Kasvuhormoni (GH) - kasvuhormonin tason määrittäminen. Somatotrooppinen hormoni Kuinka ottaa kasvuhormonin analyysi

kasvuhormoni(viittaa polypeptideihin) tuotetaan aivolisäkkeessä ja se vaikuttaa ihmiskehon kasvuun ja kehitykseen. Sen tuotanto riippuu hypotalamuksen toiminnasta, joka tuottaa neurohormoneja - somatoliberiineja ja somatostatiineja. Somatoliberiinit lisäävät aivolisäkkeen kasvuhormonin tuotantoa ja somatostatiinit estävät sitä.
Neurohormonit tarjoavat somatotrooppisen hormonin tuotannon ei vain tietyssä määrässä, vaan myös tiettynä aikana, säätelemällä päivittäisiä vaihteluita sen pitoisuudessa veressä.
Kasvuhormoni on anabolinen, eli se edistää synteesiprosesseja kehossa ja aktivoi proteiini-, rasva-, hiilihydraatti- ja kivennäisaineenvaihduntaa.
Somatotrooppisen hormonin vaikutuksesta proteiinin, glykogeenin, DNA:n muodostumisprosessit ovat voimakkaampia, ja rasvat uutetaan varastosta ja hajotetaan rasvahapoiksi. Lisäksi somatotrooppinen hormoni tehostaa imetystä, nopeuttaa luun kasvua ja auttaa pitämään verensokeritasot tietyllä tasolla. Somatotrooppisella hormonilla on biologinen vaikutus elimistöön somatomediini C:n kautta.
Hypotalamus ja aivolisäke ovat kaikkien endokriinisten rauhasten säätelykeskus, ja niiden toiminta tapahtuu palauteperiaatteen mukaisesti - mitä enemmän hormonia umpirauhanen (kilpirauhanen, munasarjat jne.) erittää, sitä vähemmän hormoneja aivolisäke erittää. .
Somatotrooppisen hormonin liiallinen tuotanto aivolisäkkeessä johtaa jättimäisyyteen ja riittämätön - kääpiöisyyteen. Jos somatotrooppista hormonia alkaa tuottaa liikaa aikuisilla, kehittyy akromegalia. Tämän taudin kanssa ihmisillä kehon päätyosien koko kasvaa (nenä, alaleuka, kädet, jalat, voimakasta kasvua havaitaan).
Somatotrooppisen hormonin tason määrittäminen veressä suoritetaan liiallisella kasvulla tai sen viivästymisellä, kehon epäsuhtaisella kehityksellä (akromegalialla), alentuneella lihasjänteellä ja diabeteksella, jolla on hallitsemattomia aineenvaihduntahäiriöitä.
Joissakin tapauksissa on vaikea määrittää somatotrooppisen hormonin tuotannon rikkomista, sitten provosoivat testit suoritetaan käyttämällä lääkkeitä, jotka estävät tai lisäävät tämän hormonin tuotantoa.
Verikoe vaatii potilaan valmistelua. 10-12 tuntia ennen verinäytteenottoa on suositeltavaa rajoittaa fyysistä aktiivisuutta ja olla syömättä ruokaa. Ennen veren ottamista potilaan on 30 minuutin kuluessa. makaa hiljaa, sillä stressiin ja fyysiseen toimintaan liittyy somatotrooppisen hormonin ylimääräinen vapautuminen vereen.
Koeputki, jossa on verta analysoitavaksi, säilytetään jääkaapissa (2-8 °C).
Kasvuhormonin pitoisuus aikuisten ja lasten veressä on esitetty alla.

Seerumin GH-taso

GH-taso veren seerumissa lapsilla

> Somatotrooppisen hormonin (GH) tason määrittäminen veressä

Näitä tietoja ei voi käyttää itsehoitoon!
Muista neuvotella asiantuntijan kanssa!

Miksi on tarpeen määrittää somatotrooppisen hormonin taso?

Somatotrooppinen hormoni (GH) on tärkein hormoni, joka vastaa ihmiskehon kasvun säätelystä. Tässä suhteessa sitä kutsutaan kasvuhormoniksi. Sitä tuotetaan aivolisäkkeen etuosan soluissa. Tämän aineen vapautuminen vereen tapahtuu aaltoina - pitoisuus saavuttaa huippunsa yöllä ja laskee jälleen päivän aikana.

Analyysi kasvuhormonin tason määrittämisellä on erittäin tärkeä aivolisäkkeen patologian diagnosoimiseksi. Tämä pätee erityisesti lapsuuteen - tämän hormonin riittämättömällä synteesillä kehittyy kääpiö ja ylimääräinen gigantismi. Aikuisilla tämän hormonin lisääntynyt synteesi voi johtaa akromegaliaan (käsien, jalkojen suhteeton lisääntyminen, kasvojen piirteiden karhentuminen).

Kuka määrää tämän analyysin, milloin kasvuhormonin taso tulisi määrittää?

Tämän analyysin voi määrätä lastenlääkäri, terapeutti, onkologi, neurokirurgi, endokrinologi. Lastenlääkäri voi määrätä sen lapsen kasvun viivästymiseen tai voimakkaaseen kiihtymiseen. Terapeutti - lihasheikkoudella, osteoporoosilla, lisääntyneellä, selittämättömällä hikoilulla.

On tärkeää määrittää somatotrooppisen hormonin pitoisuus aivolisäkkeen kasvainten diagnosoinnissa. Kasvaimella havaitaan useimmiten hormonien liiallinen synteesi. Aikuisilla, joilla on liikaa kasvuhormonia, kehittyy yleensä akromegalia. Aivolisäkkeen kasvaimen merkittävään kasvuun voi liittyä päänsärkyä, verenpainetautia.

Säännöllinen kasvuhormonin testaus on tarkoitettu potilaille, jotka saavat hoitoa akromegaliaan.

Kuinka luovuttaa verta somatotrooppiselle hormonille?

Analyysi voidaan ottaa biokemiallisessa laboratoriossa endokrinologin kuulemisen jälkeen. Tutkimusta varten suonesta otetaan verta 3–5 ml:n tilavuudessa. Virheellisten tulosten välttämiseksi kolme päivää ennen verenluovutusta on pidättäydyttävä urheilusta, yksi päivä - alkoholin ja rasvaisten ruokien juomisesta, yksi tunti - tupakoinnista. Paras aika testaamiseen on 8-11 tuntia yön paaston jälkeen.

Tulokset ovat normaaleja

Aikuisilla somatotrooppisen hormonin taso riippuu sukupuolesta: naisilla se on normaali - 0,1-8 ng / ml, miehillä - 0,1-3 ng / ml. Jotkut laboratoriot käyttävät muita mittayksiköitä - milli-kansainvälistä yksikköä litraa kohti (mIU/L). Tässä tapauksessa 0,3-30 mIU / l väliä pidetään normaalina miehillä ja 0,3-26 mIU / l naisilla.

Kasvuhormonin pitoisuuden määrityksen tulosten tulkinta

Analyysin tuloksia tulee tulkita varoen. Tämän hormonin pitoisuudella veressä on päivittäinen riippuvuus - lisääntynyt pitoisuus havaitaan yöllä ja aamulla. Myös fyysinen aktiivisuus vaikuttaa hormonin tasoon, joten on tärkeää noudattaa kokeeseen valmistautumisen sääntöjä.

Kasvuhormonin tason nousu on ominaista gigantismille, hormoneja tuottaville aivolisäkkeen kasvaimille (adenoomille). Korkean tason syynä voi olla kompensoimaton diabetes mellitus, alkoholismi, traumaattinen aivovamma, tiettyjen lääkkeiden (insuliini, beetasalpaajat) käyttö.

Hormonin alhainen taso määräytyy aivolisäkkeen kääpiöistä (kääpiöistä), Itsenko-Cushingin oireyhtymästä ja unen puutteesta.

Somatotrooppisten hormonitasojen kliininen merkitys

Kasvuhormonin tason määrittämisellä on suuri kliininen merkitys aivolisäkkeen patologian diagnosoinnissa. Hormonin liiallisen tai puutteen oikea-aikainen havaitseminen lapsilla antaa sinun välttää täysin sairaudet, kuten aivolisäkkeen gigantismi ja kääpiö.

Tämän tutkimuksen tarkkuuden lisäämiseksi sen kanssa voidaan tehdä samanaikainen määritys, kuten insuliinin kaltaisen tekijän määrittäminen, sekä testit somatotrooppisen hormonin synteesin stimuloimiseksi ja tukahduttamiseksi.

Yleistä tietoa tutkimuksesta

Analyysi määrittää kasvuhormonin määrän veressä. Kasvuhormonia tuottaa aivolisäke, rypäleen kokoinen rauhanen, joka sijaitsee aivojen pohjassa nenäselän takana. Hormoni erittyy yleensä vereen aaltoina päivän aikana huippupitoisuuden ollessa yleensä yöllä.

Somatotrooppinen hormoni on välttämätön lasten normaalille kasvulle ja kehitykselle, koska se edistää luiden pituuden pidentymistä lapsen syntymästä murrosiän loppuun. Somatotrooppisen hormonin muodostumisen puuttuessa lapsi kasvaa hitaammin. Somatotrooppisen hormonin liiallista tuotantoa havaitaan usein aivolisäkkeen kasvaimella (yleensä hyvänlaatuinen). Hormonin liiallinen synteesi edistää luiden liiallista venymistä ja jatkuvaa kasvua myös murrosiän jälkeen, mikä voi johtaa jättimäisyyteen (kasvu yli 2 metriä). Myös somatotrooppisen hormonin liiallisella määrällä voidaan havaita karkeita kasvojen piirteitä, yleistä heikkoutta, viivästynyttä seksuaalista kehitystä ja päänsärkyä.

Vaikka kasvuhormoni menettää osittain aktiivisuutensa aikuisilla, sillä on silti rooli luun tiheyden säätelyssä, lihasmassan ylläpitämisessä ja rasvahappojen aineenvaihdunnassa: hormonipuutos voi johtaa luutiheyden laskuun, lihasmassan vähenemiseen ja muutokset lipiditasoissa. Somatotrooppisen hormonin testaus ei kuitenkaan ole yleinen käytäntö tutkittaessa potilaita, joilla on alhainen luutiheys, alikehittyneet lihakset ja kohonneet lipiditasot – kasvuhormonin puute on melko harvoin syynä näihin sairauksiin.

Somatotrooppisen hormonin liiallinen tuotanto aikuisilla voi aiheuttaa akromegaliaa, jonka ominaispiirre ei ole luiden pidentyminen, vaan niiden liiallinen paksuus. Vaikka oireet, kuten ihon paksuuntuminen, hikoilu, väsymys, päänsärky ja nivelkipu ovat lieviä taudin alkaessa, hormonipitoisuuden lisääntyminen voi johtaa käsien ja jalkojen suurenemiseen, rannekanavaoireyhtymään (kivulias tunne ranne) ja patologinen laajentuminen. Somatotrooppisen hormonin lisääntyneen tason vuoksi kehossa esiintyy joskus papilloomeja ja suolistossa olevia polyyppeja. Ilman hoitoa akromegalia ja gigantismi johtavat usein komplikaatioihin: tyypin 2 diabetekseen, lisääntyneeseen sydän- ja verisuonisairauksien riskiin, korkeaan verenpaineeseen, niveltulehdukseen ja yleiseen eliniän lyhenemiseen.

Kasvuhormonin poikkeavuuksien diagnosoimiseksi suoritetaan useimmiten sen stimulaation ja suppression testi. Koska aivolisäke vapauttaa kasvuhormonia aaltoina pitkin päivää, hormonipitoisuuden spontaania mittausta ei yleensä käytetä kliinisessä käytännössä.

Mihin tutkimusta käytetään?

Somatotrooppisen hormonin analyysiä ei suositella kehon yleistutkimukseen. Pohjimmiltaan se suoritetaan vain, kun epäillään sen tuotantoon liittyvää rikkomusta, ja se määrätään muiden hormonien testien suorittamisen jälkeen tai aivolisäkkeen toiminnan tutkimuksessa.

Analyysi suoritetaan kasvuhormonin liiallisen tai riittämättömän tuotannon tarkistamiseksi ja taudin vakavuuden saamiseksi. Se on osa diagnostista tutkimusta epänormaalin kasvuhormonisynteesin syiden selvittämiseksi, ja lisäksi sen avulla voidaan arvioida akromegalian tai gigantismin hoidon tehokkuutta.

Kasvuhormonin analyysin yhteydessä tehdään usein insuliinin kaltaisen tekijän analyysi. Jälkimmäinen heijastaa myös kasvuhormonin yli- tai puutetta, mutta sen taso pysyy vakaana koko päivän, mikä tekee siitä kasvuhormonin keskimääräisen pitoisuuden indikaattorin.

Epänormaalin SG:n diagnoosi sisältää usein stimulaatio- ja suppressiotestit, joita käytetään aivolisäkkeen toiminnan ja kasvuhormonitasojen muutosten arvioimiseen.

• Stimulaatiotesti auttaa diagnosoimaan kasvuhormonin puutteen ja hypopituitarismin. Tätä varten potilas ottaa verta laskimosta 10-12 tunnin ruokailusta pidättymisen jälkeen, minkä jälkeen lääkärin valvonnassa injektoidaan suonensisäisesti insuliini- tai arginiiniliuos. Lisäksi verinäytteitä kerätään säännöllisin väliajoin, joista jokaisessa havaitaan somatotrooppisen hormonin pitoisuus sen määrittämiseksi, vaikuttaako insuliini (tai arginiini) aivolisäkkeeseen, tuottaen odotetun hormonin tason. Lisäksi klonidiinia ja glukagonia käytetään kasvuhormonin stimuloimiseen.
• Vaimennustesti auttaa diagnosoimaan ylimääräisen hormonin ja yhdessä muiden verikokeiden ja tuiketutkimuksen kanssa tunnistamaan ja paikantamaan aivolisäkkeen kasvaimia. Tämän testin suorittamiseksi verta otetaan myös 10-12 tunnin ruokailusta pidättymisen jälkeen. Tämän jälkeen potilas nauttii normaalia glukoosiliuosta, jonka jälkeen säännöllisin väliajoin tehdään verikokeita, joissa määritetään somatotrooppisen hormonin pitoisuus, jotta tarkistetaan, onko aivolisäke riittävästi tukahdutettu otetun glukoosiannoksen vaikutuksesta.

Muita testejä käytetään usein aivolisäkkeen toiminnan tarkistamiseen, kuten T4 (tyroksiini), kilpirauhasta stimuloiva hormoni, kortisoli, follikkelia stimuloiva hormoni (FSH), luteinisoiva hormoni (LH) ja testosteroni (miehillä). Ne tehdään yleensä ennen somatotrooppisen hormonin testiä, jotta varmistetaan, että niiden arvot ovat normaalit tai otetut lääkkeet hallinnassa. Esimerkiksi lasten kilpirauhasen vajaatoiminta on hoidettava ennen kasvuhormonin puutoksen testaamista, muuten tulokset voivat olla virheellisen alhaisia. Kasvuhormonin estokokeeseen otettua verinäytettä käytetään myös glukoositutkimukseen, jolla varmistetaan, että tutkitun potilaan keho on riittävästi suppressoitunut nautitusta glukoosiliuoksesta.

Koska fyysinen harjoittelu nostaa yleensä tilapäisesti kasvuhormonin tasoa, joskus sen puute arvioidaan intensiivisen harjoittelun jälkeen.

Somatotrooppisen hormonin ja insuliinin kaltaisen kasvutekijän testaus voidaan määrätä määräajoin lapsille, jotka ovat saaneet keskushermoston sädehoitoa tai sädehoitoa ennen kantasolusiirtoa. Tämä on melko yleistä akuutissa lymfoblastisessa leukemiassa, jossa säteily voi vaikuttaa hypotalamukseen ja aivolisäkkeeseen ja siten vaikuttaa kasvuun.

Milloin tutkimus on suunniteltu?

Kasvuhormonistimulaatiotesti tehdään, jos lapsella on seuraavat kasvuhormonin puutteen oireet:

• kasvun hidastuminen varhaislapsuudessa - kun lapsi on paljon lyhyempi kuin hänen ikäisensä;
• kilpirauhasen diagnostiikka (esimerkiksi vapaan T4:n määritys) osoittaa kilpirauhasen vajaatoiminnan puuttumisen (koska kilpirauhasen vajaatoiminta voi myös hidastaa kasvua);
• fluoroskopia osoittaa luun kasvun viivettä;
• epäillään, että aivolisäkkeen toiminta on vähentynyt.

Aikuisten potilaiden stimulaatiotesti saattaa olla tarpeen kasvuhormonin puutteen tai hypopituitarismin oireiden varalta: luutiheyden väheneminen, väsymys, heikentynyt rasva-aineenvaihdunta, heikentynyt rasitusvastus. Yleensä tehdään ensin muiden hormonien testit sen selvittämiseksi, aiheuttavatko muut sairaudet näitä oireita. Somatotrooppisen hormonin tuotannon puute on melko harvinainen tapaus sekä lasten että aikuisten keskuudessa. Aikuisten hormonipuutos voi johtua geneettisestä taipumuksesta hypotalamuksen tai aivolisäkkeen sairauteen.

Kasvuhormonin estotesti tehdään, jos lapsella on merkkejä jättimäisyydestä tai aikuisella akromegaliasta. Tällainen analyysi voi olla tarpeen myös silloin, kun epäillään aivolisäkkeen kasvainta, joskus testi tehdään yhdessä insuliinin kaltaisen tekijän 1 ja muiden hormonien analyysin kanssa taudin hoidon tehokkuuden seuraamiseksi.

Kasvuhormoni- ja insuliinin kaltaiset tekijä-1-testit voidaan tehdä säännöllisin väliajoin useiden vuosien ajan kasvuhormonin poikkeavuuksien mahdollisen toistumisen seuraamiseksi.

Lähde:
Endokriiniset järjestelmät, urheilu ja fyysinen aktiivisuus.
Käännös englannista / toim. W.J. Kremer ja A.D. Rogola. - E64
kustantamo: Olympus. kirjallisuus, 2008.

Ihmisen rekombinantin somatotrooppisen hormonin (GH) dopingkontrollin suorittamista useiden vuosien ajan pidettiin mahdottomana tehtävänä. Äskettäin on kuitenkin osoitettu, että ainakin kaksi riippumatonta lähestymistapaa mahdollistavat sen selvittämisen, käyttikö urheilija rekombinanttia kasvuhormonia vai ei. Kehitettyjä analyysimenetelmiä testataan parhaillaan ja niiden toivotaan tulevan lähitulevaisuudessa käyttöön virallisena dopingtestinä.

Suurin ongelma on, että toisin kuin erytropoietiini, mikään ehdotetuista menetelmistä ei salli kasvuhormonin määrittämistä virtsasta. Tämä johtuu ensisijaisesti hormonin erittäin alhaisista pitoisuuksista virtsassa, mikä ei salli sitä havaita olemassa olevilla menetelmillä. Lisäksi somatotropiinin erittyminen virtsaan on monimutkainen prosessi, jolle on ominaista huomattava vaihtelu ja joka on edelleen huonosti ymmärretty (Saugy et ai., 1996). Virtsanäytteiden EPO:n tapauksessa käytetty IEF-menetelmä ei sovellu kasvuhormonin analysointiin, koska jälkimmäisessä ei ole glykosylaatiokohtia. Nykyajan tietojen mukaan rekombinanttialkuperää olevat GH-molekyylit ovat lähes täysin identtisiä aivolisäkkeen erittämän GH-molekyylien pääosan kanssa, eikä niiden välillä ole havaittu fysikaalis-kemiallisia eroja.

Glykosylaatiokohtien puuttumisesta huolimatta kasvuhormonia edustaa verenkiertojärjestelmässä molekyylien isoformien seos (Baumann, 1999). Näiden isoformien tutkiminen ei ole edennyt niin pitkälle kuin ihmisen koriongonadotropiinin tapauksessa, mutta viime vuosina on tullut mahdolliseksi tunnistaa joitakin pääkomponentteja. Pääisoformin, jonka molekyylipaino on 22 kDa ja joka koostuu 191 aminohappotähteestä, ohella kvantitatiivisesti toiseksi lyhyempi isoformi, jonka molekyylipaino on 20 kDa, jonka sekvenssissä aminohapot 32- 46 puuttuu (Hashimoto et ai., 1998; Tsushima et ai., 1999; Leung et ai., 2002). STG:stä on myös lyhyempiä muotoja, mutta niitä ei aina havaita eikä niitä ole vielä täysin analysoitu. Jotkut niistä ovat GH-molekyylien hydrolyysin tai hajoamisen tuotteita. GH-isoformit voivat esiintyä monomeereinä, dimeereinä ja multimeereinä, jotka koostuvat identtisistä (homodimeerit) tai erilaisista (heterodimeerit) isoformeista.

Monissa tapauksissa kasvuhormonin vaikutusta ihmiskehoon välittää tekijä, jota kutsutaan insuliinin kaltaiseksi kasvutekijäksi I:ksi (IGF-1), jota tuotetaan pääasiassa maksassa ja myös paikallisesti rustossa, luussa ja monissa muissa kudoksissa, IGF- 1 erittyy verenkiertoelimistöön, jossa se sitoutuu spesifisiin sitoviin proteiineihin (Le Roith et ai., 2001). Niistä arvokkain on IGF:ää sitova proteiini 3 (IGFBP-3) sekä happolabiili alayksikkö (ALS), jonka tuotanto on myös kasvuhormonin hallinnassa. Ainakin IGFBP-3:lle on osoitettu, että tällä proteiinilla voi olla oma vaikutus IGF-1:een sitoutumisesta riippumatta, ja siksi sitä voidaan pitää itsenäisenä peptidihormonina. Yhdessä IGF-1, IGFBP-3 ja ALS muodostavat kolmikomponentin kompleksin, jolla on pidempi elinikä kuin molekyyleillä, jotka muodostavat sen yksin.

Yksi strategioista löytää sopiva testi kasvuhormonin käytön havaitsemiseksi stimulanttina oli arvioida kasvuhormonin farmakodynaamisen vaikutuksen tuotteissa tapahtuvia kvantitatiivisia muutoksia, erityisesti kolmoishormonin komponenttien lukumäärän mahdollista lisääntymistä. kompleksi, joka ylittää tason luonnollisen vaihtelun alueen (Dali et al., 2000). Yksi tällaisen testin eduista olisi, että kasvuhormonin farmakodynaamisen vaikutuksen tuotteiden elinikä ylittää itse hormonin eliniän, mikä mahdollistaa kasvuhormonin havaitsemismahdollisuuden pidennyksen. väärinkäyttö. Kansainvälinen tieteellinen konsortio suoritti joukon laajamittaisia ​​tutkimuksia, joiden tarkoituksena oli tutkia kasvuhormonin farmakodynaamisten vaikutusten tuotteiden käyttäytymistä eri tekijöistä riippuen, mukaan lukien akuutti ja krooninen rasitus, ikä, sukupuoli, etnisyys ja vammat (Wallace ct al., t999). 2000; Longobardi ct ai., 2000; Ehmborg et ai., 2003). Tutkimusten pääsaavutus oli vahvistus tosiasialle, että kasvuhormonin pitkäaikaisessa säännöllisessä käytössä esiintyvien farmakodynaamisten vaikutusten koostumuksessa on tapahtunut muutoksia ja joilla on tunnusomaisia ​​piirteitä, joiden avulla ne voidaan erottaa harjoitusten tai harjoitusten aiheuttamista muutoksista. muut piristeet. Erityisesti luotiin tilastollinen malli, joka kuvaa useiden hormonin farmakodynaamisen toiminnan tuotteiden käyttäytymistä ja ottaa huomioon sukupuolten väliset erot. On myös tärkeää, että määrittävien tekijöiden määrittämisen aikana arvioitiin tähän käytetyt immunomääritysmenetelmät ja määritettiin kullekin niistä spesifiset herkkyysalueet. Kaikki saatavilla olevat kaupalliset menetelmät eivät täytä tutkimuksessa asetettuja vaatimuksia, mikä edellyttää jatkossa käytettävien immuunimääritysjärjestelmien huolellista valintaa. Lisäksi, koska tämä testimenetelmä perustuu erittäin monimutkaiseen tilastolliseen malliin, on tarpeen tiedostaa käytettyjen menetelmien tulosten vaihtelun rajat ja varmistaa, että testeissä käytetään aina identtisiä vasta-aineita. Tämä voi olla ongelma, koska monet immunomääritykset perustuvat tällä hetkellä polyklonaalisten vasta-aineiden käyttöön monoklonaalisten vasta-aineiden sijaan. Polyklonaalisia vasta-aineita ei kuitenkaan voida tuottaa suuria määriä, ja yhden erän päätyttyä ei voida taata, että seuraava erä on identtinen ensimmäisen kanssa. Kaikki tämä mahdollistaa sen ymmärtämisen, miksi kansainväliset antidopingjärjestöt kiinnittävät niin paljon huomiota teknologioiden kehittämiseen käyttökelpoisten monoklonaalisten vasta-aineiden saamiseksi. Kun kaikki metodologiset yksityiskohdat on selvitetty, tämä testausmenetelmä voi olla erittäin tehokas verrattuna EPO-dopingkontrollissa käytettyyn verikokeeseen.

Toinen lähestymistapa on suunnattu STG:n suoraan analysointiin. Toisin kuin aivolisäkkeen erittämän hormonin isoformien kirjo, rekombinanttihormonia edustaa aina yksi muoto, jonka molekyylipaino on 22 kDa. Myös 20 kDa:n molekyylipainon rekombinanttimuodon tuotantoa on kuvattu, mutta tähän mennessä tätä proteiinia on käytetty vain muutamissa kliinisissä kokeissa. Lasten, nuorten ja aikuisten kasvuhormonipuutoksen hoitoon käytettävän rekombinantti somatotropiinin molekyylipaino on 22 kDa, on selvää, että samoja lääkkeitä käytetään stimulantteina urheilussa. Tällainen homogeenisuus tai "heterogeenisuuden puute" hormonin rekombinanttimuodoissa, joka erottaa sen aivolisäkkeen erittämien GH-isoformien luonnollisesta monimuotoisuudesta, muodostaa perustan niin kutsutulle "differentiaaliselle immunomääritysmenetelmälle", jota käytetään dopingkontrollissa yhdistelmä-DNA-tekniikalla. GH (Z. Wu et ai., 1999): 22 kDa:n molekyylipainoisen rekombinantin monomeerisen kasvuhormonin tuominen kehoon johtaa tämän isoformin suhteellisen pitoisuuden lisääntymiseen veressä. Tilanne johtaa endogeenisen hormonin eritys aivolisäkkeessä (Wallace et ai., 2001a). Monoklonaalisten vasta-aineiden seulonta käyttämällä erilaisia ​​endogeenisen ihmisen kasvuhormonin valmisteita mahdollisti kahden immunomäärityksen muunnelman kehittämisen. Ensimmäisessä variantissa immobilisoidut vasta-aineet sitoutuvat pääosin 22 kDa isoformi g kasvuhormoni, ja toisessa - pääasiassa "aivolisäke-alkuperää oleva" somatotropiini, jota edustavat erikokoiset isoformit (Bidlingmaier et al., 2000). Seeruminäytteiden analyysi käyttämällä molempia immunomääritysvaihtoehtoja mahdollistaa 22 kDa:n molekyylipainon omaavan hormonin isoformin suhteellisen sisällön määrittämisen, mutta verrattuna muihin ("kokonaisGH") ja tästä johtuen näytteet, joiden molekyylipaino on epänormaali. korkea 22 kDa GH:n pitoisuus. On vahvistettu, että muutokset kasvuhormonin isoformien kirjossa johtuvat yksinomaan rekombinantin kasvuhormonin käytöstä, kun taas kun eritystä stimuloidaan motorisen toiminnan jälkeen, havaitaan hormonin kaikkien muotojen määrän lisääntymistä (Wallace et al. ., 2001b). Muun muassa alkuperäisen menetelmän herkkyyttä on parannettu merkittävästi (Bidlingmaicr et al., 2003). Tämän mahdollisti uusien monoklonaalisten vasta-aineiden kehittäminen. Tämän ohella kehitettiin joukko riippumattomia vahvistavia testejä, jotka myös perustuivat uusien monoklonaalisten vasta-aineiden käyttöön, joilla on affiniteettia rajattuihin epitooppeihin. Jälkimmäinen on edellytys immunomäärityksen hyväksymiselle dopingkontrollissa: jokainen analyysityyppi on vahvistettava toisella analyysillä, joka on suunnattu kiinnostavan nasmolekyylin vaihtoehtoiseen epitooppiin, joka antaa molekyylin tunnistamiseen tarvittavia lisätietoja.

Differentiaalisen immuunimääritysmenetelmän ominaisuudet rajoittavat sen käytön vain dopingtesteihin - se ei salli koostumuksessa erottaa kuolleiden ihmisten aivolisäkkeestä uutettujen GH-isoformien ja hormonivalmisteiden luonnollista kirjoa. Lisäksi kasvuhormonin äärimmäisen lyhyen puoliintumisajan (noin 15 minuuttia) vuoksi verenkiertoelimessä kasvuhormonin käyttö stimulanttina on rajoitettu 24-36 tuntiin. Ilmeisestikään herkempien menetelmien kehittäminen ei ratkaise tätä rajoitusta, koska on osoitettu, että rekombinanttiproteiinin hajoamisen ja negatiivisen palautejärjestelmän päättymisen jälkeen aivolisäke alkaa jälleen erittää tavanomaista hormoni-isoformien spektriä. . Toisaalta se, että hormonia on otettava päivittäin stimuloivan vaikutuksen saavuttamiseksi, lisää todennäköisyyttä, että doping-urheilija havaitaan suunnittelemattomissa, ei-kilpailuisissa testeissä.

Differentiaalisen immunomääritysmenetelmän käyttö edellyttää myös käytettyjen immunomääritystyyppien kelpoisuuden ehdotonta perusteluja. Lisäksi, koska suhde lasketaan, on tarpeen määrittää tarkasti yksittäisten menetelmien tulosten toistettavuusaste ja itse suhde, ottaen huomioon tulosten vaihtelun potentiaalinen vaikutus tulosten suuruuteen. laskettu suhde. Tulosten vaihtelua voidaan vähentää merkittävästi, jos molemmissa määrityksissä käytetään samaa mikrotiitterilevyä immobilisoiduilla vasta-aineilla: puolet levystä on päällystetty monoklonaalisilla vasta-aineilla GH-isoformille, jonka molekyylipaino on 22 kDa, ja toinen puoli monoklonaalisilla vasta-aineilla ihmisen kokonaiskasvuhormonille. Kun kalibraattorit, kontrollit ja näytteet on lisätty levyn kuhunkin puolikkaaseen, kokonaisuus peitetään samoilla havaitsevilla monoklonaalisilla vasta-aineilla. Tämä menetelmä immunomääritysten suorittamiseksi voi merkittävästi vähentää vaihtelua, jota väistämättä tapahtuu, kun näytemateriaali on jakautunut epätasaisesti kahden eri levyn välillä (Bidlingmaicr et ai., 2000).

Kasvuhormonin erityksen stimulaatiotesti tai kasvuhormonin puutostesti (kasvuhormonin alhainen pitoisuus veressä) on tarkoitettu kasvuhormonin alhaisen tason havaitsemiseen. Tämä testi suoritetaan yleensä sen jälkeen, kun potilaalle on annettu GH-lääke.
Tämän analyysin avulla havaitaan myös kasvuhormonia tuottavan elimen aivolisäkkeen toimintahäiriö.

Koulutus

Ei ole monia varotoimia, joihin tulisi ryhtyä ennen tätä testiä: on suositeltavaa, että kerrot lääkärillesi, jos sinulla on maksasairaus tai munuaissairaus ja käytät muita lääkkeitä ja että et syö tai liiku 12 tuntiin ennen testiä. menettelyä.

Lääkärisi voi myös pyytää sinua välttämään tiettyjen lääkkeiden käyttöä muutaman päivän ajan.

Syitä analysointiin

Toimenpide suoritetaan seuraavasti: Ensin verinäyte otetaan verinäyte laskimosta aamulla, sitten katetri työnnetään laskimoon ja suoritetaan infuusio arginiinia, aminohappoa, joka stimuloi kasvuhormonin tuotantoa. Tämän jälkeen puolen tunnin tauolla otetaan verinäyte katetrin läpi. Näytteitä tulee ottaa yhteensä viisi.

tuloksia

Arginiini lisää GH-tasoja. Kasvuvauhti on seuraava:

• Miehet - yli 10 ng / ml. (yli 10 mcg / l).
• Naiset - yli 15 ng / ml. (yli 15 mcg/l).
• Lapset - yli 48 ng / ml. (yli 48 mcg / l.).

Jos kasvuhormonin taso ei nouse arginiini-infuusion jälkeen, sen eritys vähenee. Jos se on alle 10 ng / ml, sinun on testattava uudelleen.

Epätavallisen alhaiset testitulokset viittaavat kasvuhormonin puutteeseen. Aikuisilla tämä voi aiheuttaa sairauden, joka tunnetaan nimellä panhypopituitarism.

Somatotropiinin taso muuttuu päivän aikana. Se on maksimi yöllä.

Video