MU 2.1.4.1057-01. 2.1.4. Pitka voda i vodosnabdijevanje naseljenih mjesta. Organizacija interne kontrole kvaliteta sanitarnih i mikrobioloških studija vode. Smjernice
1 područje upotrebe
2. Regulatorne reference
3. Termini i definicije
4. Opće odredbe za organizaciju interne kontrole kvaliteta sanitarne i mikrobiološke studije vode
5. Kontrola temperature inkubacije i skladištenja
5.1. Procedura za kontrolu temperature u termostatima
5.2. Postupak kontrole temperature u frižiderima
6. Kontrola kvaliteta sterilizacije i dezinfekcije
6.1. Procedura kontrole za parne i suhim vazdušnim režimima sterilizacije
6.1.1. Kontrola hemijskih ispitivanja
6.1.2. Termička kontrola
6.1.3. biološka kontrola
6.2. Procedura kontrole mikroba zraka
6.3. Procedura za ispitivanje mikrobne kontaminacije površina
6.4. Procjena djelotvornosti ultraljubičastog germicidnog zračenja
6.5. Postupak za provjeru sterilnosti filterskih jedinica
6.6. Procedura kontaminacije bočice sa uzorkom
7. Kontrola kvaliteta destilovane vode
8. Zahtjevi za pripremu laboratorijskog staklenog posuđa
9. Pravila za pripremu serijskih razblaženja
10. Postupak za održavanje referentnih bakterijskih kultura
10.1. Opće odredbe
10.2. Održavanje referentnih bakterijskih kultura bez stvaranja zalihe dugoročne referentne kulture
10.2.1. Oporavak liofilizirane referentne kulture
10.2.2. Skupljanje radne kulture
10.2.3. Popunjavanje zaliha radne kulture
10.2.4. Priprema kulture za namjeravanu upotrebu u testu
10.3. Optimalno upravljanje referentnim kulturama
10.3.1. Oporavak i kontrola liofilizirane kulture
10.3.2. Uspostavljanje referentnih zaliha usjeva
10.3.3. Skupljanje radne kulture
10.3.4. Priprema kulture za predviđenu upotrebu
10.4. Kontrola referentnih bakterijskih kultura
10.4.1. Procjena stepena disocijacije kulture E. coli. M17-02
10.4.2. Kontrola svojstava vrsta E.coli M17-02 i E.coli K12 + F Str-r
+ 10.4.3. Testiranje osetljivosti E. coli K12 F Str-r na fag
+ 10.4.4. Provjera kulture E. coli K12 F Str-r na kontaminaciju fagom
10.4.5. Kontrola vrsta Pseudomonas aeruginosa i Pseudomonas fluorescens
10.5. Uzgoj, skladištenje i kontrola referentnih kultura bakteriofaga
10.5.1. Oporavak liofilizirane kulture
10.5.2. Uspostaviti zalihe referentne kulture faga i kultura za predviđenu upotrebu
10.5.3. Određivanje titra faga
11. Kontrola medija
11.1. Provjera dokumentacije i vizuelni pregled medija kulture
11.2. Kontrola uslova i perioda skladištenja medija za kulturu
11.3. Kontrola medija kulture tokom pripreme
11.3.1. Procjena izgleda gotove sredine
11.3.2. pH merenje
11.3.3. Definicija steriliteta
11.4. Kontrola bioloških svojstava medija za uzgoj
11.4.1. Kontrola kvaliteta
11.4.2. kvantitativna kontrola
11.4.2.1. Pripremna faza
11.4.2.2. Metode sjetve
11.4.2.3. Definicija indikatora "osjetljivosti" i "stope rasta"
11.4.2.4. Procjena diferencirajućih svojstava Endo medija i njegovih analoga
11.4.2.5. Određivanje procenta obnovljivosti (% klijavosti)
11.4.2.6. Procjena indeksa inhibicije
11.4.3. Preporuke za komparativnu evaluaciju efikasnosti podloga za kulturu korišćenjem filter materijala
11.4.3.1. Pripremna faza
11.4.3.2. Sjetva membranskom filtracijom
11.4.3.3. Metodologija komparativnih studija
11.5. Kontrola u fazi upotrebe medija kulture
11.5.1. Kontrola temperature vodenih kupki dizajniranih da održavaju guste hranjive medije u rastopljenom stanju
11.5.2. Kontrola vremena zadržavanja hranljive podloge u rastopljenom stanju
11.5.3. Postavljanje pozitivnih i negativnih kontrola
11.6. Karakteristike rasta većeg broja medija domaće proizvodnje koji se koriste u sanitarnoj i bakteriološkoj analizi vode
12. Praćenje efikasnosti filter medija
12.1. Opće odredbe
12.2. Pripremna faza
12.3. Istraživačka metodologija
12.3.1. Sjetva membranskom filtracijom
12.3.2. Setva direktnom površinskom metodom
12.3.3. Izračunavanje "Procenta nadoknadivosti" i evaluacija rezultata
12.3.4. Preporuke za uporednu evaluaciju efikasnosti različitih filterskih medija
13. Osobine postavljanja testova u fazi identifikacije
13.1. Definicija gram-pripadnosti
13.2. Postavljanje oksidaznog testa
13.3. Definicija fermentacije ugljikohidrata
Bibliografija
Prilog 1. Struktura interne kontrole kvaliteta po objektima kontrole
Prilog 2. Struktura organizacije interne kontrole kvaliteta u laboratoriji
Aneks 3. List za kontrolu temperature
Dodatak 4
Prilog 5. Uzorak obrasca za evidentiranje rezultata kontrole kontaminacije vazduha
Dodatak 6
Aneks 7.2. Šema vođenja kultura testnih mikroorganizama (najbolja opcija)
Aneks 8.1.
Aneks 8.2. Protokol za kvantitativnu kontrolu medija kulture
Prilog 9. Protokol za kontrolu filter materijala
Prilog 10. Procjena značajnosti razlike srednjih vrijednosti pomoću Student-Fisher testa
Prilog 11. Spisak napredne opreme za sanitarnu i mikrobiološku analizu vode koja poboljšava kvalitet rezultata analize
Aneks 12 Test na ostatke inhibitora na laboratorijskom staklenom posuđu (Aneks ISO 9998:1991 (E))

Ruska Federacija MU (Smjernice)

MU 2.1.4.2899-11 Organizacija interne kontrole kvaliteta sanitarnih i mikrobioloških studija vode. Promjena 1 u MU 2.1.4.1057-01

ODOBRI

Šef Federalne službe za nadzor zaštite prava potrošača i dobrobiti ljudi, glavni državni sanitarni doktor Ruske Federacije G.G. Oniščenko 12. jula 2011.

Napravite sljedeće promjene u MU 2.1.4.1057-01:

• naziv tabele „Protokol za kontrolu membranskih filtera” zameniti sa „Protokol za kontrolu filter materijala”, kao i tekst njene fusnote na „*Popuniti prilikom upoređivanja filter materijala različitih serija od jedne proizvođača ili filtera različitih proizvođača";
• tab. 7 navesti u tekstu:

"7. Određivanje % zadržavanja FM

23. Stav prvi "Procjena značajnosti razlike u prosječnim vrijednostima pomoću Student-Fisher testa" mijenja se: "Značaj razlike u prosječnim vrijednostima broja kolonija uzgojenih na kontrolni i ispitni medij/filterski materijal se procjenjuje korištenjem Studentovog t-testa za vjerovatnoću od 95%".

24. U tabeli „Popis napredne opreme za provođenje sanitarne i mikrobiološke analize vode koja poboljšava kvalitet rezultata analize“ tekst reda 3 u drugom stupcu „Naziv opreme“ počinje riječima „Savremeni nivo“. materijali za filtriranje, karakterizirani sa:" i dalje u tekstu.

Smjernice MU 2.1.4.2899-11
"Organizacija interne kontrole kvaliteta sanitarnih i mikrobioloških studija vode"
Promjena 1 u MU 2.1.4.1057-01
(odobrena od strane Federalne službe za nadzor zaštite prava potrošača i blagostanja ljudi 12. jula 2011.)

Napravite sljedeće promjene u MU 2.1.4.1057-01:

1. U odjeljku 4 "Opće odredbe za organizaciju interne kontrole kvaliteta sanitarnih i mikrobioloških studija vode":

Tačka 4. stav „Glavni pravci organizacije interne kontrole kvaliteta:“ menja se i glasi:

"4. Kontrola kvaliteta filter materijala (ili dalje - filtera).".

U pasusu koji počinje riječima "Opis postupaka za praćenje usklađenosti sa zahtjevima za uslove analize..." sintagmu "i membranskih filtera" zamijeniti riječima "i filterskih materijala".

2. U stavu 6.5 "Postupak za praćenje sterilnosti filterskih instalacija":

Stav treći pododjeljka "Pripremna faza" mijenja se i glasi:

"-sterilni filter materijal za mikrobiološke svrhe (membranski filteri, analitičke trake membrane i drugi filterski materijali s promjerom pora ne većim od 0,45 µm i veličinom diska od 35 ili 47 mm) prethodno ispitane serije (odjeljak 12)." ;

U prvom stavu pododjeljka „Način kontrole“ iza riječi „Upotrebom sterilne pincete postaviti...“ izraz „membranski filter“ zamijeniti sa „filterski materijal“;

Stav treći pododeljka „Način kontrole navodi se u redakciji:

"Vakum se uključuje i sadržaj lijevka se filtrira. Vakum se isključuje, filterski lijevak se uklanja i filterski materijal se sterilnom pincetom prenosi sa podloge u srednju posudu. Između filterskog materijala i površine agara. Ploče sa inokulacijama se okreću i inkubiraju u termostatu na (37 +/- 1)°C (24 +/- 2) sata.".

3. U stavu 6.6 "Procedura za kontrolu kontaminacije bočica sa uzorkom":

Stav peti pododjeljka "Pripremna faza" mijenja se i glasi:

"- sterilni filtarski materijal za mikrobiološke svrhe (membranski filteri, analitičke trake membrane i drugi filterski materijali s promjerom pora ne većim od 0,45 µm i veličinom diska od 35 ili 47 mm) prethodno ispitane serije (odjeljak 12.)." ;

U sedmom stavu pododjeljka „Način kontrole“ iza riječi „100 ml sterilne vode iz slavine (negativna kontrola), pa kroz još jednu...“ sintagmu „membranski filter“ zamijeniti sa „filterski materijal“.

4. Četvrti stav odjeljka 9 "Pravila za pripremu serijskih razrjeđenja" mijenja se kako slijedi:

"- za postavljanje studija koje zahtijevaju kvantitativni obračun korištenih modelnih mikroorganizama, na primjer, u kvantitativnoj ocjeni kvaliteta hranljivih podloga, filter materijala itd."

5. Tačka 1 jedanaestog stava klauzule 10.1 "Opšte odredbe" mijenja se kako slijedi:

"1. E. coli M17-02 kao pozitivna kontrola za biohemijske testove i negativna kontrola za reagens oksidaze; za kontrolu filter materijala; za kontrolu kvaliteta medija kulture biološkim indikatorima.".

6. Naslov klauzule 11.4.3 mijenja se kako slijedi:

"11.4.3. Preporuke za uporednu evaluaciju efikasnosti hranljivih podloga korišćenjem filterskih materijala."

Prvi stav treba izmijeniti kako slijedi:

„Glavna metoda koncentracije u sanitarnim i bakteriološkim studijama vode je filtracija kroz filterski materijal. Unošenje dodatnog faktora, filterskog materijala, u sistem „mikroorganizam-hranljivi medij“ može uticati na brzinu rasta mikroorganizama i biološki svojstva medija.";

U drugom stavu, iza riječi „obezbeđivanje njihovog sastava optimalnih uslova za rast mikroorganizama pri upotrebi...“, sintagmu „membranski filteri“ treba zameniti „filterskim materijalima“;

U četvrtom stavu, iza riječi "ocjena kvaliteta medija u kombinaciji sa onima korištenim u analizi..." izraz "membranski filteri" zamijeniti sa "filterskim materijalima".

8. U tački 11.4.3.1 "Pripremna faza" pododjeljci "Membranski filteri" i "Hranljivi mediji" mijenjaju se kako slijedi:

„Filter materijali

Postotak ekstrakcije korištenih filterskih materijala trebao bi biti najmanje 80% na potpuno neselektivnom mediju. Medij za filter mora biti sterilan.

Hranljivi mediji

Hranjive podloge za setvu filter materijala se ne suše, ali ne bi trebalo da bude vidljiva vlaga na površini podloge koja se sipa u posude.

9. U stavu 11.4.3.2 "Cijepljenje membranskom filtracijom":

U drugom stavu, iza riječi „Postaviti sterilnom pincetom...” izraz „membranski filter” zamijeniti sa „filterskim materijalom”;

“Vakum se isključuje, lijevak filtera se uklanja i filterski materijal se sterilnom pincetom prenosi iz baze u hranljivi medij. Između filter materijala i površine agara ne bi trebalo biti mjehurića. u roku od 18 - 24 sata. ".

10. U stavu 11.4.3.3 "Metodologija komparativnih studija":

Drugi i treći stav mijenjaju se i glasi:

"U drugoj fazi, odabrana podloga se ocjenjuje u smislu "postotka obnovljivosti" korištenjem dvije metode sjetve: direktne (prema tački 11.4.2.5) i metode pomoću filter materijala. Za svaku proučavanu podlogu i opciju sjetve, na potrebno je izvršiti najmanje 5 ponavljanja Kontrole su direktna inokulacija (kontrola N 1) i inokulacija metodom pomoću filter materijala (kontrola N 2) na neselektivnom mediju.

Ako je potrebno, mogu se sprovesti paralelne dodatne studije sa prirodnim inokulumom vode. Inokulum prirodne vode sa ili bez test mikroorganizama inokulira se metodom korištenjem filterskih materijala na ispitivanoj selektivnoj podlozi.";

Stav drugi pododjeljka "Obračun rezultata" mijenja se i glasi:

"Prema odjeljku 12, kvalitet filterskih materijala korištenih u eksperimentu potvrđuje se izračunavanjem "postotnog povrata" materijala za filtere iz prosječnih rezultata kontrolnih inokulacija (direktna br. 1 i membrana br. 2) na ne- selektivni agar."

11. Naslov odjeljka 12 navodi se kako slijedi:

"12. Praćenje efikasnosti filter medija".

12. Stav 12.1 "Opšte odredbe" mijenja se kako slijedi:

„U praksi laboratorija koje vrše sanitarnu i bakteriološku kontrolu vode koriste se filter materijali prečnika 47 ili 35 mm i prosječne veličine pora od 0,45 mikrona.

Filterski materijali se koriste:

U analizi na obične i termotolerantne koliformne mikroorganizme;

U testu za spore klostridija koje redukuju sulfite.

Kvalitet korištenog filterskog medija može imati značajan utjecaj na rezultate analize. Istovremeno, kvaliteta filter materijala jednog proizvođača može varirati od serije do serije. Prilikom prijema svake nove serije filtera, kao i kada je potrebno doneti odluku o mogućnosti produženja roka trajanja, prati se efikasnost filter materijala.

Ako postoji više serija filtera u ulaznoj seriji, kontrola se vrši za svaku seriju.

Filter materijali odobreni za analizu koriste se jednokratno. Ponovna upotreba filter materijala je zabranjena.

Princip metode

Učinkovitost filter materijala utvrđuje se poređenjem broja kolonija mikroorganizama uzgojenih na kompletnoj hranjivoj podlozi kao rezultat direktne površinske inokulacije suspenzije kontrolne kulture mikroorganizama i broja kolonija uzgojenih na istom mediju kao rezultat inokulacije pomoću membranska filtracija.

Procjena učinkovitosti materijala za filtriranje vrši se prema indikatoru "postotak iskorištenja". Filterski materijali smatraju se prikladnim ako najmanje 80% broja kolonija dobivenih direktnim sjemenjem raste kada se inokulira membranskom filtracijom.

Odabir filtera za kontrolnu studiju treba da se vrši „slijepom“ metodom, tj. filteri za kontrolu moraju biti odabrani nasumično iz različitih pakovanja analizirane serije.“.

13. U stavu 12.2 "Pripremna faza" pododjeljak "Membranski filteri" mijenja se i glasi:

„Filterski materijal

Filterski materijal koji se ispituje mora biti sterilan."

14. Prvi stav klauzule 12.3 "Metodologija istraživanja" mijenja se kako slijedi:

„Paralelne inokulacije suspenzije čiste kulture ispitivanog mikroorganizma provode se metodom membranske filtracije kroz proučavani filterski materijal i direktnom (površinskom) metodom.“.

15. U paragrafu 12.3.1 "Cijepljenje membranskom filtracijom":

U drugom stavu, iza riječi „Uz pomoć sterilne pincete, postaviti...“ sintagmu „membranski filter“ zamijeniti sa „filterski materijal“;

U trećem pasusu, iza riječi „Vakum se gasi, uklanja se lijevak filtera i sterilnom pincetom...“ navodi se sljedeći tekst: „...filterski materijal se prenosi na ploču sa hranljivim medijem. (klauzula 11.2). Između filter materijala i površine agara ne bi trebalo biti mjehurića zraka. Usjevi se inkubiraju u termostatu na (37 +/- 1)°C 18 - 24 sata.".

16. Tačka 12.3.3 "Izračunavanje "procenta oporavka" i procjena rezultata" mijenja se kako slijedi:

„Da bi se procijenio proučavani filterski materijal, procenat ekstrakcije (retenzije) filterskog materijala izračunava se prema formuli:

I% - postotak povrata (zadržavanja);

SChmf - aritmetička sredina broja kolonija uzgojenih na filterima kada su zasijane metodom membranske filtracije;

SCH - aritmetička sredina broja kolonija uzgojenih na čašama s direktnom površinskom sjetvom.

Smatra se da odgovarajući filterski materijali imaju postotak ekstrakcije (retenzije)*.

U slučaju da se dobije manje od 80% povratnosti ispitivanog mikroorganizma, studije treba ponoviti sa dvostrukim brojem ponavljanja (najmanje 10), s ukupnim brojem za kontrolnu direktnu inokulaciju od najmanje 400 CFU.

17. Naslov klauzule 12.3.4 mijenja se kako slijedi:

"12.3.4. Preporuke za uporednu evaluaciju efikasnosti različitih filterskih medija."

U prvom stavu, iza riječi "isporučuje jedan proizvođač, kao i ..." sintagmu "membranski filteri" zamijeniti riječima "filter materijali";

Četvrti stav mijenja se i glasi:

"- sjetva metodom upotrebom filter materijala sa svakom vrstom (serijom) filtera prema tački 12.3.1;";

U sedmom stavu, iza riječi "provedeno procjenom pouzdanosti razlike u prosječnim vrijednostima broja kolonija uzgojenih na ..." izraz "membranski filteri" zamijeniti riječima "filterski materijali";

Stav drugi pododjeljka "Ocjena rezultata" mijenja se i glasi:

"Kada uspoređujete filterske materijale različitih marki, tipova ili različitih proizvođača, odaberite materijale za filtere čiji prosječan broj kolonija premašuje onaj kod drugih filtera sa 95% pouzdanosti."

19. U drugom stavu tačke 13.2 "Izvođenje oksidaznog testa" iza riječi "Treba imati na umu da prilikom izvođenja oksidaznog testa primjenom ..." izraz "membranski filter" treba zamijeniti sa " filter materijala".

20. U šemi "Struktura interne kontrole kvaliteta po objektima kontrole", prikazanoj u Prilogu 1., tekst u ćeliji "Membranski filteri. Kontrola efikasnosti" navodi se u tekstu: "Filter materijal. Kontrola efikasnosti".

21. U tabeli „Struktura organizacije interne kontrole kvaliteta u laboratoriji“ Priloga 2, tekst u drugoj koloni „Obim kontrole“ reda 2.5 navodi se u tekstu: „Kontrola filter materijala“ .

22. U Dodatku 9:

Promijenite naziv tabele "Protokol za kontrolu membranskih filtera" u

"Protokol za kontrolu filter materijala",

a također i tekst fusnote uz njega treba zamijeniti sa

"* Popunjava se prilikom poređenja materijala filtera različitih serija istog proizvođača ili filtera različitih proizvođača.";

Tabela 7 navesti u izdanju;

"7. Određivanje % zadržavanja FM

______________________________

* Popunjava se prilikom poređenja materijala filtera različitih serija istog proizvođača ili filtera različitih proizvođača.".

23. Stavak prvi Priloga 10. „Procjena pouzdanosti razlike srednjih vrijednosti pomoću Student-Fisher testa“ mijenja se i glasi:

"Značajnost razlike u prosječnim vrijednostima broja kolonija uzgojenih na kontrolnom i ispitnom mediju/filter materijalu se procjenjuje korištenjem Studentovog t-testa za vjerovatnoću od 95%.".

24. U tabeli „Spisak napredne opreme za obavljanje sanitarno-mikrobiološke analize vode koja poboljšava kvalitet rezultata analize“ Priloga 11, tekst u drugom stupcu „Naziv opreme“ reda 3 počinje riječima „ Moderni materijali za filtriranje, karakterizirani sa:" i dalje u tekstu.

Smjernice MU 2.1.4.2899-11 "Organizacija interne kontrole kvaliteta sanitarnih i mikrobioloških studija vode" Izmjena 1 MU 2.1.4.1057-01 (odobrena od strane Federalne službe za nadzor zaštite prava potrošača i dobrobiti ljudi 12. jula 2011. )

Datum uvođenja: od trenutka odobrenja

Pregled dokumenta

Ispravljene su smjernice o organizaciji interne kontrole kvaliteta sanitarnih i mikrobioloških studija vode. Namijenjeni su laboratorijama akreditovanim za obavljanje navedenih poslova. Smjernice se koriste kako bi se osigurala sanitarno-epidemiološka i industrijska kontrola kvaliteta vode: pitke, vodosnabdijevanja u domaćinstvu, rekreacijskih vodnih tijela, sporta itd.

Promjene se odnose na kontrolu kvaliteta sterilizacije i dezinfekcije, pravila za pripremu serijskih razrjeđenja i postupak održavanja referentnih bakterijskih kultura. Takođe je preciziran postupak praćenja hranljivih podloga i efikasnosti filter materijala, kao i specifičnosti postavljanja testova u fazi identifikacije.

Promjene stupaju na snagu nakon odobrenja.