मादक पदार्थों, मनोदैहिक पदार्थों, अन्य पदार्थों की न्यूनतम सांद्रता जो किसी जैविक वस्तु में नशा पैदा करते हैं। एंटीबायोटिक न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता (एमआईसी) न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता

एक दवा पदार्थ की घटती सांद्रता वाले मीडिया पर बैक्टीरिया के गुणा और बढ़ने की क्षमता का विश्लेषण एक एंटीबायोटिक (MIC) की न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता को निर्धारित करना संभव बनाता है, जो इन विट्रो में बैक्टीरिया की भूमिका को रोकता है (तालिका 3(vet7) ))। इस खुराक का मूल्य विवो में समान सांद्रता प्राप्त करने में सक्षम दवा पदार्थ की पसंद को निर्धारित करता है, और अन्य दवाओं के संबंध में जीव की सापेक्ष संवेदनशीलता की तुलना करने का आधार है। यह माना जाता है कि जोखिम की प्रभावशीलता सुनिश्चित करने के लिए, संक्रमण के केंद्र में दवा की एकाग्रता एंटीबायोटिक की न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता के मूल्य के बराबर होनी चाहिए। दूसरी ओर, पर्याप्त ऊतक सांद्रता सुनिश्चित करने के लिए प्लाज्मा दवा की सांद्रता आमतौर पर अधिक होनी चाहिए। हालांकि, एंटीबायोटिक की न्यूनतम खुराक प्राप्त करने के लिए एंटीमाइक्रोबायल्स की खुराक में अनुचित वृद्धि जो इन विट्रो में एक निश्चित प्रकार के बैक्टीरिया के विकास को रोकती है, प्राप्तकर्ता के शरीर में विषाक्त खुराक में दवा के संचय का कारण बन सकती है।

किसी विशेष दवा पदार्थ के लिए "महत्वपूर्ण एमआईसी" उच्चतम उचित रूप से सुरक्षित दवा एकाग्रता है जिसे चिकित्सकीय रूप से स्वीकार्य खुराक और दवा के प्रशासन के मार्ग (तालिका 3 (वीटी 7)) के साथ प्राप्त किया जा सकता है। एमआईसी विशिष्ट प्रकार की जीवाणु संस्कृति और विशिष्ट प्रकार की दवा पर निर्भर करता है। साथ ही, महत्वपूर्ण एमआईसी एक विशेष प्राप्तकर्ता और एक विशेष दवा पदार्थ के लिए विशिष्ट है। इस प्रकार, किसी भी जीव के लिए महत्वपूर्ण एमआईसी समान होगा (तालिका 3(vet7))। किसी विशेष जीव के लिए महत्वपूर्ण एकाग्रता जानवरों की प्रजातियों (दवा की संवेदनशीलता या वितरण पैटर्न में अंतर के कारण) और विशेष प्रयोगशाला के आधार पर भिन्न हो सकती है। उनके अध्ययन में उपयोग किए जाने वाले महत्वपूर्ण मूल्यों के लिए संस्कृति विधियों और एंटीबायोटिक संवेदनशीलता डेटा प्रदान करने वाली प्रयोगशाला से संपर्क किया जाना चाहिए।

इन विट्रो कमजोर पड़ने वाले डेटा के आधार पर, एक जीवाणु को एक विशेष दवा पदार्थ के लिए अतिसंवेदनशील (एस) के रूप में वर्गीकृत किया जाता है यदि एमआईसी इस सूचक के महत्वपूर्ण मूल्य से काफी नीचे है। एक औसत (एमएस) या मध्यवर्ती (आईएस) संवेदनशीलता मूल्य के साथ रोगजनक सूक्ष्मजीवों की वृद्धि महत्वपूर्ण एमआईसी मूल्य के निकट दवा सांद्रता पर बाधित होती है। ऐसे बैक्टीरिया रोगी के शरीर की नकारात्मक प्रतिक्रिया पैदा कर सकते हैं या उस पर कोई प्रभाव नहीं डाल सकते हैं। प्रतिरोधी (आर) बैक्टीरिया के लिए एमआईसी न्यूनतम खुराक के महत्वपूर्ण मूल्य से अधिक है। ऐसी दवा के रोगी के शरीर में एकाग्रता का प्रभावी मूल्य जो किसी विशेष सूक्ष्मजीव को प्रभावित करता है, प्राप्त होने की संभावना नहीं है। ऐसे मामलों में, विषाक्त खुराक पर दवा के संचय का जोखिम भी चिकित्सा के संभावित लाभ से अधिक हो सकता है। नई पीढ़ी के एंटीबायोटिक दवाओं की न्यूनतम खुराक का महत्वपूर्ण मूल्य जो बैक्टीरिया के विकास को रोकता है, कुछ मामलों में खुराक श्रेणियों के पेशेवर लचीले लेबलिंग के संक्रमण के कारण निर्धारित करना अधिक कठिन होता है।

नशीली दवाओं के पदार्थों को चुना जाना चाहिए ताकि जब एक ऐसे आहार के अनुसार उपयोग किया जाए जो विषाक्त खुराक में पदार्थ के संचय को रोकता है, तो दवा पदार्थ की अधिकतम प्लाज्मा एकाग्रता प्राप्त करना संभव है जो एमआईसी से काफी अधिक है। महत्वपूर्ण न्यूनतम खुराक से काफी कम सांद्रता में कई बैक्टीरिया किसी विशेष दवा के प्रभाव के लिए अतिसंवेदनशील होंगे। विभिन्न रोगाणुरोधी दवाओं की सापेक्ष प्रभावकारिता की तुलना करने के लिए महत्वपूर्ण मूल्य और आंतरिक एमआईसी मूल्य के बीच अंतर का उपयोग किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, एमिकासिन के लिए, महत्वपूर्ण मान 32 माइक्रोग्राम/एमएल है, इसलिए 2 माइक्रोग्राम/एमएल के एमआईसी मान के साथ ई. कोलाई 16 माइक्रोग्राम/एमएल के एमआईसी मान के साथ ई. कोलाई की तुलना में एमिकासिन के प्रति अपेक्षाकृत अधिक संवेदनशील है। दोनों प्रजातियों को अतिसंवेदनशील माना जाना चाहिए (हालांकि दूसरी प्रजाति को औसत संवेदनशीलता माना जा सकता है), हालांकि, पहली प्रजाति के जीवाणुओं की वृद्धि अधिक हद तक बाधित होती है। यदि एमोक्सिसिलिन के लिए 2 माइक्रोग्राम/एमएल के एमआईसी मूल्य वाले ई. कोलाई की समान प्रजाति का एमआईसी मान 16 माइक्रोग्राम/एमएल (32 माइक्रोग्राम/एमएल के महत्वपूर्ण मान के साथ) है, तो ऐसा प्रतीत होता है कि इस सूक्ष्मजीव की वृद्धि होगी एमोक्सिसिलिन के बजाय एमिकासिन लगाने से अधिक आसानी से बाधित हो सकता है क्योंकि एमिकैसीन का एमआईसी मूल्य एमोक्सिसिलिन के एमआईसी मूल्य की तुलना में इसके महत्वपूर्ण एमआईसी मूल्य से अधिक दूर है।

हालांकि एक विशिष्ट जीवाणु प्रजाति और एक विशिष्ट दवा (16 या 32) के लिए एमआईसी मूल्यों के बीच अंतर काफी बड़ा लग सकता है (विशेषकर प्लाज्मा ड्रग कट-ऑफ के संदर्भ में), यह अंतर ट्यूब में केवल एक समाधान से मेल खाता है . यह संवेदनशीलता डेटा को अधिक आंकने के खतरे का एक उदाहरण है। यदि एक निश्चित जीव का एमआईसी मूल्य महत्वपूर्ण मूल्य के काफी करीब है, तो व्याख्या में संभावित अंतर के कारण, इस सूक्ष्मजीव को एक प्रयोगशाला में "एस" या "एमएस" संवेदनशीलता डिग्री और दूसरे में "आर" सौंपा जा सकता है। मूल्यांकन में इस तरह की संभावित विसंगतियां एक कारण है कि दवाओं का उपयोग जिसके लिए एक निश्चित जीव में "एमएस" संवेदनशीलता है (या यदि एमआईसी मूल्य महत्वपूर्ण के करीब है) से बचा जाना चाहिए, जब तक कि साइट पर दवा की एकाग्रता न हो। संक्रमण इन विट्रो विश्लेषण द्वारा निर्धारित एमआईसी मूल्य से कहीं अधिक हो सकता है। एक अच्छा उदाहरण मूत्र पथ के संक्रमण के इलाज के लिए गुर्दे द्वारा उत्सर्जित दवाओं का उपयोग या पित्त पथ के संक्रमण के इलाज के लिए पित्त में उत्सर्जित दवाओं का उपयोग होगा। ल्यूकोसाइट्स (फ्लोरोक्विनोलोन, मैक्रोलाइड्स) द्वारा कुछ दवाओं के संचय के परिणामस्वरूप कम प्लाज्मा सांद्रता के बावजूद एमआईसी (या महत्वपूर्ण एमआईसी) से ऊपर के ऊतकों में दवा सांद्रता हो सकती है।

बैक्टीरिया का एमआईसी उसी जीवाणु प्रजाति के साथ बाद के संक्रमण के दौरान बदल सकता है, और संक्रमण प्रक्रिया के दौरान भी बदल सकता है। एमआईसी मूल्य में वृद्धि केवल विश्लेषण के परिणामों के मूल्यांकन के लिए एक अलग दृष्टिकोण को दर्शा सकती है (विशेषकर यदि अंतर केवल इन विट्रो में पतला होने पर पता लगाया जाता है), लेकिन इसे किसी विशेष दवा पदार्थ के प्रतिरोध के विकास का परिणाम भी माना जा सकता है। ऐसे मामलों में, एक अतिरिक्त दवा का उपयोग करके या एक नई, अधिक प्रभावी दवा पर स्विच करके रोगाणुरोधी चिकित्सा के पाठ्यक्रम को बदला जा सकता है। पॉलीमिक्रोबियल संक्रमणों में, प्रत्येक संक्रमित जीवाणु के लिए एक विशेष दवा का एमआईसी मूल्य भिन्न होने की संभावना है। यह माना जाता है कि किसी विशेष दवा पदार्थ के लिए कम एमआईसी मूल्य वाले बैक्टीरिया के विकास को रोकना आसान है, उसी दवा पदार्थ के लिए उच्च एमआईसी मूल्य वाले सूक्ष्मजीव के विकास की तुलना में।

रूसी संघ के स्वास्थ्य मंत्रालय (मसौदे) के आदेश द्वारा अनुमोदित नशा (मादक, मादक या अन्य विषाक्त) के लिए एक चिकित्सा परीक्षा आयोजित करने की प्रक्रिया के परिशिष्ट की तालिका 2, "सामग्री के लिए सीमा मूल्यों का स्तर" मादक दवाओं, मनोदैहिक पदार्थों, अन्य रसायनों और उनके मेटाबोलाइट्स, विधियों द्वारा निर्धारित पुष्टिकरण विश्लेषण।

टिप्पणी: दहलीज स्तर- यह एक जैविक वस्तु में किसी पदार्थ (इसका मेटाबोलाइट) की न्यूनतम सांद्रता है, जो प्रारंभिक या पुष्टिकरण विश्लेषण के तरीकों द्वारा निर्धारित की जाती है, जिसका पता लगाने पर अध्ययन के परिणाम को सकारात्मक माना जाता है।

वास्तव में, एक समान तालिका जिसे " urinalysis में पुष्टिकारक assays के लिए थ्रेसहोल्ड स्तर"सेंट्रल केमिकल-टॉक्सिकोलॉजिकल लेबोरेटरी में स्टेट एजुकेशनल इंस्टीट्यूशन ऑफ हायर प्रोफेशनल एजुकेशन फर्स्ट मॉस्को स्टेट मेडिकल यूनिवर्सिटी के विश्लेषणात्मक और फोरेंसिक टॉक्सिकोलॉजी विभाग में दिया गया है, जिसका नाम आईएम सेचेनोव (TsKhTL GOU VPO फर्स्ट मॉस्को स्टेट मेडिकल यूनिवर्सिटी, I.M. Sechenov के नाम पर रखा गया है) के नाम पर रखा गया है। 30 अगस्त, 2011 के रूसी संघ के स्वास्थ्य मंत्रालय के नंबर 179-25 / 12I, जहां, हालांकि, अन्य बातों के अलावा, फेनोबार्बिटल (1 "000 एनजी / एमएल) की सांद्रता, बार्बिटुरेट्स के समूह से अन्य पदार्थ (100 एनजी / एमएल) और कोटिनिन (100 एनजी / एमएल) इंगित किए गए हैं)। इसके अनुसार TsKhTL GOU VPO फर्स्ट मॉस्को स्टेट मेडिकल यूनिवर्सिटी। आई। एम। सेचेनोव, रूसी संघ के स्वास्थ्य और सामाजिक विकास मंत्रालय के आदेश के पैरा 2 के अनुसार, 27 जनवरी, 2006 नंबर 40 "मानव में उपस्थिति के विश्लेषणात्मक निदान में रासायनिक और विषाक्त अध्ययन के संगठन पर। शराब, मादक दवाओं, मनोदैहिक और अन्य विषाक्त पदार्थों का शरीर", मानव शरीर में मादक दवाओं, मनोदैहिक और अन्य विषाक्त पदार्थों की उपस्थिति के विश्लेषणात्मक निदान में रासायनिक-विषाक्तता संबंधी अध्ययन करने के लिए आवश्यकताओं को विकसित और अनुमोदित किया।

विशेष रूप से, सूचना पत्र के पैराग्राफ 12 के अनुसार, वाहन चालकों की चिकित्सा परीक्षा आयोजित करते समय, छात्रों का परीक्षण करना, नागरिकों के आवेदन के दौरान रासायनिक और विषाक्त अध्ययन करना और कानून द्वारा स्थापित अन्य मामलों में, मौखिक तरल पदार्थ (लार) की परीक्षा अस्वीकार्य है। , चूंकि यह मानव शरीर में मादक दवाओं, मनोदैहिक और अन्य विषाक्त पदार्थों की उपस्थिति को मज़बूती से स्थापित करने की अनुमति नहीं देता है। नियंत्रित पदार्थों को मौखिक द्रव (लार) में एक समय अंतराल के भीतर पाया जा सकता है जो खपत के क्षण से कुछ घंटों से अधिक न हो।

प्रारंभिक रासायनिक और विषैले अध्ययनों के दौरान मूत्र के नमूनों में मादक दवाओं, मनोदैहिक और अन्य विषाक्त पदार्थों (उनके मेटाबोलाइट्स) का पता लगाने के लिए उपयोग किए जाने वाले तकनीकी उपकरणों की आवश्यकताएं (दिशानिर्देशों के लिए परिशिष्ट संख्या 1): शरीर की उपस्थिति के लिए रासायनिक और विषाक्त अध्ययन करने के नियम सामान्य शैक्षिक संगठनों और पेशेवर शैक्षिक संगठनों के साथ-साथ उच्च शिक्षा के शैक्षिक संगठनों में छात्रों की मादक दवाओं और मादक दवाओं, मनोदैहिक और अन्य विषाक्त पदार्थों (उनके मेटाबोलाइट्स) / डेवलपर के मादक पदार्थों के अवैध सेवन की जल्द पहचान करने के लिए: एसोसिएशन रूस के स्वास्थ्य मंत्रालय के विश्लेषणात्मक और फोरेंसिक विष विज्ञान में मुख्य फ्रीलांस विशेषज्ञ द्वारा संपादित प्रयोगशाला सेवा "फेडरेशन लेबोरेटरी मेडिसिन" के विशेषज्ञ और संगठन, रसायन विज्ञान के डॉक्टर, प्रोफेसर बीएन इज़ोटोव और क्लिनिकल में मुख्य फ्रीलांस विशेषज्ञ रूस के स्वास्थ्य मंत्रालय के प्रयोगशाला निदान पर, चिकित्सा विज्ञान के डॉक्टर, प्रोफेसर ए। जी। कोचेतोव // मॉस्को, 2015)

पुष्टिकारक रासायनिक-विषैले अध्ययन (उपरोक्त स्रोत के लिए परिशिष्ट संख्या 2) का संचालन करते समय मूत्र के नमूनों में मादक दवाओं, मनोदैहिक और अन्य विषाक्त पदार्थों (उनके चयापचयों) का पता लगाने के लिए उपयोग किए जाने वाले तकनीकी साधनों की आवश्यकताएं।

उसी समय, जब रूसी संघ के प्रशासनिक अपराधों की संहिता के अनुच्छेद 12.8 और 12.27, भाग 3 के तहत प्रशासनिक अपराधों के मामलों में बचाव किया जाता है, साथ ही नशे में गाड़ी चलाते समय आपराधिक दायित्व से जुड़े मामलों में (अनुच्छेद 264 और 264.1) रूसी संघ का आपराधिक संहिता), किसी को यह नहीं भूलना चाहिए कि मानव शरीर में मादक दवाओं या मनोदैहिक पदार्थों की उपस्थिति की स्थिति में प्रशासनिक जिम्मेदारी उत्पन्न होती है, मानव शरीर में उनकी एकाग्रता की परवाह किए बिना, रक्त और मूत्र में।

पूर्वगामी को ध्यान में रखते हुए, नशीली दवाओं की जांच, रासायनिक और विषाक्त अध्ययन, मादक पदार्थों के फोरेंसिक रासायनिक अध्ययन के ढांचे के भीतर पहचान ड्रग्स, साइकोट्रोपिक और जहरीले पदार्थ, और पदार्थ जो नशा का कारण बनते हैं, यहां तक ​​​​कि स्तर पर, बोलने के लिए, "इस्तेमाल की जाने वाली विधि का पता लगाने की सीमा" वाहन के चालक को प्रशासनिक या आपराधिक दायित्व के तहत लाने का आधार है। रूसी संघ के प्रशासनिक अपराधों की संहिता और / या आपराधिक आरएफ कोड के प्रासंगिक लेख।

जानकारी के लिए - " "

दवा की रोगाणुरोधी गतिविधि के मानदंड हैं: न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता(एमआईसी) और न्यूनतम जीवाणुनाशक सांद्रता(एमबीके)। एमआईसी एंटीबायोटिक दवाओं की सबसे कम सांद्रता है जो पूरी तरह से इन विट्रो में रोकता है दृश्यमान जीवाणु वृद्धि। इसे mg/l या µg/ml में व्यक्त किया जाता है। एमबीसी एक एंटीबायोटिक की सबसे कम सांद्रता है जो एक जीवाणुनाशक प्रभाव का कारण बनती है। इसे निर्धारित करने के लिए, टेस्ट ट्यूबों से बोना आवश्यक है जिसमें नेत्रहीन कोई वृद्धि नहीं होती है, घने पोषक तत्व अगर पर एंटीबायोटिक नहीं होता है। यह सूचक महान नैदानिक ​​​​महत्व का है। धारावाहिक तनुकरण की विधि के आधार पर, सूक्ष्म विधियाँ बनाई गई हैं जिनमें पोषक माध्यम की एक छोटी मात्रा का उपयोग शामिल है। इस तरह के शोध के लिए वर्तमान में कई व्यावसायिक किट का उत्पादन किया जा रहा है, जिसमें पोषक माध्यम में एंटीबायोटिक दवाओं के सूखे, स्थिर तनुकरण शामिल हैं, जो एक परीक्षण सूक्ष्म जीव निलंबन से पतला होते हैं। प्रयोगशाला में मीडिया और एंटीबायोटिक दवाओं के कमजोर पड़ने की आवश्यकता को समाप्त करते हुए, इन किटों को सामान्य परिस्थितियों में संग्रहीत किया जा सकता है। माइक्रोडिल्यूशन परीक्षणों का एक अन्य लाभ यह है कि वे एक स्वचालित प्रणाली में शामिल होते हैं।

प्राप्त आंकड़ों (विकास अवरोध क्षेत्र या एमआईसी मूल्य का व्यास) के आधार पर, सूक्ष्मजीवों को संवेदनशील, मध्यम प्रतिरोधी और प्रतिरोधी में विभाजित किया जाता है। इन श्रेणियों के बीच अंतर करने के लिए, एंटीबायोटिक दवाओं की तथाकथित सीमा सांद्रता का उपयोग किया जाता है, जो स्थिर मूल्य नहीं हैं। सूक्ष्मजीव जनसंख्या परिवर्तन की संवेदनशीलता के रूप में उन्हें संशोधित किया जाता है। अग्रणी विशेषज्ञ (कीमोथेरेपिस्ट, माइक्रोबायोलॉजिस्ट) जो विशेष समितियों के सदस्य हैं, व्याख्या मानदंड के विकास और संशोधन में लगे हुए हैं। इनमें से एक है नेशनल कमेटी फॉर क्लिनिकल लेबोरेटरी स्टैंडर्ड्स ( एनव्यावहारिक सीसमिति के लिए सीलिनिकल लीअबॉरेटरी एसटैन्डर्ड्स - एनसीसीएलएस), संयुक्त राज्य अमेरिका में आयोजित किया गया। वर्तमान में, एनसीसीएलएस मानकों का उपयोग बहुकेंद्रीय सूक्ष्मजीवविज्ञानी और नैदानिक ​​अध्ययनों में बैक्टीरिया की संवेदनशीलता के निर्धारण के परिणामों के मूल्यांकन के लिए अंतरराष्ट्रीय मानकों के रूप में किया जाता है।

एंटीबायोटिक दवाओं के लिए बैक्टीरिया की संवेदनशीलता का निर्धारण।एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता के लिए मानदंड एंटीबायोटिक की न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता (एमआईसी) है, जो मानक प्रयोगात्मक स्थितियों के तहत रोगज़नक़ के विकास को रोकता है।

दवा प्रतिरोध का निर्धारण करने के लिए, रोगी के शरीर से पृथक रोगज़नक़ की एक दैनिक शुद्ध संस्कृति का उपयोग किया जाता है, और इसके टीकाकरण के लिए एक मानक पोषक माध्यम (एजीवी या मुलर-हिंटन एगर) का उपयोग किया जाता है।

एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता का निर्धारण डिस्क प्रसार विधि या तरल या ठोस मीडिया में एंटीबायोटिक के सीरियल कमजोर पड़ने की विधि द्वारा किया जाता है।

डिस्क प्रसार विधि।पेपर डिस्क की विधि द्वारा एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति संवेदनशीलता का निर्धारण पोषक माध्यम में एंटीबायोटिक के प्रसार पर आधारित है। डिस्क में एंटीबायोटिक दवाओं की एकाग्रता को चुना जाता है ताकि मानक परीक्षण सूक्ष्मजीवों के विकास अवरोध क्षेत्रों के व्यास अंतरराष्ट्रीय मानकों के अनुरूप हों। यह सांद्रता सूक्ष्मजीवों के मानक उपभेदों के लिए औसत चिकित्सीय खुराक से मेल खाती है।

सूक्ष्मजीवों के तैयार निलंबन को पेट्री डिश में एक विशेष माध्यम (एजीवी या म्यूएलर-हिंटन अगर) की सतह पर टीका लगाया जाता है। फिर, बाँझ चिमटी के साथ, विभिन्न एंटीबायोटिक दवाओं के समाधान के साथ लगाए गए मानक पेपर डिस्क को एक दूसरे से समान दूरी पर, किनारों और डिश के केंद्र से (आप विशेष उपकरणों और डिस्पेंसर का उपयोग भी कर सकते हैं) बीज की सतह पर रखा जाता है। सीडेड कप को थर्मोस्टेट में अध्ययन किए गए बैक्टीरिया के विकास के लिए इष्टतम तापमान पर रखा जाता है। यदि बैक्टीरिया इस एंटीबायोटिक के प्रति संवेदनशील होते हैं, तो डिस्क के चारों ओर एक विकास अवरोध क्षेत्र बनता है। विकास अवरोध के क्षेत्र का व्यास इस एंटीबायोटिक के लिए अध्ययन किए गए सूक्ष्मजीव की संवेदनशीलता की डिग्री से मेल खाता है। अंतिम परिणाम का मूल्यांकन विशेष तालिकाओं के अनुसार किया जाता है, जो मानक संस्कृतियों, संवेदनशील, प्रतिरोधी और मध्यम प्रतिरोधी के विकास निषेध के क्षेत्रों के व्यास को इंगित करते हैं।

डिस्क विधि पॉलीपेप्टाइड एंटीबायोटिक दवाओं के लिए सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता को निर्धारित करने के लिए विश्वसनीय डेटा प्रदान नहीं करती है जो खराब रूप से अगर (उदाहरण के लिए, पॉलीमीक्सिन, रिस्टोमाइसिन) में फैलती हैं। साथ ही, यह विधि एंटीबायोटिक की न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता को निर्धारित करने की अनुमति नहीं देती है।

सीरियल कमजोर पड़ने की विधि।यह विधि एंटीबायोटिक की न्यूनतम सांद्रता निर्धारित करती है जो अध्ययनित जीवाणु संस्कृति (आईपीसी, एमआईसी) के विकास को रोकती है। ऐसा करने के लिए, पहले एक विशेष विलायक या बफर समाधान में एंटीबायोटिक (μg/ml या IU/ml) की एक निश्चित एकाग्रता वाले स्टॉक समाधान तैयार करें। इसके अलावा, शोरबा (1 मिलीलीटर की मात्रा में) में सभी बाद के कमजोर पड़ने को मुख्य समाधान से तैयार किया जाता है, जिसके बाद अध्ययन किए गए जीवाणु निलंबन के 0.1 मिलीलीटर में प्रत्येक कमजोर पड़ने पर प्रति 1 मिलीलीटर में 10 6-10 7 जीवाणु कोशिकाएं होती हैं। अंतिम ट्यूब में 1 मिलीलीटर शोरबा (एंटीबायोटिक के बिना) और 0.1 मिलीलीटर जीवाणु निलंबन (संस्कृति नियंत्रण) जोड़ें। फसलों को अगले दिन तक 37 0 सी पर ऊष्मायन किया जाता है, जिसके बाद पोषक माध्यम की मैलापन पर प्रयोग के परिणाम नियंत्रण की तुलना में नोट किए जाते हैं। एक पारदर्शी पोषक माध्यम के साथ अंतिम टेस्ट ट्यूब, इसमें निहित एंटीबायोटिक की न्यूनतम निरोधात्मक (निरोधात्मक) एकाग्रता (एमआईसी, एमआईसी) के प्रभाव में, अध्ययन किए गए जीवाणु संस्कृति की वृद्धि मंदता को इंगित करता है। न्यूनतम जीवाणुनाशक सांद्रता (एमबीसी) का आकलन करने के लिए, बिना किसी वृद्धि के टेस्ट ट्यूब से एंटीबायोटिक के बिना घने पोषक माध्यम पर बीजारोपण किया जाता है। एमबीसी को एंटीबायोटिक की न्यूनतम सांद्रता के रूप में लिया जाता है जो सूक्ष्मजीव की मृत्यु का कारण बनता है, जो कि पोषक माध्यम के साथ पेट्री डिश पर विकास की अनुपस्थिति की विशेषता है।

एक आगर माध्यम में एक एंटीबायोटिक के सीरियल कमजोर पड़ने की विधि।इस मामले में, एक प्रयोग में सूक्ष्मजीवों की कई संस्कृतियों के दिए गए एंटीबायोटिक की विभिन्न सांद्रता की संवेदनशीलता का परीक्षण करना संभव है। एंटीबायोटिक के विभिन्न तनुकरण एक बाँझ अगर माध्यम में तैयार किए जाते हैं। इसके लिए, इसमें प्रारंभिक एंटीबायोटिक घोल की आवश्यक मात्रा डाली जाती है, अच्छी तरह से मिलाया जाता है और बाँझ पेट्री डिश में डाला जाता है। अगर के जमने के बाद, कप के निचले हिस्से को बाहर से एक मार्कर के साथ सेक्टरों में विभाजित किया जाता है। प्रत्येक अध्ययन की गई संस्कृति को एंटीबायोटिक के विभिन्न सांद्रता वाले व्यंजनों में एक निश्चित क्षेत्र पर बैक्टीरियोलॉजिकल लूप का उपयोग करके स्ट्रोक के साथ बीज दिया जाता है। एंटीबायोटिक की विभिन्न सांद्रता वाली प्लेटों पर परीक्षण संस्कृतियों का टीकाकरण एक एप्लीकेटर का उपयोग करके किया जा सकता है जो प्रति प्लेट 12-15 संस्कृतियों को एक साथ टीका लगाने की अनुमति देता है। फिर कपों को थर्मोस्टैट में ऐसे तापमान पर रखा जाता है जो अध्ययन किए गए बैक्टीरिया के विकास और विकास के लिए इष्टतम हो। नियंत्रण डिश में माध्यम पर वृद्धि की तुलना में बैक्टीरिया के विकास की उपस्थिति या अनुपस्थिति के परिणामों को ध्यान में रखा जाता है। बैक्टीरिया को एंटीबायोटिक के प्रति संवेदनशील माना जाता है, जिस पर उनकी वृद्धि पूरी तरह से दबा दी जाती है।

ई-परीक्षण विधि।यह विधि सीरियल कमजोर पड़ने की विधि और डिस्क विधि के लाभों को जोड़ती है। डिस्क के बजाय, एंटीबायोटिक के साथ गर्भवती फिल्टर पेपर के स्ट्रिप्स ("शासक") का उपयोग किया जाता है, और पट्टी के आधार पर एंटीबायोटिक की एकाग्रता न्यूनतम होगी, और "शीर्ष" पर - अधिकतम। स्ट्रिप्स को अध्ययन के तहत संस्कृति के साथ पोषक तत्व अगर की सतह पर रखा जाता है। यदि बैक्टीरिया इस दवा की कार्रवाई के प्रति संवेदनशील हैं, तो पट्टी के क्षेत्रों के चारों ओर विकास अवरोध का एक दीर्घवृत्तीय क्षेत्र दिखाई देता है जिसमें इसकी निरोधात्मक सांद्रता होती है। इस क्षेत्र के आधार पर एंटीबायोटिक सांद्रता का संख्यात्मक मान उस फसल के लिए उस एंटीबायोटिक के एमआईसी को इंगित करता है।

प्रति संवेदनशीलसूक्ष्मजीवों के उपभेदों को शामिल करें जिनकी वृद्धि एंटीबायोटिक दवाओं की पारंपरिक खुराक का उपयोग करते समय रोगी के रक्त सीरम में पाए जाने वाली दवा की सांद्रता में बाधित होती है।

प्रति मध्यम स्थिरउन उपभेदों को शामिल करें जिनके विकास अवरोध के लिए सांद्रता की आवश्यकता होती है जो रक्त सीरम में तब बनते हैं जब दवा की अधिकतम खुराक दी जाती है।

टिकाऊसूक्ष्मजीव हैं जिनकी वृद्धि को अधिकतम स्वीकार्य खुराक का उपयोग करते समय शरीर में बनाई गई सांद्रता पर दवा द्वारा दबाया नहीं जाता है।

परीक्षण प्रश्न।

"एंटीबायोटिक्स" शब्द को परिभाषित करें। तैयारी की विधि के आधार पर एंटीबायोटिक दवाओं के मुख्य समूह: प्राकृतिक, अर्ध-सिंथेटिक, सिंथेटिक। कीमोथेरेपी के सिद्धांत को विकसित करने वाले वैज्ञानिक का नाम बताइए। कीमोथेराप्यूटिक दवा चुनते समय कौन से गुण निर्णायक होते हैं? कीमोथेराप्यूटिक इंडेक्स क्या है, इसका फॉर्मूला लिखिए, यह क्या होना चाहिए? पहली एंटीस्पिरोचेटल दवाओं को निर्दिष्ट करें; पहली जीवाणुरोधी दवा और इसे प्राप्त करने वाले वैज्ञानिक का नाम। रूसी वैज्ञानिकों के क्या नाम हैं जिन्होंने सबसे पहले ग्रीन मोल्ड के जीवाणुरोधी गुणों की खोज की थी। उस वैज्ञानिक का नाम बताइए जिसने पेनिसिलियम कवक के जीवाणुरोधी गुणों का अध्ययन किया और पेनिसिलिन को अलग करने का प्रयास किया। वैज्ञानिक जिन्होंने पहली बार पेनिसिलिन की तैयारी प्राप्त की। प्रतिजैविकों के उत्पादक - उदाहरण दीजिए। उत्पत्ति, रासायनिक संरचना, क्रिया के स्पेक्ट्रम द्वारा एंटीबायोटिक दवाओं का वर्गीकरण। एंटीबायोटिक दवाओं की कार्रवाई का तंत्र: लक्ष्य (विभिन्न समूहों के एंटीबायोटिक दवाओं के आवेदन के बिंदु)। क्रिया के प्रकार - जीवाणुनाशक और बैक्टीरियोस्टेटिक; इन विट्रो प्रयोग में उन्हें कैसे निर्धारित किया जाए? एंटीवायरल एंटीबायोटिक्स, उनकी कार्रवाई के तंत्र। एंटीबायोटिक्स की गतिविधि को किन इकाइयों में मापा जाता है? एंटीबायोटिक दवाओं के भंडारण की स्थिति।

एंटीबायोटिक चिकित्सा के संभावित दुष्प्रभावों का नाम और वर्णन करें। रोगाणुओं में दवा प्रतिरोध की अवधारणा को परिभाषित करें। दवा प्रतिरोध के प्रकार। प्राकृतिक और अधिग्रहित (प्राथमिक और माध्यमिक)। दवा प्रतिरोध के आनुवंशिक तंत्र: गुणसूत्र और प्लास्मिड। औषध प्रतिरोध के प्ररूपी तंत्र - नाम और वर्णन। प्रतिजैविकों का तर्कसंगत उपयोग - विधियों के नाम लिखिए। दवाओं के नाम बताइए - एंजाइमों के अवरोधक जो एंटीबायोटिक दवाओं को नष्ट करते हैं। प्रतिजैविकों के प्रति रोगाणुओं की संवेदनशीलता का निर्धारण करने की विधियों का वर्णन कीजिए।

प्रासंगिकता

नेत्र अभ्यास में, एक जीवाणुरोधी दवा का चुनाव, जैसा कि रोगाणुरोधी चिकित्सा के अन्य मामलों में होता है, मुख्य रूप से रोगज़नक़ और एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति इसकी संवेदनशीलता पर निर्भर करता है। उपयोग की जाने वाली जीवाणुरोधी दवा जीवाणुनाशक होनी चाहिए और कम न्यूनतम अवरोधक एकाग्रता (एमआईसी) होनी चाहिए। यह आधुनिक परिस्थितियों में विशेष रूप से महत्वपूर्ण है क्योंकि सूक्ष्मजीवों के एंटीबायोटिक दवाओं के लगातार बढ़ते प्रतिरोध के साथ। खुराक में दवा की नियुक्ति जो सूक्ष्मजीव पर हानिकारक प्रभाव डालने में सक्षम नहीं है, माइक्रोफ्लोरा प्रतिरोध के आगे विकास में योगदान कर सकती है।

एमआईसी एक जीवाणुरोधी दवा की सबसे कम सांद्रता है जो नग्न आंखों को दिखाई देने वाले माइक्रोफ्लोरा के विकास को रोकता है। यह आईपीसी है जो एक एंटीबायोटिक के लिए एक सूक्ष्मजीव की संवेदनशीलता की डिग्री को सबसे सटीक रूप से चिह्नित करना संभव बनाता है। दवा का एमआईसी जितना कम होगा, माइक्रोफ्लोरा की संवेदनशीलता उतनी ही अधिक होगी। केवल आईपीसी का ज्ञान हमें इस प्रश्न को हल करने की अनुमति देता है: क्या एंटीबायोटिक, जब शीर्ष पर लागू किया जाता है, तो इस सूक्ष्मजीव को दबाने के लिए पर्याप्त एकाग्रता में रोगज़नक़ के स्थानीयकरण के क्षेत्रों तक पहुँचता है? यह भी ध्यान दिया जाना चाहिए कि नेत्र अभ्यास (फ्लोरोक्विनोलोन और एमिनोग्लाइकोसाइड) में सबसे व्यापक रूप से उपयोग की जाने वाली जीवाणुरोधी दवाएं खुराक पर निर्भर दवाएं हैं, अर्थात। सूक्ष्मजीवों की मृत्यु दर उनकी सांद्रता के सीधे अनुपात में बढ़ जाती है। वैज्ञानिक साहित्य में, लेवोफ़्लॉक्सासिन की तुलना में आंख के पूर्वकाल कक्ष की नमी में ओफ़्लॉक्सासिन के एमआईसी की धीमी उपलब्धि का प्रमाण है। यह भी साबित हो चुका है कि लिवोफ़्लॉक्सासिन के एक बार डालने के बाद, आंखों में संक्रमण पैदा करने वाले सभी सूक्ष्मजीवों के लिए इसकी सांद्रता एमआईसी से कई गुना अधिक होती है। हालांकि, नई जीवाणुरोधी दवाओं को लगातार नैदानिक ​​​​अभ्यास में पेश किया जा रहा है, और उपलब्ध साहित्य में व्यावहारिक रूप से आईपीसी पर कोई जानकारी नहीं है, अर्थात। नेत्र विज्ञान में उपयोग किए जाने वाले आधुनिक एंटीबायोटिक दवाओं के पूरे स्पेक्ट्रम की रोगाणुरोधी प्रभावकारिता पर, जो हमारे अध्ययन का कारण था।

लक्ष्य

सबसे आम माइक्रोफ्लोरा के लिए आधुनिक एंटीबायोटिक दवाओं के एमआईसी का निर्धारण करें।

सामग्री और विधियां

एंटीबायोटिक दवाओं के एमआईसी का निर्धारण करने के लिए, हमने हाय कॉम्ब एमआईसी टेस्ट (रूसी संघ के स्वास्थ्य मंत्रालय का पंजीकरण प्रमाण पत्र 2003/1664 दिनांक 23 दिसंबर, 2003) का उपयोग किया। परीक्षण में स्ट्रिप्स होते हैं जिनमें एक नहीं बल्कि एक ही एंटीबायोटिक की घटती सांद्रता की एक श्रृंखला के साथ संलग्न डिस्क होती है। अध्ययन करते समय, हमने सबसे पहले एक साधारण अगर पर टीकाकरण के लिए कंजंक्टिवल कैविटी की सामग्री ली। इसके बाद, सूक्ष्मजीव की एक शुद्ध संस्कृति को अलग किया गया और लॉन के रूप में पेट्री डिश में उपयुक्त ठोस पोषक माध्यम पर बोया गया। तब पेट्री डिश को 24 घंटे के लिए 37º के तापमान पर थर्मोस्टैट में इनक्यूबेट किया गया था। उसी समय, परीक्षण स्ट्रिप्स के चारों ओर एक दीर्घवृत्त के आकार का माइक्रोफ्लोरा प्रतिधारण क्षेत्र बनाया गया, जिससे जीवाणुरोधी दवा के एमआईसी को निर्धारित करना संभव हो गया। एमआईसी को माइक्रोफ्लोरा के विकास निषेध के अण्डाकार क्षेत्र के न्यूनतम व्यास के क्षेत्र में एक परीक्षण पट्टी पर एक डिजिटल पैमाने पर निर्धारित किया गया था। हमने नैदानिक ​​​​अभ्यास में सबसे आम जीवाणुरोधी दवाओं के एमआईसी का निर्धारण किया - सिप्रोफ्लोक्सासिन (सिप्रोमेड, सेंटिस), ओफ़्लॉक्सासिन (फ्लोक्सल, बॉश और लोम्ब), लेवोफ़्लॉक्सासिन (सिग्निसेफ, सेंटिस), मोक्सीफ़्लोक्सासिन (विगैमॉक्स, एल्कॉन), गैटिफ़्लोक्सासिन (ज़िमर, एलरगन) और टोब्रामाइसिन (टोब्रेक्स, एल्कॉन)।

परिणाम

2 महीने और उससे अधिक उम्र के कुल 105 मरीजों की जांच की गई। पूर्वकाल की आंख की विभिन्न सूजन संबंधी बीमारियों के साथ 7 साल तक: तीव्र और पुरानी नेत्रश्लेष्मलाशोथ, ब्लेफेरोकोनजिक्टिवाइटिस, नासोलैक्रिमल डक्ट स्टेनोसिस, क्रोनिक डैक्रीकोस्टाइटिस और बैक्टीरियल केराटाइटिस द्वारा जटिल। एपिडर्मल (43.9%) और स्टैफिलोकोकस ऑरियस (22.9%), स्ट्रेप्टोकोकी (15.1%), साथ ही ग्राम-नेगेटिव माइक्रोफ्लोरा (18.1%) बच्चों के कंजंक्टिवल कैविटी से निकलने वाली फसलों में पाए गए।

सभी परीक्षण किए गए जीवाणुरोधी दवाओं में, एपिडर्मल स्टेफिलोकोकस के लिए एमआईसी सबसे अधिक था। एपिडर्मल स्टैफिलोकोकस के लिए सबसे कम एमआईसी क्रमशः लेवोफ़्लॉक्सासिन और मोक्सीफ़्लोक्सासिन - 0.544 और 0.551 माइक्रोग्राम दवाओं में पाया गया था। अधिकतम एमआईसी हमारे द्वारा टोब्रामाइसिन (8.623 माइक्रोग्राम) में दर्ज किया गया था, अर्थात। यह दवा स्टैफिलोकोकस एपिडर्मिडिस के खिलाफ सबसे कम प्रभावी थी। इस तथ्य के बावजूद कि हाल ही में नैदानिक ​​​​अभ्यास में गैटीफ्लोक्सासिन का उपयोग किया गया है, इसका एमआईसी काफी अधिक था - 1.555 एमसीजी। सिप्रोफ्लोक्सासिन और ओफ़्लॉक्सासिन का एमआईसी छोटा था - क्रमशः 1.023 और 1.191 माइक्रोग्राम।

स्टैफिलोकोकस ऑरियस के लिए सभी जीवाणुरोधी दवाओं का एमआईसी एपिडर्मल की तुलना में कम था। उसी समय, लेवोफ़्लॉक्सासिन (0.020 μg) में सबसे कम एमआईसी निकला, यानी। स्टैफिलोकोकस ऑरियस के कारण होने वाले संक्रमण के उपचार के लिए, यह दवा सबसे प्रभावी साबित हुई है। मोक्सीफ्लोक्सासिन (0.202 माइक्रोग्राम) और ओफ़्लॉक्सासिन (0.240 माइक्रोग्राम) का एमआईसी भी कम था, लेकिन लेवोफ़्लॉक्सासिन के एमआईसी से 10 गुना अधिक था। उच्चतम एमआईसी हमारे द्वारा ड्रग टोब्रामाइसिन (5.115 माइक्रोग्राम) में दर्ज किया गया था।

निम्नलिखित स्ट्रेप्टोकोकी को बच्चों के नेत्रश्लेष्मला गुहा से अलग किया गया था: स्ट्रेप्टोकोकस न्यूमोनिया, स्ट्रेप्टोकोकस विरिडन्स और स्ट्रेप्टोकोकस हेमोलिटिकस। बच्चों से अलग किए गए सभी स्ट्रेप्टोकोकी के लिए सबसे कम एमआईसी मोक्सीफ्लोक्सासिन में पाया गया - केवल 0.006 μg। लेवोफ़्लॉक्सासिन का एमआईसी भी छोटा था, लेकिन मोक्सीफ़्लोक्सासिन के एमआईसी से काफी अधिक था - 0.135 माइक्रोग्राम। उच्चतम एमआईसी सिप्रोफ्लोक्सासिन (1.246 माइक्रोग्राम) और टोब्रामाइसिन (6.460 माइक्रोग्राम) के लिए उच्चतम दर्ज किया गया था।

बच्चों से अलग किए गए ग्राम-नकारात्मक सूक्ष्मजीवों के समूह में स्यूडोमोनास एरुगिनोसा, एंटरोबैक्टर ब्रेविस, क्लेबसिएला न्यूमोनिया और सेराटिया मार्सेन्स शामिल हैं। ग्राम-नकारात्मक माइक्रोफ्लोरा के लिए सबसे कम एमआईसी सिप्रोफ्लोक्सासिन - 0.034 माइक्रोग्राम में पाया गया था। कम एमआईसी स्कोर, यानी। लेवोफ़्लॉक्सासिन - 0.051 एमसीजी के लिए उच्च दक्षता भी नोट की गई थी। ओफ़्लॉक्सासिन और गैटीफ़्लॉक्सासिन का एमआईसी काफी अधिक और लगभग समान था - 0.096 और 0.102 माइक्रोग्राम। उच्चतम एमआईसी फिर से टोब्रामाइसिन (7.050 माइक्रोग्राम) के लिए दर्ज किया गया था (चित्र देखें)

निष्कर्ष

इस प्रकार, बच्चों में सबसे अधिक पृथक माइक्रोफ्लोरा के संबंध में लेवोफ़्लॉक्सासिन सबसे प्रभावी जीवाणुरोधी दवा निकला। स्ट्रेप्टोकोकी और ग्राम-नकारात्मक सूक्ष्मजीवों के लिए इस दवा का एमआईसी भी कम निकला, जो हमें जीवाणु प्रकृति के सभी सूजन संबंधी नेत्र रोगों के उपचार के लिए 0.5% लेवोफ़्लॉक्सासिन साइनिसफ़ पर आधारित दवा की सिफारिश करने की अनुमति देता है।

स्ट्रेप्टोकोकी के कारण होने वाले सूजन संबंधी नेत्र रोगों के उपचार के लिए, मोक्सीफ्लोक्सासिन को प्राथमिकता दी जाती है, क्योंकि स्ट्रेप्टोकोकी के लिए इसका एमआईसी सबसे छोटा था। सभी ग्राम-नकारात्मक माइक्रोफ्लोरा के लिए सिप्रोफ्लोक्सासिन का एमआईसी सबसे कम निकला, जो इस दवा की आम तौर पर मान्यता प्राप्त उच्च दक्षता की पुष्टि करता है। सभी पृथक सूक्ष्मजीवों के लिए उच्चतम एमआईसी टोब्रामाइसिन में पाया गया।

दवा की रोगाणुरोधी गतिविधि के मानदंड हैं: न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता(आईपीसी) और न्यूनतम जीवाणुनाशक सांद्रता(एमबीके)। एमआईसी एंटीबायोटिक दवाओं की सबसे कम सांद्रता है जिसे इन विट्रो में पूरी तरह से दबा दिया जाता है दृश्यमान जीवाणु वृद्धि। इसे mg/l या µg/ml में व्यक्त किया जाता है। एमबीसी एक एंटीबायोटिक की सबसे कम सांद्रता है जो एक जीवाणुनाशक प्रभाव का कारण बनती है। इसे निर्धारित करने के लिए, एक घने पोषक तत्व अगर पर एक एंटीबायोटिक नहीं होता है, तो टेस्ट ट्यूब (नेत्रहीन रूप से कोई वृद्धि नहीं होती है) से टीका लगाना आवश्यक है। यह सूचक महान नैदानिक ​​​​महत्व का है। धारावाहिक तनुकरण की विधि के आधार पर, सूक्ष्म विधियाँ बनाई गई हैं जिनमें पोषक माध्यम की एक छोटी मात्रा का उपयोग शामिल है। इस तरह के शोध के लिए वर्तमान में कई व्यावसायिक किट उपलब्ध हैं, जिनमें एंटीबायोटिक दवाओं के सूखे, स्थिर तनुकरण शामिल हैं, जो एक परीक्षण सूक्ष्म जीव निलंबन से पतला होते हैं। प्रयोगशाला में मीडिया और एंटीबायोटिक दवाओं के कमजोर पड़ने की आवश्यकता को समाप्त करते हुए, इन किटों को सामान्य परिस्थितियों में संग्रहीत किया जा सकता है। माइक्रोडिल्यूशन परीक्षणों का एक अन्य लाभ यह है कि वे एक स्वचालित प्रणाली में शामिल होते हैं।

प्राप्त आंकड़ों (विकास मंदता के क्षेत्र का व्यास या आईपीसी के मूल्य) के आधार पर, सूक्ष्मजीवों को संवेदनशील, मध्यम प्रतिरोधी और प्रतिरोधी में विभाजित किया जाता है। इन श्रेणियों के बीच अंतर करने के लिए, एंटीबायोटिक दवाओं की तथाकथित सीमा सांद्रता का उपयोग किया जाता है, जो स्थिर मूल्य नहीं हैं। सूक्ष्मजीव जनसंख्या परिवर्तन की संवेदनशीलता के रूप में उन्हें संशोधित किया जाता है। अग्रणी विशेषज्ञ (कीमोथेरेपिस्ट, माइक्रोबायोलॉजिस्ट) जो विशेष समितियों के सदस्य हैं, व्याख्या मानदंड के विकास और संशोधन में लगे हुए हैं। इनमें से एक है नेशनल कमेटी फॉर क्लिनिकल लेबोरेटरी स्टैंडर्ड्स ( एनव्यावहारिक सीके लिए समिति सीलिनिकल लीअबॉरेटरी एसटैन्डर्ड्स - एनसीसीएलएस), संयुक्त राज्य अमेरिका में आयोजित किया गया। वर्तमान में, एनसीसीएलएस मानकों का उपयोग बहुकेंद्रीय सूक्ष्मजीवविज्ञानी और नैदानिक ​​अध्ययनों में बैक्टीरिया की संवेदनशीलता के निर्धारण के परिणामों के मूल्यांकन के लिए अंतरराष्ट्रीय मानकों के रूप में किया जाता है।

एंटीबायोटिक दवाओं के लिए जीवाणु संवेदनशीलता का निर्धारण

एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता के लिए मानदंड एक एंटीबायोटिक की न्यूनतम अवरोधक एकाग्रता (एमआईसी) या न्यूनतम अवरोधक एकाग्रता (एमआईसी) है जो मानक प्रयोगात्मक स्थितियों के तहत रोगज़नक़ के विकास को रोकता है।

दवा प्रतिरोध का निर्धारण करने के लिए, रोगी के शरीर से पृथक रोगज़नक़ की एक दैनिक शुद्ध संस्कृति का उपयोग किया जाता है, और इसके टीकाकरण के लिए एक मानक पोषक माध्यम (एजीवी या मुलर-हिंटन एगर) का उपयोग किया जाता है।

एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता का निर्धारण डिस्क प्रसार विधि या तरल या ठोस मीडिया में एंटीबायोटिक के सीरियल कमजोर पड़ने की विधि द्वारा किया जाता है।

डिस्क प्रसार विधि

पेपर डिस्क की विधि द्वारा एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति संवेदनशीलता का निर्धारण पोषक माध्यम में एंटीबायोटिक के प्रसार पर आधारित है। डिस्क में एंटीबायोटिक दवाओं की एकाग्रता को चुना जाता है ताकि मानक परीक्षण सूक्ष्मजीवों के विकास अवरोध क्षेत्रों के व्यास अंतरराष्ट्रीय मानकों के अनुरूप हों। यह सांद्रता सूक्ष्मजीवों के मानक उपभेदों के लिए औसत चिकित्सीय खुराक से मेल खाती है।

सूक्ष्मजीवों के तैयार निलंबन को पेट्री डिश में एक विशेष माध्यम (एजीवी या म्यूएलर-हिंटन अगर) की सतह पर टीका लगाया जाता है। फिर, बाँझ चिमटी के साथ, विभिन्न एंटीबायोटिक दवाओं के समाधान के साथ लगाए गए मानक पेपर डिस्क को एक दूसरे से समान दूरी पर, किनारों और डिश के केंद्र से (आप विशेष उपकरणों और डिस्पेंसर का उपयोग भी कर सकते हैं) बीज की सतह पर रखा जाता है। सीडेड कप को थर्मोस्टेट में अध्ययन किए गए बैक्टीरिया के विकास के लिए इष्टतम तापमान पर रखा जाता है। यदि बैक्टीरिया इस एंटीबायोटिक के प्रति संवेदनशील होते हैं, तो डिस्क के चारों ओर एक विकास अवरोध क्षेत्र बनता है। विकास अवरोध के क्षेत्र का व्यास इस एंटीबायोटिक के लिए अध्ययन किए गए सूक्ष्मजीव की संवेदनशीलता की डिग्री से मेल खाता है। अंतिम परिणाम का मूल्यांकन विशेष तालिकाओं के अनुसार किया जाता है, जो मानक संस्कृतियों, संवेदनशील, प्रतिरोधी और मध्यम प्रतिरोधी के विकास निषेध के क्षेत्रों के व्यास को इंगित करते हैं।

डिस्क विधि पॉलीपेप्टाइड एंटीबायोटिक दवाओं के लिए सूक्ष्मजीवों की संवेदनशीलता को निर्धारित करने के लिए विश्वसनीय डेटा प्रदान नहीं करती है जो खराब रूप से अगर (उदाहरण के लिए, पॉलीमीक्सिन, रिस्टोमाइसिन) में फैलती हैं। साथ ही, यह विधि एंटीबायोटिक की न्यूनतम निरोधात्मक एकाग्रता को निर्धारित करने की अनुमति नहीं देती है।