udføres ved metoden med membranfiltrering gennem det undersøgte filtermateriale og ved den direkte (overflade) metode."

15. I afsnit 12.3.1 "Inokulation ved membranfiltrering":

I andet afsnit, efter ordene "Med hjælp af en steril pincet, anbring ...", skal udtrykket "membranfilter" erstattes af "filtermateriale";

I tredje afsnit, efter ordene "Støvsugeren slukkes, filtertragten fjernes og med steril pincet ..." står teksten således: "... filtermaterialet overføres til en tallerken med et næringsmedium (klausul 11.2). Der må ikke være luftbobler mellem filtermaterialet og overfladen af ​​agaren. Afgrøder inkuberes i en termostat ved (37 +/- 1)°C i 18 - 24 timer.".

16. Punkt 12.3.3 "Beregning af "genvindingsprocenten" og evaluering af resultaterne" ændres som følger:

"For at evaluere det undersøgte filtermateriale beregnes procentdelen af ​​ekstraherbarhed (retention) af filtermaterialer ved hjælp af formlen:

I% - procentdel af genindvindingsevne (retention);

SChmf - aritmetisk gennemsnit af antallet af kolonier, der dyrkes på filtrene, når de sås ved membranfiltreringsmetoden;

SCH - aritmetisk gennemsnit af antallet af kolonier dyrket på kopper med direkte overfladesåning.

Egnede filtermaterialer anses for at have en procentdel af ekstraktion (retention) *.

I tilfælde af opnåelse af mindre end 80 % af genfindbarheden af ​​testmikroorganismen, bør undersøgelserne gentages med et dobbelt antal gentagelser (mindst 10), med et samlet antal for direkte kontrolpodning på mindst 400 CFU.

17. Titlen på paragraf 12.3.4 skal ændres som følger:

"12.3.4. Anbefalinger til sammenlignende evaluering af effektiviteten af ​​forskellige filtermedier."

I første afsnit bør udtrykket "membranfiltre" efter ordene "leveret af én producent samt ..." erstattes af "filtermaterialer";

Fjerde afsnit ændres som følger:

"- såning efter metoden med filtermaterialer med hver type (serie) af filtre i henhold til afsnit 12.3.1;";

I det syvende afsnit, efter ordene "udført ved at vurdere pålideligheden af ​​forskellen i gennemsnitsværdierne af antallet af kolonier dyrket på ..." skal udtrykket "membranfiltre" erstattes af "filtermaterialer";

Andet afsnit i underafsnittet "Evaluering af resultater" ændres som følger:

"Når du sammenligner filtermaterialer af forskellige mærker, typer eller forskellige producenter, skal du vælge filtermaterialer, hvis gennemsnitlige antal kolonier overstiger det for andre filtre med 95 % sikkerhed."

19. I andet afsnit i paragraf 13.2 "Udførelse af en oxidasetest" efter ordene "Det skal huskes, at når der udføres en oxidasetest ved at anvende ...", skal udtrykket "membranfilter" erstattes med " filtermateriale".

20. I skemaet "Struktur af intern kvalitetskontrol ved kontrolobjekter", præsenteret i bilag 1, skal teksten i cellen "Membranfiltre. Effektivitetskontrol" være angivet i formuleringen: "Filtreringsmateriale. Effektivitetskontrol".

21. I tabellen "Strukturen af ​​tilrettelæggelsen af ​​intern kvalitetskontrol i laboratoriet" i bilag 2 skal teksten i anden kolonne "Kontrolomfang" i linje 2.5 være angivet i formuleringen: "Kontrol af filtermaterialer" .

22. I bilag 9:

Skift navnet på tabellen "Protokol til styring af membranfiltre" til

"Protokol til kontrol med filtermaterialer",

og også teksten i fodnoten til den bør erstattes af

"* Udfyldes ved sammenligning af filtermaterialer af forskellige serier af samme producent eller filtre fra forskellige producenter.";

Tabel 7 til angivelse i udgave;

"7. Bestemmelse af % tilbageholdelse af FM

______________________________

* Skal udfyldes ved sammenligning af filtermaterialer af forskellige serier af samme producent eller filtre fra forskellige producenter."

23. Første afsnit i bilag 10 "Vurdering af pålideligheden af ​​forskellen i middelværdier ved hjælp af Student-Fisher-testen" ændres som følger:

"Betydningen af ​​forskellen i gennemsnitsværdierne af antallet af kolonier dyrket på kontrol- og testmediet/filtermaterialet vurderes ved hjælp af Students t-test for en sandsynlighed på 95 %".

24. I tabellen "Liste over avanceret udstyr til udførelse af sanitær-mikrobiologisk vandanalyse, som forbedrer kvaliteten af ​​analyseresultater" i bilag 11, skal teksten i anden kolonne "Udstyrsnavn" i linje 3 begynde med ordene " Filtermaterialer på moderne niveau, karakteriseret ved:" og videre i teksten.

Retningslinjer MU 2.1.4.2899-11 "Organisation af intern kvalitetskontrol af sanitære og mikrobiologiske undersøgelser af vand" Ændring 1 til MU 2.1.4.1057-01 (godkendt af Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare den 12. juli 2011 )

Dato for introduktion: fra tidspunktet for godkendelse

Dokumentoversigt

Retningslinjer for tilrettelæggelse af intern kvalitetskontrol af sanitære og mikrobiologiske undersøgelser af vand er blevet rettet. De er beregnet til laboratorier, der er akkrediteret til at udføre det specificerede arbejde. Retningslinjerne bruges til at sikre sanitær-epidemiologisk og industriel kontrol af vandkvaliteten: drikkevand, husholdningsvandforsyning, rekreative vandområder, sport mv.

Ændringerne vedrører kvalitetskontrol af sterilisering og desinfektion, reglerne for fremstilling af seriefortyndinger og proceduren for vedligeholdelse af referencebakteriekulturer. Også proceduren for overvågning af næringsmedier og effektiviteten af ​​filtermaterialer samt funktionerne ved indstillingstests på identifikationsstadiet blev specificeret.

Ændringer træder i kraft ved godkendelse.