यह अध्याय क्लिनिकल उपयोग के लिए लक्षित मोनोक्लोनल एंटीबॉडी तैयारी (बाद में एमएबी के रूप में संदर्भित) की अवांछित इम्यूनोजेनेसिटी की अभिव्यक्तियों से संबंधित मुद्दों पर चर्चा करता है। इनमें mAbs की इम्यूनोजेनेसिटी को प्रभावित करने वाले कारक, इम्यूनोजेनेसिटी के क्लिनिकल निहितार्थ, विश्लेषणात्मक मुद्दे, मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के लिए एंटीबॉडी को बेअसर करने का मूल्यांकन और mAb इम्यूनोजेनेसिटी के विश्लेषण के लिए जोखिम-आधारित दृष्टिकोण के मुद्दे शामिल हैं।

1 परिचय

जैविक दवाओं वाले रोगियों के उपचार में अवांछनीय प्रतिरक्षण क्षमता का प्रकट होना एक महत्वपूर्ण समस्या हो सकती है। बायोटेक्नोलॉजी का उपयोग करके प्राप्त प्रोटीन के आधार पर औषधीय उत्पादों की प्रतिरक्षात्मकता का आकलन करने की सिफारिशें इन नियमों के अध्याय 11 में प्रस्तुत की गई हैं, जो माब औषधीय उत्पादों पर भी लागू होती हैं। हालांकि mAbs की प्रतिरक्षाजनकता के कई पहलू अन्य चिकित्सीय प्रोटीनों से भिन्न नहीं होते हैं, उनमें से कुछ पर करीब से विचार करने की आवश्यकता होती है। एंटीबॉडी के मोनोक्लोनल एंटीबॉडी द्वारा प्रेरण जो अंतर्जात एंटीबॉडी को क्रॉस-रिएक्ट और बेअसर कर देगा (जैसा कि मामला है, उदाहरण के लिए, एरिथ्रोपोइटिन के साथ) अपेक्षित नहीं है, क्योंकि वे प्रतिस्थापन चिकित्सा के रूप में उपयोग नहीं किए जाते हैं।

बहुधा, एमएबी दवाओं का उपयोग चिकित्सीय या नैदानिक ​​एजेंटों के रूप में किया जाता है, जब कोई उपचारात्मक या नैदानिक ​​विकल्प होता है। हालांकि, इस अध्याय में चर्चा की गई इम्यूनोजेनेसिटी के कुछ विशिष्ट पहलू mAb की तैयारी या उपन्यास mAb संशोधित तैयारी (जैसे, फैब टुकड़े, scFv एकल-फंसे हुए Fv टुकड़े, नैनोबॉडी, मिनीएंटीबॉडी) के लिए अनन्य या प्रमुख हैं। माब की तैयारी जैविक दवाओं के एक महत्वपूर्ण और बहुत महत्वपूर्ण उपसमूह का प्रतिनिधित्व करती है।

रोगों के उपचार में mAb के उपयोग के संकेतों की सीमा बहुत विस्तृत है। कई एमएबी तैयारियों का उपयोग अवांछनीय इम्यूनोजेनेसिटी की अभिव्यक्तियों के साथ होता है, कुछ मामलों में यह अपर्याप्त नैदानिक ​​​​प्रतिक्रिया या दुर्लभ गंभीर प्रतिकूल प्रतिक्रियाओं के विकास की ओर जाता है जिसके लिए नैदानिक ​​​​हस्तक्षेप की आवश्यकता होती है। mAbs के उपयोग के लिए विभिन्न संकेतों के लिए विकसित और पंजीकृत दवाओं की एक विस्तृत श्रृंखला सभी स्थितियों में लागू होने वाली निजी सिफारिशों की तैयारी को रोकती है।

2। घेरा

सामान्य सिद्धांत चिकित्सीय या इन विट्रो डायग्नोस्टिक mAb की शुरुआत के बाद प्राप्तकर्ताओं में एक अवांछनीय प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के व्यवस्थित मूल्यांकन के विकास और आचरण से संबंधित हैं। आवश्यकताएं MAb की तैयारी, उनके डेरिवेटिव (जैसे फैब टुकड़े, ScFv, नैनोएंटीबॉडी, मिनीएंटीबॉडी) और MAb घटकों वाले उत्पादों (जैसे संयुग्म, Fc-लिंक्ड फ्यूजन प्रोटीन) पर लागू होती हैं।

यह अध्याय मुख्य गुणवत्ता पहलुओं और नैदानिक ​​​​अभिव्यक्तियों पर चर्चा करता है जो उपयोग के लिए एक विशिष्ट निर्दिष्ट संकेत के साथ रोगियों में एक विशेष एमएबी दवा के उपयोग के लिए एक अवांछनीय प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया विकसित करने के जोखिम की पहचान करने और मूल्यांकन करने की समस्याओं को पर्याप्त रूप से संबोधित करने के लिए महत्वपूर्ण हैं। इस अध्याय के प्रावधान विकास के अंतिम चरण में उत्पादों पर लागू होते हैं, विशेष रूप से पंजीकरण के लिए आवेदन के चरण में, लेकिन कई प्रावधान एमएबी उत्पादों के विकास के पहले चरणों पर लागू होते हैं।

3. सामान्य प्रावधान

इस अध्याय को इन नियमों के अन्य अध्यायों और संघ के कानून में शामिल अन्य प्रासंगिक अधिनियमों के संयोजन में माना जाना चाहिए।

4. मोनोक्लोनल एंटीबॉडी तैयारियों की प्रतिरक्षाजनकता का आकलन करने में उपयोग की जाने वाली स्क्रीनिंग और पुष्टिकरण अध्ययनों की समस्याएं

4.1। एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए विश्लेषणात्मक तरीके

माब तैयार करने के लिए एंटीबॉडी की सामग्री निर्धारित करने के लिए, इम्यूनोलॉजिकल परख विधियों के किसी भी प्रारूप का उपयोग किया जा सकता है। हालांकि, एलिसा या रेडियोइम्यूनोप्रूवमेंट जैसे सरल तरीकों का उपयोग करने वाली परख विधियां mAbs के लिए अनुपयुक्त हैं जब तक कि उन्हें इस कठिनाई को दूर करने के लिए अनुकूलित नहीं किया जाता है। इस संबंध में, एमएबी की परिभाषा के लिए अन्य दृष्टिकोणों को विकसित करना आवश्यक है।

सामान्य दृष्टिकोण एक "ब्रिजिंग" प्रारूप का उपयोग करना है, जैसे एलिसा या इलेक्ट्रोकेमिल्यूमिनिसेंस (ईसीएल) के लिए, जिसे एंटी-इम्युनोग्लोबुलिन अभिकर्मकों की आवश्यकता नहीं होती है और इसलिए एमएबीएस के अध्ययन में सीधे उपयोग किया जा सकता है। कुछ मामलों में, यह विधि अन्य इम्यूनोलॉजिकल विधियों की तुलना में कम संवेदनशील हो सकती है और उपयुक्त परख विधि बनाने के लिए महत्वपूर्ण विकास प्रयासों की आवश्यकता होती है। यह IgG4 एंटीबॉडी का भी प्रभावी ढंग से पता नहीं लगाता है जो कुछ मामलों में बनते हैं।

एक अन्य दृष्टिकोण सतह प्लास्मोन अनुनाद (एसपीआर) विधि का उपयोग करना है। एंटी-एमएबी एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए इसे एंटी-इम्युनोग्लोबुलिन अभिकर्मकों के उपयोग की आवश्यकता नहीं होती है। यह विधि वास्तविक समय है, इसलिए यह तेज़ है और तेज़ी से विघटित होने वाले एंटीबॉडी का पता लगाने की अनुमति देता है जो अन्य तरीकों से छूट सकते हैं।

चूंकि पीपीआर केवल लेपित चिप में प्रोटीन के बंधन का पता लगाता है, इसलिए यह पुष्टि की जानी चाहिए कि संकेत एंटीबॉडी से आता है। यह उच्च आत्मीयता एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए अन्य तरीकों की तुलना में कम संवेदनशील हो सकता है और एक स्वचालित नमूना तैयार करने की प्रणाली के अभाव में, खराब थ्रूपुट (कम उपज) हो सकता है। नमूने (आमतौर पर सीरम या प्लाज्मा) में ऐसे पदार्थ हो सकते हैं जो विश्लेषण के परिणामों को विकृत कर सकते हैं, अर्थात, एक मैट्रिक्स प्रभाव पैदा करते हैं, जिसमें गलत सकारात्मक या गलत नकारात्मक परिणाम प्राप्त होते हैं और / या एंटीबॉडी स्तरों का गलत मूल्यांकन होता है।

4.2। विश्लेषण के लिए नमूनों में एक मोनोक्लोनल एंटीबॉडी तैयारी की उपस्थिति

अक्षुण्ण mAb की तैयारी अपेक्षाकृत लंबी होती है और लंबे समय तक रक्तप्रवाह में बनी रहती है। यहां तक ​​कि उनके टुकड़े भी कई दिनों तक खून में रह सकते हैं। यह एंटीबॉडी का पता लगाने के उद्देश्य से एकत्र किए गए नमूनों में एमएबी तैयारी की उपस्थिति के कारण प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का पता लगाने में काफी जटिल हो सकता है। यह आमतौर पर प्रासंगिक (प्रभावित) नमूनों में एंटीबॉडी के स्तर के एक कृत्रिम रूप से कम अनुमान के परिणामस्वरूप होता है और इसे इतना स्पष्ट किया जा सकता है कि गलत नकारात्मक परिणाम सामने आ सकें। इन कठिनाइयों को दूर करने के लिए कई दृष्टिकोण प्रस्तावित किए गए हैं।

पहला तरीका नमूना लेने में देरी करना है जब तक कि एमएबी की तैयारी उन स्तरों तक कम नहीं हो जाती जो समस्याग्रस्त नहीं हैं। यह दृष्टिकोण कुछ एमएबी की तैयारी की समस्या को हल करता है, लेकिन सावधानीपूर्वक अध्ययन की आवश्यकता होती है, क्योंकि यह नमूना लेने के समय तक प्रेरित एंटीबॉडी के स्तर को कम करने के लिए प्रेरित एंटीबॉडी के स्तर को कम करने के कारण इम्यूनोजेनेसिटी का पता नहीं लगा सकता है।

एक अन्य दृष्टिकोण एक ऐसी कार्यप्रणाली का उपयोग करना है जो निर्दिष्ट समस्या से कम से कम प्रभावित हो। मानक एलिसा बाइंडर्स सहित अन्य तरीकों की तुलना में ईसीएल-आधारित विधियां नमूनों में दवा के अवशेषों से बहुत कम प्रभावित होती हैं। समस्या को हल करने के लिए व्यापक रूप से वर्णित तकनीक को शामिल करना है अध्ययन करने के लिए प्रयोग के उद्देश्य और पद्धति का वर्णन करने वाला दस्तावेज़, और इसमें किए गए किसी भी संशोधन को शामिल करना।पढ़ाई के लिए बनाई गई योजनाएंटीबॉडी का पता लगाने से पहले सभी कॉम्प्लेक्स को नष्ट करने के लिए एंटीजन-एंटीबॉडी कॉम्प्लेक्स के पृथक्करण का एक प्रारंभिक चरण।

तरीकों के विभिन्न संस्करणों का वर्णन किया गया है, जिसमें एसिड इन्क्यूबेशन शामिल है, कुछ मामलों में दवा के आत्मीयता पृथक्करण के साथ, लेकिन उनके परिणामों का सावधानी से विश्लेषण किया जाना चाहिए, क्योंकि अतिरिक्त कदमों से विधि की अमान्यता हो सकती है। तीसरे दृष्टिकोण में, अवशिष्ट दवा सामग्री प्राप्त करने के लिए नमूने को पतला किया जा सकता है जो विधि को प्रभावित नहीं करता है। इस दृष्टिकोण के लिए बहुत सावधानी की आवश्यकता होती है क्योंकि यह इस तकनीक का उपयोग करके पतला नमूनों में एंटीबॉडी का पता लगाने में संवेदनशीलता की कमी के कारण इम्यूनोजेनेसिटी का झूठा नकारात्मक निष्कर्ष निकाल सकता है। कुछ मामलों में, नमूने में एमएबी की अवशिष्ट सामग्री मात्रात्मक निर्धारण के अधीन होनी चाहिए। कई मामलों में, सभी तीन दृष्टिकोणों के संयोजन का उपयोग एंटीमोनोक्लोनल एंटीबॉडी का पता लगाने, सत्यापन और परीक्षण में ड्रग कन्फ़्यूज़न को कम करने के लिए किया जाता है।

4.3। पुष्टिकारक परीक्षण

पुष्टिकरण परख स्क्रीनिंग परख के समान समस्याओं के अधीन हैं। उपयोग की गई स्क्रीनिंग विधि को ध्यान में रखते हुए सही पुष्टिकरण मात्रा विधि का चयन किया जाना चाहिए। प्रोटीन ए और प्रोटीन जी का उपयोग पुष्टिकरण विधियों में यह पुष्टि करने के लिए किया जा सकता है कि एक सकारात्मक परिणाम वास्तव में इम्युनोग्लोबुलिन के कारण है, लेकिन इस उद्देश्य के लिए अन्य तरीकों का उपयोग किया जा सकता है।

4.4। नियंत्रण नमूने

माब इम्यूनोजेनेसिटी अध्ययन में एक प्रमुख समस्या सेरा का उत्पादन है जो एक सकारात्मक नियंत्रण के रूप में काम करेगा। परख की संवेदनशीलता और विशिष्टता की निगरानी के लिए एक चयनित सकारात्मक नियंत्रण सीरम या शुद्ध एंटीबॉडी की आवश्यकता होती है। यदि मानव सीरम प्राप्त नहीं किया जा सकता है (उदाहरण के लिए, दवा के विकास के शुरुआती चरणों में), तो पशु सीरम का उपयोग करने का एकमात्र तरीका है।

इन उद्देश्यों के लिए पशु प्रजातियों के चुनाव के महत्वपूर्ण निहितार्थ हैं। गैर-मानव प्राइमेट्स मानव और मानवकृत mAbs के लिए एक स्पष्ट एंटी-सीडीआर और एंटी-स्कैफोल्ड प्रतिक्रिया विकसित करते हैं जो मानव प्रतिक्रिया की बहुत बारीकी से नकल कर सकते हैं और एक उपयुक्त सकारात्मक नियंत्रण के रूप में काम कर सकते हैं। जबकि गैर-प्राइमेट मुख्य रूप से mAb के स्थिर क्षेत्रों में एंटीबॉडी का उत्पादन करते हैं, जो मानव प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए विशिष्ट नहीं है। कुछ मामलों में, एंटी-इडियोटाइपिक एंटीसेरा या एमएबी का उपयोग सकारात्मक नियंत्रण के रूप में काम कर सकता है। सही नकारात्मक नियंत्रणों का चयन किया जाना चाहिए। अप्रासंगिक mAbs वाले नमूनों का उपयोग पुष्टिकरण परख की विशिष्टता की पुष्टि के लिए किया जा सकता है।

5. मोनोक्लोनल एंटीबॉडी की दवा द्वारा प्रेरित एंटीबॉडी की बेअसर करने की क्षमता का मूल्यांकन

एमएबी विभिन्न प्रकार के तंत्रों के माध्यम से अपनी कार्रवाई करता है, सरल एंटीजन बाइंडिंग से लेकर, जो स्वयं नैदानिक ​​प्रभाव की मध्यस्थता करता है, एंटीजन बाइंडिंग और एक या एक से अधिक इम्युनोबायोलॉजिकल तंत्रों की मध्यस्थता करता है, जो सामूहिक रूप से समग्र नैदानिक ​​प्रतिक्रिया निर्धारित करते हैं। इसलिए, हालांकि ऐसा लग सकता है कि सरल बंधन एकमात्र तंत्र है जो नैदानिक ​​​​प्रभावकारिता निर्धारित करता है, अन्य प्रभाव भी योगदान दे सकते हैं। कुछ मामलों में, एमएबी के कई कार्य अतिरिक्त या सहक्रियात्मक रूप से कार्य करते हैं, जिससे एक संयुक्त संयुक्त नैदानिक ​​प्रभाव होता है, जो कुछ मामलों में एमएबी अपने नैदानिक ​​प्रभाव को कैसे स्थापित करता है, यह स्थापित करने के लिए खुद को कठिन प्रयोगात्मक भेदभाव के लिए उधार देता है।

इस संबंध में, अक्षुण्ण mAbs का उपयोग करते समय, सावधानी से यह सुझाव देना आवश्यक है कि दवा के Fc-मध्यस्थता वाले इम्यूनोबायोलॉजिकल प्रभाव नैदानिक ​​​​प्रभावकारिता में योगदान नहीं करते हैं, भले ही साधारण एंटीजन बाइंडिंग को कार्रवाई का मुख्य तंत्र माना जाता है। इस संबंध में, सेल-आधारित क्वांटिटेशन न्यूट्रलाइजेशन निर्धारित करने के लिए फायदेमंद है। ऐसे मामलों में, जैविक और इम्यूनोलॉजिकल क्वांटिफिकेशन विधियों का उपयोग करके, mAbs के जैविक लक्षण वर्णन का पूरी तरह से लक्षण वर्णन करना आवश्यक है। एमएबी के गुणों का तब मूल्यांकन किया जाना चाहिए ताकि उचित तटस्थकरण मात्राकरण रणनीति का चयन किया जा सके। जैविक दवाओं की जैविक गतिविधि को बेअसर करने वाले एंटीबॉडी उनके नैदानिक ​​प्रभाव को कम कर सकते हैं। सभी उत्पादित एंटीबॉडी की तटस्थता क्षमता निर्धारित करना आवश्यक है। ऐसे डेटा की अनुपस्थिति को औचित्य की आवश्यकता है।

अधिकांश जैविक उत्पादों के लिए, एंटीबॉडी की तटस्थता क्षमता को मापने के लिए सबसे उपयुक्त तरीका एक मात्रात्मक जैविक विधि है, जो दवा की जैविक गतिविधि के एंटीबॉडी के तटस्थकरण को निर्धारित करता है। इसी समय, एमएबी की कार्रवाई के नैदानिक ​​​​तरीके की प्रकृति से पता चलता है कि नैदानिक ​​​​प्रभावकारिता में सबसे स्पष्ट कमी एंटीबॉडी द्वारा उत्पन्न होती है जो एमएबी को लक्ष्य के लिए बाध्य करती है।

इस प्रकार, mAbs की निष्क्रिय करने की क्षमता का निर्धारण करने के लिए पसंद के तरीके शास्त्रीय मात्रात्मक जैविक तरीकों के बजाय प्रतिस्पर्धी लिगैंड बाध्यकारी तरीके हैं। यह एमएबी को बायोलॉजिक्स के अन्य वर्गों से इम्यूनोजेनेसिटी का आकलन करने के दृष्टिकोण से अलग करता है।

6. मोनोक्लोनल एंटीबॉडी तैयारियों की प्रतिरक्षण क्षमता का जोखिम प्रबंधन

6.1। जोखिम की पहचान इम्यूनोजेनेसिटी

एमएबी एक जटिल घटना है: ऐसे कई कारक हैं जिन्हें समझना मुश्किल है जो एक चिकित्सीय या नैदानिक ​​मोनोक्लोनल एंटीबॉडी के लिए नैदानिक ​​रूप से महत्वपूर्ण प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की सटीक भविष्यवाणी करना मुश्किल बनाते हैं। शिक्षित टी-सेल एपिटोप्स का पता लगाने के उद्देश्य से इन विट्रो प्रीक्लिनिकल दृष्टिकोण विकसित किए गए हैं, लेकिन उनके पास मनुष्यों में एक दवा की इम्यूनोजेनेसिटी की भविष्यवाणी करने की सीमित क्षमता है। साथ ही, आगे के विकास के लिए उम्मीदवार अणुओं का चयन करने में ऐसी तकनीकें उपयोगी हो सकती हैं। जैसा कि इन विनियमों के अध्याय 11 में कहा गया है, चिकित्सा उपयोग के लिए प्रत्येक नए एमएबी की प्रतिरक्षात्मकता के मानक पहलुओं की जांच करना आवश्यक है, इसके गुणों, प्रस्तावित उपयोग की प्रकृति और उपयोग के संकेत को ध्यान में रखते हुए। भविष्य के अध्ययन के लिए योजना प्रारंभिक नैदानिक ​​अध्ययनों से इम्यूनोजेनेसिटी पर प्रारंभिक डेटा पर आधारित है, जैसे कि बायोएनालिटिकल तकनीकों का प्रदर्शन, पहले से मौजूद एंटीबॉडी का पता लगाना, या अन्य कारक जो इसके उपयोग से प्रेरित एंटी-एमएबी एंटीबॉडी का पता लगा सकते हैं।

नीचे वर्णित जोखिम की पहचान और मूल्यांकन रणनीति के आधार पर, पहचाने गए जोखिमों के स्तर के आधार पर मानक इम्यूनोजेनेसिटी अध्ययन कार्यक्रम को कम किया जा सकता है (विस्तृत औचित्य के साथ) या इसे मजबूत करने की आवश्यकता हो सकती है। सभी मामलों में, आवेदक को उत्पाद के गुणों और इसके प्रस्तावित उपयोग को ध्यान में रखते हुए पूरी तरह से जोखिम की पहचान करनी चाहिए। प्रारंभिक डेटा उपलब्ध डेटा या अन्य समान mAbs पर डेटा की कमी (उदाहरण के लिए, समान अभिव्यक्ति प्रणालियों द्वारा व्यक्त लक्ष्य के समान वर्ग के लिए बाध्यकारी) को ध्यान में रखा जाना चाहिए। यदि mAbs के लिए एंटीबॉडी का पता लगाने या mAbs के एंटीबॉडी के नैदानिक ​​परिणामों (जैसे, mAb अवशिष्ट एकाग्रता, PD पैरामीटर और mAb थेरेपी का प्रभाव) की पहचान करने की पद्धति पर्याप्त संवेदनशील नहीं है, तो जोखिम धारणा को कम करके आंका जा सकता है।

ऐसे मामलों में, एंटी-एमएबी प्रतिक्रिया की गतिशीलता की अधिक सावधानी से निगरानी करने की सलाह दी जाती है, इसे चिकित्सीय परिणामों के साथ सहसंबंधित किया जाता है। एमएबी संरचना विभिन्न एपिटोप्स के खिलाफ एंटीबॉडी का उत्पादन किया जा सकता है, जो एमएबी अणु के विभिन्न भाग हैं, उदाहरण के लिए, चर या स्थिर क्षेत्र।

विदेशी के रूप में विषमलैंगिक (जैसे, कृंतक अनुक्रम या काइमेरिक mAbs) एंटीबॉडी की मान्यता एंटीबॉडी-मध्यस्थता प्रतिरक्षा का मुख्य कारण है, और स्व-एंटीबॉडी उनके किसी भी हिस्से के खिलाफ उत्पादित की जा सकती हैं। मानवीय या पूरी तरह से मानव mAb अनुक्रमों के मामले में जिनमें केवल मानव इम्युनोग्लोबुलिन के अमीनो एसिड अनुक्रम होते हैं, प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया मुख्य रूप से एंटी-इडियोटाइपिक एंटीबॉडी के गठन से प्रकट होती है जो क्षेत्रों के हाइपरवेरिएबल अनुक्रम के लिए विशिष्ट होती है और एंटीजन के लिए बाध्यकारी की पूरकता का निर्धारण करती है। , जो उच्च स्तर की संभाव्यता के साथ नैदानिक ​​​​प्रभावकारिता और mAb थेरेपी की प्रतिक्रिया में कमी ला सकता है। हालांकि, कुछ मामलों में, मानव और मानवीकृत mAbs के निरंतर क्षेत्र के खिलाफ एंटीबॉडी का उत्पादन किया जा सकता है, जो उनके प्रभावकारक कार्यों को प्रभावित कर सकता है और mAbs की नैदानिक ​​​​प्रभावकारिता को प्रभावित कर सकता है।

नए माब-आधारित निर्माणों के साथ नैदानिक ​​अनुभव सीमित है, जो जोखिम धारणा को भी बढ़ा सकता है। अगली पीढ़ी की दवाओं पर विशेष ध्यान दिया जाना चाहिए, जैसे द्विविशिष्ट mAb और mAb टुकड़े, साथ ही छिपे हुए प्रतिजनी निर्धारकों को उजागर करने की उनकी क्षमता। परिवर्तित ग्लाइकोसिलेशन प्रोफाइल अणु के इम्युनोजेनिक गुणों को कम या बढ़ा सकता है (जैसे, प्रोटीन बैकबोन शील्डिंग में परिवर्तन)। एटिपिकल ग्लाइकोसिलेशन प्रोफाइल, जैसे कि नई अभिव्यक्ति प्रणालियों के उपयोग में शुरुआती दौर में, आमतौर पर इस्तेमाल की जाने वाली अभिव्यक्ति प्रणालियों की तुलना में इम्यूनोजेनेसिटी का खतरा बढ़ सकता है।

इम्यूनोजेनेसिटी को प्रभावित करने वाले अन्य कारकों में विनिर्माण अशुद्धियां और अन्य गुणवत्ता कारक शामिल हैं। इसलिए, ऐसे संभावित जोखिमों का आकलन, लक्षण वर्णन और संभावित रूप से कम करने के लिए अधिक गहन विश्लेषणात्मक और नैदानिक ​​दृष्टिकोण की आवश्यकता हो सकती है, और गुणवत्ता-आधारित जोखिमों की ठीक से पहचान की जानी चाहिए। उदाहरण के लिए, काफी अनुभव के साथ एक लक्ष्य के लिए एक एमएबी, लेकिन जो एक उपन्यास अभिव्यक्ति प्रणाली द्वारा निर्मित होता है, इसकी क्रिया के तंत्र के संदर्भ में कम जोखिम हो सकता है, लेकिन अशुद्धियों के संभावित प्रभाव के कारण जोखिम में वृद्धि हो सकती है। उनकी सुरक्षा का अपर्याप्त ज्ञान।

कार्रवाई की प्रणाली।एमएबी (जैसे, साइटोलिटिक, एपोप्टोटिक) और विशेष रूप से लक्ष्य अणु के गुणों (जैसे, इम्यूनोसप्रेशन या उत्तेजना) की क्रिया के तंत्र को ठीक से चित्रित करने और व्यापक रूप से अध्ययन करने की आवश्यकता है। एमएबी इडियट प्रकार को लक्षित करने वाले एंटी-एमएबी एंटीबॉडी प्रभावकारिता को कम करते हैं। इसी तरह, एलोटाइपिक या अन्य साइटों को पहचानने वाले mAbs के एंटीबॉडी के प्रभाव का सावधानीपूर्वक अध्ययन किया जाना चाहिए, क्योंकि प्रतिरक्षा परिसरों के गठन से प्राप्तकर्ता में अवांछनीय प्रतिक्रियाएं हो सकती हैं। MAbs के जवाब में उत्पादित एंटीबॉडी के अप्रत्यक्ष प्रभाव भी महत्वपूर्ण हो सकते हैं, उदाहरण के लिए, mAbs जो सिग्नलिंग कैस्केड में शामिल अणुओं को लक्षित कर सकते हैं, एंटीबॉडी को प्रेरित कर सकते हैं जो लक्ष्य अणुओं के साथ क्रॉस-लिंक करते हैं, एक एगोनिस्ट के रूप में कार्य करते हैं, जिससे प्रतिरक्षा की सक्रियता बढ़ सकती है। प्रणाली और संभवतः साइटोकिन रिलीज सिंड्रोम का परिणाम है। एक व्यक्तिगत रोगी के स्तर पर, यह भविष्यवाणी करना काफी कठिन है। एमएबी एगोनिस्ट और एमएबी के लिए, जिनके क्रॉस-लिंकिंग से प्रतिरक्षा सक्रियण हो सकता है, आवेदकों को ऐसे आयोजनों के शुरुआती नैदानिक ​​परीक्षणों के दौरान रोगियों की सावधानीपूर्वक निगरानी करने पर विचार करना चाहिए।

नैदानिक ​​कारक।नैदानिक ​​कारकों का इम्यूनोजेनेसिटी पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है। mAbs के लिए प्रतिरक्षण उम्र पर निर्भर हो सकता है, उदाहरण के लिए प्रोटीन चयापचय बच्चों और वयस्कों के बीच भिन्न होता है, जो प्रतिरक्षाजन्यता में अंतर पैदा कर सकता है, उदाहरण के लिए तुलनात्मक खुराक पर किशोर गठिया बनाम रुमेटीइड गठिया में एंटीबॉडी का उपयोग किया जाता है। इतिहास में समान (समान) या संबंधित एंटीबॉडी की शुरूआत भी इम्यूनोजेनेसिटी को प्रभावित कर सकती है। आंतरायिक (आंतरायिक) खुराक आहार (जैसे, खुराक के बीच अलग-अलग अंतराल) के साथ उपयोग किए जाने वाले एमएबी औषधीय उत्पाद नियमित खुराक या चक्रीय आहार में उपयोग किए जाने की तुलना में इम्युनोजेनिक होने की अधिक संभावना हो सकती है। mAbs के एंटीबॉडी में नैदानिक ​​रूप से महत्वपूर्ण प्रभावों की उपस्थिति एंटीबॉडी की बाध्यकारी साइट, mAbs के लिए इसकी आत्मीयता और इसके अनुमापांक द्वारा निर्धारित की जाती है।

MAbs के प्रतिपिंड क्षणिक हो सकते हैं और उपचार के दौरान गायब हो सकते हैं, या, इसके विपरीत, उपचार के दौरान और यहां तक ​​कि लंबे समय तक बने रहते हैं। कुछ mAbs के लिए एंटीबॉडी का उत्पादन कोई महत्वपूर्ण नैदानिक ​​​​परिणाम नहीं देता है, जबकि दूसरों के लिए उनका उत्पादन प्रभावकारिता या उपचार संबंधी प्रतिकूल घटनाओं में कमी से प्रकट हो सकता है।

6.2। जोखिम आकलन

माब के प्रति प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के गठन में कई कारक योगदान करते हैं, जिन्हें जोखिम मूल्यांकन के दौरान ध्यान में रखा जाना चाहिए। एमएबी के लिए प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की आवृत्ति और गंभीरता को प्रभावित करने वाले कारक (दवा के आधार पर जोखिम कारक, निर्माण प्रक्रिया और रोग की विशिष्टता और (या) रोगियों) को दृष्टिकोण के आधार के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है जिसके अनुसार ये जोखिम कारक उनकी उपलब्धता और व्यवहार्यता के दृष्टिकोण से विशेषता है जोखिम मूल्यांकन (या पहचान) रणनीतियों में न्यूनीकरण।

ऊपर चर्चा किए गए कारकों के आधार पर जोखिम की पहचान एक ऐसे आकलन की ओर ले जाती है जो व्यक्तिगत नैदानिक ​​​​जोखिमों और एक अच्छी तरह से डिज़ाइन किए गए इम्यूनोजेनेसिटी अध्ययन कार्यक्रम को एकीकृत करता है जो नैदानिक ​​विकास का हिस्सा है। जोखिम मूल्यांकन के लिए एक बहुआयामी दृष्टिकोण की आवश्यकता होती है जो सभी पहचाने गए जोखिमों को ध्यान में रखता है, उदाहरण के लिए, उत्पाद की गुणवत्ता नियंत्रण रणनीति के कारण, उत्पाद की संरचना सहित, संबंधित वेरिएंट और संबंधित अशुद्धियों के लिए स्वीकार्यता सीमा का औचित्य। इसका तात्पर्य यह भी है कि यदि उत्पाद विकास के विभिन्न चरणों में एमएबी में कोई परिवर्तन होता है, तो विकास के दौरान किए गए प्रत्येक तुलनात्मक अध्ययन के लिए एक समग्र जोखिम मूल्यांकन किया जाना चाहिए।

इस प्रकार, जोखिम मूल्यांकन का मुख्य पक्ष घटना की आवृत्ति और एक अवांछनीय प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के नैदानिक ​​​​परिणामों के साथ-साथ ऐसे परिणामों को रोकने की संभावना, उनके सही निर्धारण और (या) चिकित्सा सुधार का विश्लेषण है। पहचाने गए जोखिमों और ऐसे जोखिमों की निगरानी और उन्हें कम करने के लिए उपलब्ध उपायों के आधार पर, इन विनियमों के अध्याय 11 में वर्णित इम्यूनोजेनेसिटी अध्ययन कार्यक्रम कम या अधिक हो सकता है। आवेदकों को लिए गए दृष्टिकोण का औचित्य और विश्लेषण करना चाहिए। mAbs के वर्ग और उपवर्ग के आधार पर (इम्युनोबायोलॉजिकल कार्यों को प्रभावित करना, जैसे कि Fc रिसेप्टर्स के लिए बाध्यकारी) या क्रिया के तंत्र, अलग-अलग Mab की तैयारी के लिए अवांछनीय प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया से जुड़े नैदानिक ​​​​परिणाम भिन्न हो सकते हैं। उदाहरण के लिए, mAbs को एंटीबॉडी द्वारा निष्प्रभावी किया जा सकता है जिसके परिणामस्वरूप प्रभावकारिता कम हो जाती है या प्रतिकूल घटनाओं जैसे जलसेक प्रतिक्रियाएं और / या प्रतिरक्षा जटिल गठन हो सकता है। ये जलसेक प्रतिक्रियाएं गंभीर हो सकती हैं लेकिन (गैर-एलर्जी अतिसंवेदनशीलता प्रतिक्रियाएं) उचित नैदानिक ​​​​उपायों जैसे प्रीमेडिकेशन द्वारा कम की जा सकती हैं। जब प्रभावकारिता में गिरावट आती है, तो वैकल्पिक उपचार के रूप में अन्य mAbs या संबंधित चिकित्सीय प्रोटीन की उपस्थिति भी जोखिम कम करने की रणनीति का एक महत्वपूर्ण कारक हो सकती है।

सामान्य सिद्धांत यह है कि पंजीकरण के लिए आवेदन करते समय गंभीरता, घटना की आवृत्ति और पहचान योग्य जोखिमों का आकलन करने के लिए पर्याप्त डेटा प्रदान किया जाना चाहिए। तब (यदि आवश्यक हो) ऐसे जोखिमों का विपणन के बाद के अध्ययन और निगरानी के माध्यम से अधिक गहराई से अध्ययन किया जा सकता है।

जोखिम मूल्यांकन और न्यूनीकरण के लिए प्रारंभिक बिंदु के रूप में, निम्नलिखित कारक महत्वपूर्ण हो सकते हैं:

• उत्पाद-विशिष्ट कारकों के साथ संयुक्त पिछले अनुभाग में वर्णित पता लगाने के सिद्धांतों के आधार पर जोखिम स्तरीकरण, उदाहरण के लिए आंतरिक इम्युनोजेनिक अनुक्रमों की पहचान, समुच्चय सहित भौतिक रासायनिक प्रोफ़ाइल और अन्य संबंधित और विनिर्माण विकल्प, सूत्रीकरण विकास विवरण, उदाहरण के लिए शारीरिक पीएच में घुलनशीलता, लक्ष्य प्रतिजन, आदि का स्थान;
• इस अध्याय में वर्णित परख विधि के प्रदर्शन का विवरण, विशेष रूप से किस हद तक चयनित एमएबी परख प्रारूप की चयनात्मकता अवशिष्ट दवा परिसंचरण के कारण कम हो जाती है;
• मात्रात्मक निर्धारण की विधि की अपरिहार्य अपूर्णता के साथ: माब के एंटीबॉडी के नियंत्रण को पूरक करने के उपायों की उपलब्धता, उदाहरण के लिए, पीडी या पीके मापदंडों का निर्धारण; प्रारंभिक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का पता लगाने के लिए परिमाणीकरण विधियों की उपलब्धता (उदाहरण के लिए, बाध्यकारी माब का प्रारंभिक पता लगाना, प्रारंभिक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का पता लगाने के लिए आईजीएम का पता लगाना);
• रोगी आबादी की संवेदनशीलता, चिकित्सीय सूचकांक, ऑटोइम्यून स्थिति, एक साथ इम्यूनोसप्रेसेन्ट्स का उपयोग, आदि;
• अन्य नैदानिक ​​क्षेत्रों की तुलना में, ऑन्कोलॉजी में कमी के प्रभाव का पता लगाना अधिक कठिन होता है क्योंकि एंटीबॉडी उत्पादन के साथ ट्यूमर की प्रगति को सहसंबद्ध करना मुश्किल होता है।

रोग की प्रगति और कुछ समय बाद चिकित्सा के प्रति प्रतिक्रिया में कमी आम तौर पर लगभग सभी रोगियों में देखी जाती है, जिससे इम्यूनोजेनेसिटी द्वारा मध्यस्थता वाले प्रभावों से अंतर करना मुश्किल हो सकता है। परिणामस्वरूप, नैदानिक ​​परीक्षणों में अधिक गहन शोध की आवश्यकता हो सकती है ताकि यह निर्धारित किया जा सके कि पोस्ट-मार्केटिंग सेटिंग में क्या उम्मीद की जाए, खासकर जब वैकल्पिक उपचार उपलब्ध हों; घर और अस्पताल में एमएबी का प्रशासन: अस्पताल में एमएबी की शुरूआत के फायदे जलसेक प्रतिक्रियाओं और एनाफिलेक्सिस (यदि कोई हो) की तत्काल राहत है, हालांकि, घर पर एमएबी का उपचर्म प्रशासन रोगी के लिए अधिक सुविधाजनक है।

इस प्रकार, आवेदक को प्रस्तावित नैदानिक ​​​​आवेदन के साथ अवांछित प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया और उसके परिणामों के जोखिम को संतुलित करने की आवश्यकता है। उदाहरण के लिए, चमड़े के नीचे प्रशासन के बाद बढ़ी हुई प्रतिक्रिया दर वाले mAbs गृह प्रशासन के लिए कम उपयुक्त हैं; कम प्रभावकारिता या जलसेक प्रतिक्रियाओं या एनाफिलेक्सिस की स्थिति में वैकल्पिक चिकित्सा या नैदानिक ​​​​प्रक्रियाओं की उपलब्धता।

6.3। निगरानी और जोखिम शमन

इस जोखिम की पहचान और मूल्यांकन के दृष्टिकोण के बाद, आवेदकों को इस अवधारणा को दवा के विकास की शुरुआत में सावधानी से योजना बनानी चाहिए, फिर, जैसे ही नया डेटा उपलब्ध हो, नियमित रूप से समीक्षा करें और विकास प्रक्रिया के दौरान और उत्पाद जीवन चक्र के दौरान इसे अपडेट करें। नैदानिक ​​विकास की शुरुआत में, आवेदक, यदि अन्य कारकों की आवश्यकता होती है, उदाहरण के लिए, एमएबी के लिए एक बढ़ा हुआ जोखिम निर्दिष्ट कर सकते हैं, भले ही कार्रवाई का तंत्र अनिवार्य रूप से एक बढ़ा हुआ जोखिम नहीं दर्शाता है। बड़े नैदानिक ​​परीक्षणों के परिणामों के आधार पर, जोखिम की भयावहता पर पुनर्विचार करना आवश्यक हो सकता है। पंजीकरण के दौरान, आवेदकों को विकास कार्यक्रम के दौरान किए गए इम्यूनोजेनेसिटी अध्ययन के डिजाइन और दायरे की समग्र अवधारणा को सावधानीपूर्वक उचित ठहराना और उसकी समीक्षा करनी चाहिए। यदि औषधीय उत्पादों को इंगित किया जाता है कि उनके पास एक अनुकूल इम्युनोजेनिक क्षमता है (उदाहरण के लिए, औषधीय उत्पाद की सामान्य विशेषताओं में एक संकेत), तो ऐसे संकेत को सही ठहराने के लिए अतिरिक्त डेटा प्रदान किया जाना चाहिए।

जोखिम मूल्यांकन के परिणामों के आधार पर, कुछ मामलों में, नैदानिक ​​विकास के दौरान अधिक संपूर्ण और गहन अध्ययन की आवश्यकता हो सकती है। उदाहरण के लिए, यदि एमएबी में गैर-मानव कार्बोहाइड्रेट संरचनाएं होती हैं, जैसे कि गैलेक्टोज-α-1,3-गैलेक्टोज, गंभीर एनाफिलेक्सिस को रोकने के लिए, कुछ मामलों में रोगियों को दवा के प्रशासन से पहले आईजीई के लिए परीक्षण करने की आवश्यकता होती है। IgE परीक्षण की आवश्यकता का एक और उदाहरण प्रारंभिक नैदानिक ​​दवा विकास के दौरान दवा के पहले इंजेक्शन के लिए एलर्जी प्रतिक्रियाओं की उच्च आवृत्ति है। हालांकि IgG उपवर्गों या IgA जैसे अन्य Ig वर्गों का निर्धारण, आमतौर पर mAb इम्यूनोजेनेसिटी अध्ययन के लिए एक मानक आवश्यकता नहीं है, ऐसे अध्ययनों की आवश्यकता हो सकती है यदि कुछ जोखिम पाए जाते हैं (जैसे, नाक प्रशासन)। उसी समय, एक नियम के रूप में, तटस्थ करने की क्षमता और mAbs की क्षणिक (लगातार) प्रकृति को स्थापित करने के लिए, एकाधिक नमूनाकरण की आवश्यकता होती है।

पहचान किए गए सापेक्ष जोखिम की मात्रा के आधार पर, नमूनाकरण और विश्लेषण की आवृत्ति और समय भिन्न हो सकते हैं। विकास के बाद के चरणों में, कम जोखिम के साथ एमएबी नमूनाकरण की आवृत्ति को कम करने के लिए स्वीकार्य है, बशर्ते कि कोई प्रतिकूल घटना या कम प्रभावकारिता नहीं देखी गई हो। हालांकि, पूरे विकास कार्यक्रम के दौरान एक मानक आधार पर एक नमूना बैंक के रखरखाव के लिए प्रदान करना आवश्यक है।

उपयोग के उच्च जोखिम के साथ mAb की तैयारी के लिए, नैदानिक ​​​​परीक्षणों की पूरी अवधि के दौरान नमूनाकरण अधिक बार हो सकता है। इस मामले में, वास्तविक समय में नमूनों का विश्लेषण करने की सिफारिश की जाती है। नैदानिक ​​विकास के दौरान, एक साथ, साथ ही नियमित प्रशासन की अवधि के दौरान, एंटीबॉडी, एफसी-, पीडी-मार्कर, प्रभावकारिता, सुरक्षा की सामग्री निर्धारित करना आवश्यक हो सकता है। यह एंटीबॉडी उत्पादन के नैदानिक ​​​​महत्व के साथ-साथ समय के साथ उनके प्रभाव में परिवर्तन का मूल्यांकन करना संभव बनाता है, जो कि उनके अनुमापांक में वृद्धि और (या) एंटीबॉडी के आत्मीयता के आइसोटाइप / परिपक्वता में परिवर्तन के कारण हो सकता है। . एंटी-मोनोक्लोनल एंटीबॉडी जिनके पास तटस्थ करने की क्षमता नहीं है, अप्रत्यक्ष रूप से एमएबी तैयारी के लिए बाध्यकारी या इसके फार्माकोकाइनेटिक गुणों को बदलकर प्रभावशीलता को प्रभावित कर सकते हैं। इसीलिए पीके मापदंडों का निर्धारण एंटीमोनोक्लोनल एंटीबॉडी के निर्धारण के तरीकों की योजना बनाने में योगदान कर सकता है।

परिमाणीकरण के परिणामों का उपयोग जोखिम प्रबंधन उद्देश्यों के लिए किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, यदि एक पहचान और जोखिम मूल्यांकन का निष्कर्ष है कि एक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का शीघ्र पता लगाने की आवश्यकता है और एमएबी थेरेपी को बंद करने की संभावना की अनुमति है, तो कम-आत्मीयता आईजीएम का उत्पादन प्रारंभिक प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के संकेतक के रूप में कार्य कर सकता है, और आईजीएम का निर्धारण उन रोगियों की शुरुआती पहचान में योगदान कर सकता है जो प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया विकसित करते हैं। इसी तरह, बाध्यकारी एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए जो तटस्थ करने की क्षमता नहीं रखते हैं, एंटीबॉडी को निष्क्रिय करने के बाद के गठन के प्रारंभिक भविष्यवाणी के रूप में कार्य कर सकते हैं।

उदाहरण के लिए, जोखिम कम करने की रणनीतियों में यह अध्ययन करना शामिल हो सकता है कि प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया वाले रोगियों का प्रबंधन कैसे किया जाए, जैसे कि इसकी सुरक्षा से समझौता किए बिना दवा प्रशासन को बढ़ाने की संभावना आदि। हालांकि, ऐसे कार्यों की व्यवहार्यता पर विचार किया जाना चाहिए। पंजीकरण डोजियर जमा करते समय, आवेदकों को जोखिमों की पहचान करने, वर्णन करने, निगरानी करने, कम करने और कम करने के लिए एक संयुक्त, सामान्यीकृत रणनीति प्रस्तुत करने के लिए प्रोत्साहित किया जाता है। इस तरह के जोखिम-आधारित दृष्टिकोण को जोखिम प्रबंधन योजना को भी ध्यान में रखना चाहिए, जो विश्लेषण करता है कि विकास कार्यक्रम के डेटा से जोखिमों की पहचान कैसे की जाती है, और संभावित जोखिम, साथ ही अनुपलब्ध जानकारी जिसे पोस्ट-मार्केटिंग चरण में प्राप्त करने की आवश्यकता होती है।

रोगजनन।

एक।प्रतिरक्षा परिसरों का गठन।प्रतिरक्षा परिसरों में एक दवा और एक एंटीबॉडी शामिल है जो विशेष रूप से एरिथ्रोसाइट झिल्ली को बांधता है, इसके बाद पूरक सक्रियण होता है। पूरक एंटीबॉडी के साथ प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण आमतौर पर सकारात्मक होता है, लेकिन एंटी-आईजीजी एंटीबॉडी के साथ यह नकारात्मक होता है। पूरक और दवा की उपस्थिति में सामान्य लाल रक्त कोशिकाओं के साथ रोगी के सीरम को ऊष्मायन करके दवा के एंटीबॉडी का पता लगाया जा सकता है। दवा-प्रेरित प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया के अधिकांश मामले इस तंत्र के कारण होते हैं। छोटी खुराक में भी दवा का बार-बार प्रशासन, तीव्र इंट्रावास्कुलर हेमोलिसिस का कारण बनता है, हीमोग्लोबिनमिया, हीमोग्लोबिनुरिया और तीव्र गुर्दे की विफलता से प्रकट होता है।

बी।साइटोटॉक्सिक एंटीबॉडी का निर्माण।लाल रक्त कोशिकाओं के लिए बाध्य होने पर, दवा इम्युनोजेनिक हो जाती है और एंटीबॉडी के उत्पादन को उत्तेजित करती है, आमतौर पर आईजीजी। इम्युनोग्लोबुलिन के प्रति एंटीबॉडी के साथ केवल एक प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण सकारात्मक है। दवा के एंटीबॉडी निम्नानुसार निर्धारित किए जाते हैं। इस दवा के साथ सामान्य लाल रक्त कोशिकाओं के ऊष्मायन के बाद, उन्हें रोगी के सीरम में मिलाया जाता है। दवा के लिए एंटीबॉडी की उपस्थिति में, हेमोलिसिस विकसित होता है। साइटोटॉक्सिक एंटीबॉडी के कारण प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया का एक उत्कृष्ट उदाहरण बेंज़िलपेनिसिलिन के साथ एनीमिया है। यह शायद ही कभी और केवल तब होता है जब दवा को उच्च खुराक (10 मिलियन यूनिट / दिन / दिन से अधिक) में निर्धारित किया जाता है: इम्युनोग्लोबुलिन के एंटीबॉडी के साथ एक सीधा Coombs परीक्षण लगभग 3% रोगियों में सकारात्मक होता है, हेमोलिसिस भी कम बार विकसित होता है। बेंज़िलपेनिसिलिन अतिरिक्त संवहनी हेमोलिसिस का कारण बनता है। आईजीजी से बेंज़िलपेनिसिलिन की उपस्थिति पेनिसिलिन के लिए आईजीई प्रेरित एलर्जी से जुड़ी नहीं है।

में। कुछ दवाएं, जैसे कि सेफलोस्पोरिन, गैर-विशिष्ट आईजीजी और पूरक एकत्रीकरण का कारण बनती हैं, हालांकि यह शायद ही कभी हेमोलिटिक एनीमिया से जुड़ा होता है। प्रत्यक्ष Coombs परीक्षण सकारात्मक हो सकता है, अप्रत्यक्ष Coombs परीक्षण हमेशा नकारात्मक होता है।

जी।स्वप्रतिपिंडों का निर्माण।दवाएं आरएच प्रणाली के प्रतिजनों के लिए स्वप्रतिपिंडों के निर्माण को उत्तेजित कर सकती हैं। यह संभवतः टी-सप्रेसर्स की गतिविधि के निषेध और बी-लिम्फोसाइटों के क्लोनों के प्रसार के कारण है जो संबंधित एंटीबॉडी का उत्पादन करते हैं। इम्युनोग्लोबुलिन के एंटीबॉडी के साथ डायरेक्ट कूम्ब्स परीक्षण सकारात्मक है। दवा के अभाव में सामान्य एरिथ्रोसाइट्स के साथ रोगी सीरम के ऊष्मायन से एरिथ्रोसाइट्स पर आईजीजी का अवशोषण होता है। एरिथ्रोसाइट्स के लिए स्वप्रतिपिंडों का संश्लेषण मेथिल्डोपा, लेवोडोपा और मेफेनैमिक एसिड के कारण होता है। मेथिल्डोपा लेने वाले लगभग 15% रोगियों में प्रत्यक्ष Coombs परीक्षण सकारात्मक है, लेकिन 1% से कम रोगियों में हेमोलिटिक एनीमिया विकसित होता है। एरिथ्रोसाइट्स के लिए स्वप्रतिपिंडों के निर्माण पर मेथिल्डोपा का प्रभाव खुराक पर निर्भर प्रतीत होता है। कई महीनों के नशीली दवाओं के उपयोग से एनीमिया धीरे-धीरे विकसित होता है और यह अतिरिक्त संवहनी हेमोलिसिस के कारण होता है।

2. इलाज।दवा-प्रेरित प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया के उपचार में पहला और सबसे महत्वपूर्ण कदम उस दवा का उन्मूलन है जिसके कारण यह हुआ। प्रतिरक्षा परिसरों के कारण होने वाले हेमोलिसिस के साथ, वसूली जल्दी होती है। गंभीर मामलों में, तीव्र गुर्दे की विफलता देखी जाती है। स्वप्रतिपिंडों के कारण होने वाले हेमोलिसिस के साथ, रिकवरी धीमी होती है (आमतौर पर कई सप्ताह)। कॉम्ब्स का परीक्षण 1-2 साल तक सकारात्मक रह सकता है।

इम्यूनोबायोलॉजिकल तैयारी

निदान, रोकथाम और के लिए

संक्रामक रोगों का उपचार

युरोवा वी.ए., बुटाकोवा एल.यू., क्राफ्ट एलए, कुक्लिना एन.वी., सज़ांस्काया एए, करबासोवा ई.बी., विन्निकोवा यू.वी., इलिंस्काया बी.वी., प्रोकोपीव वी.एटी।

ऑफसेट पेपर की छपाई के लिए हस्ताक्षर किए। प्रसार: 500 प्रतियां।

प्रिंटिंग हाउस में मुद्रित ::;

GOU VPO अल्ताई स्टेट मेडिकल यूनिवर्सिटी ऑफ़ फ़ेडरल एजेंसी फॉर हेल्थ एंड सोशल डेवलपमेंट।

इम्यूनोबायोलॉजिकल तैयारी

निदान, रोकथाम और के लिए

संक्रामक रोगों का उपचार

सूक्ष्म जीव विज्ञान में व्यावहारिक कक्षाओं के लिए छात्रों की स्व-तैयारी के लिए पाठ्यपुस्तक

बरनौल, 2011

समीक्षक:

पाठ्यपुस्तक इम्यूनोबायोलॉजिकल तैयारियों की प्रकृति और उपयोग से संबंधित सैद्धांतिक मुद्दों की रूपरेखा तैयार करती है - नैदानिक ​​और उपचार-और-रोगनिरोधी: टीके, सीरा, बैक्टीरियोफेज, आदि।

चिकित्सा संकायों (चिकित्सा, बाल चिकित्सा, दंत चिकित्सा) के छात्रों को बैक्टीरियोलॉजिकल तैयारी की क्रिया के तंत्र, वैक्सीन और सीरम की तैयारी के लिए शरीर की प्रतिक्रिया और कुछ दवाओं के उपयोग से उत्पन्न होने वाली जटिलताओं का गहन अध्ययन करने की आवश्यकता है।

संक्रामक रोगों के निदान, रोकथाम और उपचार के लिए इम्यूनोबायोलॉजिकल तैयारी:युरोवा वीए, बुटाकोवा एलयू, क्राफ्ट एल। ।लेकिन।,कुक्लिना एन.वी., सज़ांस्काया एए, करबासोवा ई.बी., विन्निकोवा यू.वी., इलिंस्काया बी.वी. - बरनौल, 2002. - 46 पी।

(c) अल्ताई स्टेट मेडिकल यूनिवर्सिटी, 2002

© युरोवा वी.ए., बुटाकोवा एल.यू., क्राफ्टएलए.ए., कुक्लिना एन.वी., सज़ांस्काया

ए.ए., करबासोवा ई.बी., विन्निकोवा यू.वी., इलिंस्काया बी.वी., 2002

संक्रामक रोगों की रोकथाम, निदान और उपचार में, जीवित और मारे गए सूक्ष्मजीवों (बैक्टीरिया, रिकेट्सिया, वायरस), उनके चयापचय उत्पादों (विषाक्त पदार्थों) से बने इम्यूनोबायोलॉजिकल तैयारी का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, साथ ही विभिन्न तरीकों से अलग-अलग माइक्रोबियल सेल एंटीजन निकाले जाते हैं। . सीरम और विशिष्ट गामा ग्लोब्युलिन और इम्युनोग्लोबुलिन का उपयोग चिकित्सीय और नैदानिक ​​​​उद्देश्यों के लिए भी किया जाता है। इसके अलावा, डायग्नोस्टिक और चिकित्सीय उद्देश्यों के लिए बैक्टीरियोफेज की तैयारी का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

डॉक्टर को अपने अभ्यास में इम्यूनोबायोलॉजिकल तैयारी की कार्रवाई की संरचना, तैयारी, तंत्र के बारे में जानकारी आवश्यक है। इसी समय, चिकित्सकों के पास हमेशा नए बनाए गए टीके और सीरम की तैयारी, उनके उपयोग की ख़ासियत से परिचित होने का अवसर नहीं होता है। इसके अलावा, आधुनिक पाठ्यपुस्तकें इम्युनोबायोलॉजिकल तैयारियों की तैयारी, क्रिया के तंत्र और उपयोग से संबंधित मुद्दों को पूरी तरह से प्रतिबिंबित नहीं करती हैं।

उपरोक्त सभी ने इम्यूनोबायोलॉजिकल तैयारी के बारे में जानकारी वाली पाठ्यपुस्तक बनाने की आवश्यकता को जन्म दिया। इस मैनुअल में तैयारी, सक्रिय सिद्धांत, इम्युनोबायोलॉजिकल तैयारी के उपयोग और उनमें से कुछ के उपयोग से उत्पन्न होने वाली जटिलताओं के बारे में जानकारी शामिल है। मैनुअल का उद्देश्य निजी सूक्ष्म जीव विज्ञान में व्यावहारिक कक्षाओं के लिए चिकित्सा, बाल चिकित्सा, दंत चिकित्सा और चिकित्सा-रोगनिरोधी संकायों के तीसरे वर्ष के छात्रों को तैयार करना है।

इम्यूनोबायोलॉजिकल तैयारी का वर्गीकरण

I. नैदानिक ​​तैयारी।

एंटीजन युक्त तैयारी - निदान, एलर्जी, विषाक्त पदार्थ।

एंटीबॉडी युक्त तैयारी - डायग्नोस्टिक सीरा।

डायग्नोस्टिक बैक्टीरियोफेज।

• II चिकित्सीय और रोगनिरोधी दवाएं।

एंटीजन युक्त तैयारी - टीके।

एंटीबॉडी युक्त तैयारी - चिकित्सीय सीरा और गामा ग्लोब्युलिन और इम्युनोग्लोबुलिन।

बैक्टीरियोफेज।

माइक्रोबियल विरोधी।

इंटरफेरॉन और अन्य साइटोकिन्स।

धारा I

नैदानिक ​​दवाएं

नैदानिक ​​दवाओं का उपयोग कई रोगों के प्रयोगशाला निदान में किया जाता है, जिसका सटीक निदान केवल बैक्टीरियोलॉजिकल और वायरोलॉजिकल अध्ययनों की सहायता से किया जा सकता है। इसके अलावा, नैदानिक ​​​​तैयारी आवश्यक है जब प्रयोगशाला विधियों द्वारा एक बीमारी के निदान की पुष्टि की जाती है जिसमें एक एटिपिकल कोर्स होता है, या लक्षणों के बहुरूपता की विशेषता वाली बीमारी होती है। इसके अलावा, उन रोगों का निदान जो किसी दिए गए क्षेत्र में नहीं पाए जाते हैं और एक निश्चित समय पर प्रयोगशाला विधियों द्वारा पुष्टि की जानी चाहिए।

संक्रामक रोगों के निदान में, सूक्ष्मजीवविज्ञानी निदान विधियों का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। इस मामले में, बैक्टीरियोलॉजिकल, वायरोलॉजिकल, सीरोलॉजिकल, एलर्जी, इम्यूनोलॉजिकल डायग्नोस्टिक विधियों का उपयोग किया जाता है, साथ ही आणविक संकरण और पीसीआर के तरीके भी। इन तरीकों में से प्रत्येक के लिए कुछ नैदानिक ​​​​इम्यूनबायोलॉजिकल तैयारी की आवश्यकता होती है: डायग्नोस्टिक्स, डायग्नोस्टिक सीरा (प्रजातियां, विशिष्ट, जटिल, सोखना, आदि), पूरक, एलर्जी, बैक्टीरियोफेज, आरआईएफ और एलिसा के लिए सिस्टम, न्यूक्लिक एसिड जांच।

नैदानिक ​​तैयारियों का वर्गीकरण

1. एंटीबॉडी युक्त तैयारी - डायग्नोस्टिक सीरा:

समूहन;

वेग से गिराना;

विषनाशक;

रक्तलायी;

एंटी वाइरल;

दीप्तिमान;

एंटीग्लोबुलिन।

2. एंटीजन युक्त तैयारी:

2.1) निदान:

2.1.1 जीवाणु;

2.1.2. एरिथ्रोसाइट्स;

2.1.3 वायरल;

2.2।) विष;

2.3।) एलर्जी।

3. डायग्नोस्टिक बैक्टीरियोफेज।

1. डायग्नोस्टिक सीरा

संक्रामक रोगों के निदान में, सूक्ष्मजीवों (बैक्टीरिया और वायरस) या विषाक्त पदार्थों की पहचान करने के लिए प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। ऐसी प्रतिक्रियाओं के निर्माण के लिए, विशिष्ट डायग्नोस्टिक सेरा की आवश्यकता होती है।

1.1। एग्लूटिनेटिंग सीरम।

मारे गए सूक्ष्मजीवों या उनके प्रतिजनों के निलंबन के साथ खरगोशों को प्रतिरक्षित करके एग्लूटिनेटिंग सीरा प्राप्त किया जाता है, इसके बाद रक्त का नमूना लिया जाता है और सीरम तैयार किया जाता है। एग्लूटिनेशन प्रतिक्रिया में सूक्ष्मजीवों की पहचान करने के लिए एग्लूटिनेटिंग सेरा का उपयोग किया जाता है। ऐसे सीरा का नुकसान यह है कि वे समूह एग्लूटिनेशन प्रतिक्रियाओं को उत्पन्न करने में सक्षम हैं, टीके। उनमें बैक्टीरिया के प्रति एंटीबॉडी होते हैं जिनमें सामान्य एंटीजन होते हैं। इसलिए, वर्तमान में अधिकांश सेरा का उपयोग किया जाता है सोख लिया Adsorbed Sera में केवल एक विशेष प्रकार या प्रकार के एंटीजन के अनुरूप प्रकार या प्रजाति एंटीबॉडी होते हैं। इस तरह के सीरा को प्राप्त करने के लिए कैस्टेलनी विधि का उपयोग किया जाता है - सोखना विधि। इस विधि में संबंधित विषम जीवाणुओं के साथ संतृप्त करके समूह एग्लूटीनिन के लिए सीरम की कमी होती है। इस मामले में, समूह एंटीबॉडी का सोखना होता है, और विशिष्ट एंटीबॉडी सीरम में रहते हैं। इस तरह, मोनोरिसेप्टर सेरा प्राप्त किया जा सकता है - सीरा जिसमें केवल एक एंटीजन के लिए एंटीबॉडी होते हैं, और पॉलीवलेंट सीरा, दो या तीन संबंधित बैक्टीरिया के साथ एग्लूटीनेशन प्रतिक्रियाएं देते हैं जिनमें एक सामान्य एंटीजन होता है। एग्लूटिनेटिंग सीरम का टिटर उच्चतम कमजोर पड़ने वाला होता है जिस पर एग्लूटीनेशन प्रतिक्रिया होती है।

एग्लूटिनेटिंग सेरा का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है, उदाहरण के लिए, एस्चेरिचिया, साल्मोनेला और एंटरोबैक्टीरियासी परिवार के अन्य सदस्यों के कारण होने वाली बीमारियों के निदान में।

1.2। अवक्षेपण सीरम।

खरगोशों को बैक्टीरियल एंटीजन, उनके अर्क और विषाक्त पदार्थों के साथ प्रतिरक्षित करके अवक्षेपित सीरा प्राप्त किया जाता है। अवक्षेपण सीरम का अनुमापांक प्रतिजन का अधिकतम तनुकरण है जिस पर अवक्षेपण प्रतिक्रिया होती है। प्रीसिपिटेटिंग सीरा का उत्पादन उच्च अनुमापांक के साथ किया जाता है - कम से कम 1:100,000। यह इस तथ्य के कारण है कि अवक्षेपण प्रतिक्रिया में निर्धारित प्रतिजन में सूक्ष्म रूप से छितरी हुई संरचना होती है और इसमें सीरम की समान मात्रा की तुलना में प्रति इकाई आयतन में अधिक एंटीबॉडी हो सकते हैं - एंटीबॉडी।

उत्पादों में प्रोटीन पदार्थों की अनुरूपता का पता लगाने के लिए सैनिटरी अभ्यास में प्रोटीन के प्रकार को निर्धारित करने के लिए फोरेंसिक परीक्षा में संक्रामक रोगों (एंथ्रेक्स, प्लेग, टुलारेमिया, डिप्थीरिया, आदि) के निदान में विशिष्ट अवक्षेपण सीरा का उपयोग किया जाता है। संदिग्ध)।

वर्षा प्रतिक्रिया को रिंग वर्षा या जेल वर्षा प्रतिक्रिया के रूप में वितरित किया जा सकता है।

1.3 हेमोलिटिक सीरा।

रैम एरिथ्रोसाइट्स के निलंबन के साथ खरगोशों को प्रतिरक्षित करके हेमोलिटिक सीरा प्राप्त किया जाता है। सीरम टिटर इसकी अधिकतम तनुता है, जो पूरक की उपस्थिति में रैम एरिथ्रोसाइट्स के 3% निलंबन के हेमोलिसिस का कारण बनता है। हेमोलिटिक सीरा का उपयोग पूरक अनुमापन के लिए किया जाता है और एक संकेतक प्रणाली में पूरक निर्धारण प्रतिक्रिया की स्थापना करते समय।

1.4 एंटीवायरल सीरा।

वायरस के प्रकार के आधार पर, विभिन्न जानवरों को प्रतिरक्षित करके प्रतिरक्षा एंटीवायरल सेरा प्राप्त किया जाता है। उदाहरण के लिए, एडेनोवायरस के खिलाफ सीरम खरगोशों के टीकाकरण द्वारा प्राप्त किया जाता है, इन्फ्लूएंजा वायरस के खिलाफ सीरम सफेद फेरेट्स के टीकाकरण आदि द्वारा प्राप्त किया जाता है।

डायग्नोस्टिक एंटीवायरल सीरा का उपयोग आरटीजीए, आरएसके, आरएन में वायरस के प्रकार या प्रकार को निर्धारित करने के लिए किया जाता है।

1.5 चमकदार सीरम।ल्यूमिनसेंट सीरा इम्यून सीरा होते हैं जिनमें फ्लोरोसेंट डाई के साथ लेबल किए गए विशिष्ट एंटीबॉडी होते हैं। ल्यूमिनेसेंट सेरा की तैयारी में, एक मजबूत रासायनिक बंधन द्वारा प्रतिरक्षा सीरम के ग्लोब्युलिन अंश से विभिन्न फ्लोरोक्रोमेस जुड़े होते हैं। ल्यूमिनेसेंट सीरम का उपयोग आरआईएफ के उत्पादन में किया जाता है।

1.6। एंटीग्लोबुलिन सीरम।

एंटीग्लोबुलिन सेरा (एजीएस) में मानव या खरगोश सीरम इम्युनोग्लोबुलिन के एंटीबॉडी होते हैं, जिसके आधार पर प्रतिक्रिया में प्रतिरक्षा सीरम का उपयोग किया जाता है। एजीएस मानव या खरगोश इम्युनोग्लोबुलिन के साथ जानवरों को प्रतिरक्षित करके प्राप्त किया जाता है। ऐसे सीरा का उपयोग अप्रत्यक्ष RIF, ELISA प्रतिक्रिया, Coombs प्रतिक्रिया स्थापित करने के लिए किया जाता है।

दवा-प्रेरित प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया सभी अधिग्रहीत प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया के लगभग 20% के लिए जिम्मेदार है। अधिकांश अन्य दवा-प्रेरित प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया में, एंटीबॉडी दवा-झिल्ली ग्लाइकोप्रोटीन कॉम्प्लेक्स के खिलाफ निर्देशित होते हैं। हेमोलिसिस केवल दवा के प्रशासन के दौरान मनाया जाता है और आमतौर पर इसके बंद होने के तुरंत बाद बंद हो जाता है।

प्रतिरक्षा परिसरों का गठन। प्रतिरक्षा परिसरों में एक दवा और एक एंटीबॉडी शामिल है जो विशेष रूप से एरिथ्रोसाइट झिल्ली को बांधता है, इसके बाद पूरक सक्रियण होता है। पूरक एंटीबॉडी के साथ प्रत्यक्ष कॉम्ब्स परीक्षण आमतौर पर सकारात्मक होता है, और आईजीजी के एंटीबॉडी के साथ यह नकारात्मक होता है। पूरक और दवा की उपस्थिति में सामान्य लाल रक्त कोशिकाओं के साथ रोगी के सीरम को ऊष्मायन करके दवा के एंटीबॉडी का पता लगाया जा सकता है। दवा-प्रेरित प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया के अधिकांश मामले इस तंत्र के कारण होते हैं (तालिका 16.3)। छोटी खुराक में भी दवा का बार-बार प्रशासन, तीव्र इंट्रावास्कुलर हेमोलाइसिस का कारण बनता है, हीमोग्लोबिनमिया, हीमोग्लोबिनुरिया और तीव्र गुर्दे की विफलता से प्रकट होता है।

स्वप्रतिपिंडों के कारण होने वाले हेमोलिसिस के साथ, रिकवरी धीमी होती है (आमतौर पर कई सप्ताह)। कॉम्ब्स का परीक्षण 1-2 साल तक सकारात्मक रह सकता है।

कार्रवाई के तंत्र के आधार पर, दवाएं जो प्रतिरक्षा हेमोलिटिक एनीमिया का कारण बनती हैं, उन्हें दो समूहों में विभाजित किया जाता है।

पहले शामिल हैं