Естественно возникает вопрос: где же хранится вирус, где находится тот резервуар, откуда появляются его новые разновидности? Вопрос этот очень важный и ученые прилагают много усилий для того, чтобы найти ответ на него.

Определение резервуаров инфекции позволило найти пути к существенному снижению или даже ликвидации ряда заболеваний. Так, например, оказалось, что основным резервуаром инфекций при чуме, туляремии, бешенстве являются дикие животные и грызуны. Ликвидация природных очагов этих инфекций, создание эффективных кордонов против завоза больных животных оказались достаточными для того, чтобы значительно снизить или полностью ликвидировать эти инфекционные заболевания.

Не являются ли животные резервуаром и при гриппе? Эта мысль возникла еще в 1931 году, когда от больных свиней был выделен вирус, схожий с вирусом гриппа человека. К этой мысли ученые вернулись после 1957 года. При исследовании гриппоподобных заболеваний домашних животных и птиц от лошадей, свиней, овец и уток вновь были выделены вирусы, по некоторым свойствам родственные вирусам гриппа типа А. Но все они существенно различались между собой и не могли быть полностью отождествлены ни с одним из вирусов гриппа человека.

Дальнейшие наблюдения показали, что гриппоподобные заболевания животных и птиц встречаются довольно редко и животные не являются источником заболевания гриппом людей. Наука располагает данными, свидетельствующими, что могут быть обратные явления — перенос гриппозного вируса от людей на свиней и его дальнейшее распространение среди них. Таким образом, некоторые животные являются своего рода копилками вируса.

Однако есть все основания утверждать, что источником инфекции и резервуаром вирусов при гриппе является лишь сам человек.

Систематически проводимые исследования показали, что в крупных городах и населенных пунктах заболевания гриппом А и В наблюдаются круглый год, хотя в межэпидемическое время, особенно в летний период, они составляют незначительный процент от общего числа наблюдающихся острых заболеваний дыхательных путей.

Эти отдельные заболевания, тянущиеся цепочкой от случая к случаю, и сохраняют вирус в периоде между отдельными эпидемическими волнами. Более того, именно в эти внешне спокойные межэпидемические периоды образуются новые разновидности вируса.

По каким законам происходит изменение гриппозного вируса? Является ли оно беспредельным или имеет периодичность и ранее существовавшие разновидности могут появиться вновь? Свет на эти вопросы пролили недавно открытые явления. Как уже говорилось ранее, после перенесенного заболевания в крови человека появляются антитела к той разновидности вируса, которая вызвала заболевание. Эти антитела являются как бы следами вируса. По ним можно определить, какой тип или разновидность его вызвали заболевание. Обычно считалось, что антитела сохраняются в крови не более года. Однако сейчас установлено, что антитела, выработанные в ответ на первое в жизни человека заболевание гриппом, сохраняются до глубокой старости. При этом количество первородных антител будет всегда больше, чем антител к любой другой разновидности гриппа, с которой встречался человек в последующие годы.

Зная год рождения человека и тип вируса, к которому у него имеется большее количество антител, можно определить, какая разновидность гриппа вызывала заболевание в детстве.

Систематическое проведение такого рода исследований позволило ученым установить периодичность появлений различных разновидностей вируса и продолжительность циркуляции их среди населения. Эти наблюдения дают основания утверждать, что изменчивость вируса гриппа не хаотична, не беспредельна, а имеет свои закономерности, которые могут быть раскрыты и использованы для борьбы с заболеванием.

1.3. ЭПИДЕМИОЛОГИЯ

Организация мониторинга заносов и распространения гриппа птиц в природных условиях на территории Российской Федерации

Дата введения: с момента утверждения

1. РАЗРАБОТАНЫ Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Г.Г.Онищенко, Е.Б.Ежлова, Г.Ф.Лазикова); ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора (И.Г.Дроздов, А.Н.Сергеев, А.П.Агафонов, А.М.Шестопалов, Е.А.Ставский, А.Ю.Алексеев, О.К.Демина, Е.Б.Шеметова, А.А.Сергеев, Ю.В.Туманов, В.А.Терновой); ФГУЗ ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (Г.А.Шипулин, А.Т.Подколзин, С.Б.Яцышина); ФГУЗ РосНИПЧИ "Микроб" Роспотребнадзора (А.В.Топорков, С.А.Щербакова, Н.В.Попов, В.П.Топорков, А.А.Слудский, И.Н.Шарова, М.Н.Ляпин, А.Н.Матросов, В.Н.Чекашов, Т.Ю.Красовская); ГУ НИИ гриппа РАМН (О.И.Киселев, Л.М.Цыбалова, Т.Г.Лобова).

3. УТВЕРЖДЕНЫ И ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 26 декабря 2008 г. N 01/15701-8-34

Список сокращений

ВГПА - вирус гриппа птиц типа А

Биобезопасность - биологическая безопасность

ИФА - иммуноферментный анализ

МФА - метод иммунофлуоресцирующих антител

ОТ-ПЦР - метод обратной транскрипции - полимеразной цепной реакции

РТГА - реакция торможения гемагглютинации

ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения

1. Область применения

1. Область применения

1.2. Настоящие методические рекомендации предназначены для специалистов органов и учреждений Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека и других организаций независимо от организационно-правовой формы собственности.

2. Общие положения

2.1. Целью введения настоящих методических рекомендаций является регламентация мероприятий по эпизоотологическому мониторингу за гриппом птиц в природных условиях. Комплекс мероприятий по мониторингу включает в себя организацию сбора, хранения и транспортирования материала, проведение лабораторных исследований, а также обеспечение биологической безопасности проводимых работ. Основной задачей мероприятий по мониторингу за гриппом птиц является выявление заносов возбудителя и распространения этой инфекции в популяциях диких животных околоводного комплекса с целью проведения адекватных противоэпидемических и профилактических мероприятий среди людей.

2.2. Организация и проведение мероприятий по эпизоотологическому мониторингу гриппа птиц в природных условиях на территории Российской Федерации осуществляется органами и учреждениями Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека во взаимодействии с органами и учреждениями Минсельхоза и Россельхознадзора.

2.3. Объем, характер и направленность проведения профилактических мероприятий среди людей определяются результатами эпизоотологического обследования и прогнозом эпизоотической и эпидемической ситуации по гриппу птиц в конкретных субъектах Российской Федерации.

2.4. Управления Роспотребнадзора по субъектам Российской Федерации, на территории которых обнаружены эпизоотии гриппа птиц, совместно с органами исполнительной власти субъектов, органами Россельхознадзора, МЧС и другими заинтересованными службами и ведомствами планируют проведение мероприятий, направленных на предупреждение распространения вируса среди домашней птицы, на птицефабриках и среди людей, а также направленных на минимизацию последствий от возможных вспышек, если они уже возникли, и их подавление. Комплексный план профилактических мероприятий по гриппу птиц составляют управления Роспотребнадзора совместно с органами управления здравоохранением субъектов Российской Федерации, Россельхознадзором и другими заинтересованными службами и ведомствами сроком не менее чем на 2 года с ежегодным корректированием.

2.5. Прогноз эпидемиологической и эпизоотологической ситуации по гриппу птиц на территории Российской Федерации составляется научно-методическим центром по референс-диагностике и изучению высокопатогенных штаммов вируса гриппа - НМЦГ (ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора). Прогноз составляется на основе предоставляемых в НМЦГ заключений об эпидемиологической и эпизоотологической обстановке по гриппу птиц в России (1-2 раза в год), подготовленных Центром экологии и эпидемиологии гриппа - ЦЭЭГ (ГУ НИИ вирусологии им. Д.И.Ивановского РАМН) и Федеральным Центром по гриппу - ФЦГ (ГУ НИИ гриппа РАМН). Эти заключения формируются на основе представляемой в адрес ЦЭЭГ и ФЦГ информации от курируемых ими соответствующих учреждений (противочумные станции и опорные базы, определенные Приказом Роспотребнадзора от 31.03.05 N 373). Сформулированный обобщенный прогноз и заключения об эпидемиологической и эпизоотологической обстановке в России направляются в Федеральную службу по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Данные прогноза эпидемиологической и эпизоотологической ситуации по гриппу птиц на территории Российской Федерации передаются в ВОЗ, на информационный сайт НМЦГ, в Национальные центры по гриппу стран СНГ и учреждения-разработчики (ЦЭЭГ и ФЦГ) после согласования с Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.

2.6. Консультативно-методическая и практическая помощь управлениям Роспотребнадзора по субъектам Российской Федерации по вопросам профилактики и проведения противоэпидемических мероприятий среди людей на территориях, пораженных эпизоотией гриппа птиц, осуществляется НМЦГ, ЦЭЭГ и ФЦГ, Противочумным центром, региональными центрами по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней I-II групп патогенности и Центров индикации и диагностики возбудителей опасных инфекционных болезней, созданных на базе противочумных учреждений.

3. Обоснование необходимости осуществления мониторинга за гриппом птиц

Необходимость проведения мониторинга за гриппом птиц определяется реальной опасностью заносов возбудителя этого заболевания перелетными птицами и формирования очагов инфекции во многих регионах Российской Федерации, а также возникновения эпизоотий среди домашних птиц и потенциальная способность вируса гриппа птиц вызывать заражение человека.

С 1997 г. отмечаются эпизоотии среди диких и домашних птиц, вызванных высокопатогенными вирусами гриппа А субтипа H5N1, способными вызывать также тяжелые заболевания среди людей с высокой летальностью. В последние годы происходит расширение ареала вируса гриппа птиц, увеличение видового спектра носителей, повышение вирулентности циркулирующих штаммов. Способность выживать в окружающей среде в течение длительного времени, особенно при низких температурах, обусловливает расширение ареала распространения вируса и необходимость проведения мероприятий по мониторингу на обширных территориях Российской Федерации.

Случаи передачи вируса гриппа А субтипа H5N1 от человека к человеку не зарегистрированы, хотя семейные очаги заболеваний отмечались неоднократно. Однако совместная циркуляция штаммов вирусов гриппа человека и птиц повышает вероятность события реассортации и возникновения пандемичного варианта вируса гриппа.

Федеральная служба по ветеринарному и фитосанитарному надзору (Россельхознадзор) контролирует обстановку по птичьему гриппу, решая в первую очередь проблемы профилактики эпизоотических вспышек среди домашних животных. Вместе с тем эпизоотологический мониторинг гриппа птиц в природных биотопах в настоящее время проводится в недостаточном объеме.

4. Организация эпизоотологического мониторинга за гриппом птиц в природных условиях

4.1. Эпизоотологические и эпидемиологические особенности гриппа птиц

4.2. Цель и задачи эпизоотологического мониторинга за гриппом птиц в природных условиях

Основной целью эпизоотологического мониторинга за гриппом птиц является своевременное выявление случаев заноса вируса гриппа птиц в природные биотопы и отслеживание особенностей распространения этой инфекции среди диких животных околоводного комплекса.

Для обеспечения цели необходимо решить следующие задачи:

выбрать географические точки для мониторинга с составлением кадастра водоемов, где скапливается большое количество птиц лимнофильного комплекса для отдыха, гнездования и кормежки;

организовать выездные мобильные бригады для сбора проб материала на исследование;

установить видовой состав, численность, особенности размещения потенциальных носителей ВГП в биотопах околоводного комплекса;

осуществлять сбор проб полевого материала для лабораторного исследования на наличие вируса гриппа птиц, обработку и оперативный анализ полученных результатов;

изучить эпизоотологический статус отдельных видов и групп птиц и других животных околоводных биоценозов;

изучить параметры эпизоотического процесса в очагах гриппа птиц (сезонные особенности, площади эпизоотии, видовой спектр зараженных животных и др.);

оценить степень опасности инфицирования различных типов водоемов, располагающихся в непосредственной близости от сельских населенных пунктов и крупных птицеводческих хозяйств;

составить список населенных пунктов, где возможно заражение домашних животных гриппом птиц от диких околоводных птиц;

разработать мероприятия по предупреждению эпизоотических вспышек и заболеваний людей;

проводить санитарно-просветительную и разъяснительную работу среди местного населения;

составлять прогнозы развития ситуации;

организовать оповещение органов здравоохранения и местных органов исполнительной власти о результатах эпизоотологического обследования территорий на наличие очагов вируса гриппа птиц и прогнозе развития эпидемической ситуации.

4.3. Тактика и методы эпизоотологического мониторинга за гриппом птиц в природных условиях

Основой эпизоотологического мониторинга за гриппом птиц в природных условиях является обследование водных и околоводных биоценотических комплексов, которое осуществляется в плановом порядке. Поиск возбудителя гриппа птиц должен проводиться, в первую очередь, в околоводных биотопах, расположенных как в местах концентрации и гнездования, так и вдоль, и внутри межконтинентальных трасс сезонных перелетов или кочевок птиц, относящихся, прежде всего, к отрядам гусеобразных, ржанкообразных, поганкообразных, веслоногих, голенастых, журавлеобразных, голубеобразных, куриных, воробьиных. При этом участки для сбора материала выбираются вблизи и (или) на территории населенных пунктов и мест рекреации, а также на территориях, где отмечался падеж птиц от гриппа и случаи заболевания людей. Здесь же подбирают и ключевые участки (пункты долговременного мониторинга - ПДМ), где исследования будут проводиться в течение нескольких сезонов. Каждый участок обследуют минимум 3 раза в год (в период весенних миграций, в гнездовой и послегнездовой периоды). По эпидпоказаниям проводят экстренные дополнительные эпизоотологические обследования.

Предпосылкой для начала эпизоотологического обследования околоводных биотопов является начало весенней миграции птиц околоводного комплекса, информация о случаях падежа среди болотных, озерных, речных птиц.

Эпизоотическая ситуация оценивается на основании эпизоотологического обследования, при котором регистрируется состояние численности фоновых видов животных околоводных биотопов, и по результатам лабораторных исследований, подтверждающих наличие возбудителя гриппа птиц в различных объектах. На основании этих данных дается мотивированное заключение об опасности эпизоотии.

При эпизоотологическом обследовании на грипп птиц в естественных природных биоценозах необходимо обращать внимание на водоемы, где скапливаются одиночные, стайные и колониальные птицы. Особенно на непроточные пресные или слабоминерализованные водоемы с обилием прибрежно-водной и кустарниковой растительности, где имеются оптимальные условия для укрытий, отдыха, кормежки и гнездования птиц. При выборе мест обследования и определении состава и количества проб руководствуются особенностями гидрографической сети обследуемой местности: расположением водоемов, их размерами. В первую очередь контролируются озера, заболоченные низины, пруды, заливы, лиманы, ерики, плавни и др., располагающиеся в непосредственной близости от сельских населенных пунктов.

В процессе эпизоотологического обследования осуществляются наблюдения за погодными условиями, фенологическими явлениями, проводятся учеты птиц, характер их размещения, численности и активности. Необходимо выявлять и отслеживать сроки, длительность и трассы их массовых сезонных перелетов и кормовых кочевок. При поиске очагов гриппа птиц обращают внимание на внешние признаки эпизоотии у диких птиц, особенно отмечая резкое снижение численности и активности пернатых, изменения в их поведении на водоемах, появление вялых особей, взъерошенности перьев, малоподвижность и др. Учитывая высокую чувствительность птенцов к вирусу гриппа, больных особей вероятнее всего выявить в выводковый период.

Основными объектами при сборе проб для лабораторного анализа являются водоплавающие и околоводные птицы: гуси, лебеди, утки, кулики, чайки и крачки, цапли и пастушковые. Для получения полной информации следует добывать и других птиц, обитающих на водоемах, включая дневных хищников (соколообразных) и воробьиных. Обязательно исследование птиц синантропных видов: голубей, сорок, ворон и воробьев. Все павшие птицы, обнаруженные на водоеме или в прибрежной зоне, обязательно являются объектами сбора и лабораторного анализа. Необходимо отлавливать также мелких млекопитающих, обитающих по берегам водоемов: водяную полевку, ондатру, мышей, землероек и др.

Сроки и продолжительность экспедиционных полевых работ определяются погодным режимом, фенологическими явлениями года, особенностями экологии птиц. Оптимальными сроками для сбора материала при изучении гриппа птиц следует считать периоды массовых сезонных миграций перелетных птиц весной и осенью (апрель, сентябрь), а также гнездовой и выводковый периоды от появления птенцов до их подъема на крыло (май-июль).

На предварительном этапе, перед выездом в поле, осуществляется изучение картографических материалов, приобретаются топографические, гидрографические, геоботанические или ландшафтные карты и схемы масштабов 1:25000-1:200000. На основании этих документов составляются календарно-территориальные планы и графики работы, намечаются места стоянок и маршруты движения зоологических групп.

Эпизоотологическое обследование осуществляется путем последовательного радиального объезда территории. Маршруты, последовательность переездов, места, количество и длительность стоянок определяются в зависимости от обстановки, характера местности, условий работы, удобства подъездов и транспортирования собранных проб в лабораторию.

В обязанности экспедиционной группы вменяется также наблюдение за населением: его численностью, хозяйственной деятельностью и характером пребывания на водоемах. Особое внимание обращается на перемещение сельскохозяйственных рабочих, охотников, рыбаков, туристов и отдыхающих в период возможных ухудшений обстановки по гриппу птиц. Необходимо проводить активную разъяснительную и санитарно-просветительную работу среди местного и временного населения, тесно контактируя с представителями местных органов здравоохранения, власти, милиции, представителями ветеринарной службы.

Минимальный состав полевой группы: орнитолог, териолог, вирусолог, эпидемиолог, лаборант, водитель, повар. Отстрел птиц можно проводить на договорной основе силами специальной бригады охотников.

При эпизоотологическом обследовании используют общепринятые зоологические и экологические методы, регламентированные действующими нормативными документами (например, МУ 3.1.1029-01).

4.4. Правила сбора, хранения и транспортирования материала для лабораторного исследования

Все работы по сбору, хранению и транспортированию полевого материала, подозрительного на содержание вируса гриппа птиц типа А (субтипы Н5 и Н7), проводят в соответствии с действующими СП 1.2.036-95 и МУ 3.1.1027-01 . Работу по сбору полевого материала проводят в сезонной защитной одежде, дополненной респиратором, защитными очками и резиновыми перчатками (прилож.6 СП 1.3.1285-03).

Для лабораторного исследования из природных биотопов берут:

птиц, птенцов;

яйца птиц;

фекалии птиц и (или) мазок из клоаки и трахеи;

мелких млекопитающих околоводных биотопов;

воду и ил в местах гнездований.

Добытых птенцов, мелких птиц и млекопитающих (живых и агонирующих особей предварительно умерщвляют с помощью корнцанга) помещают в мешочки из плотной белой ткани (каждое животное в отдельный мешочек), края мешочков два раза подворачивают и туго завязывают. Используют мешочки рубцом наружу. Их снабжают этикетками с указанием даты, точного адреса, стации, вида животного, фамилии сборщика. Для транспортирования тканевые мешочки с тушками животных помещают в клеенчатый мешок.

У крупных птиц берут мазок из клоаки и отсекают голову с участком шеи. Голову помещают в отдельный клеенчатый мешок, который снабжают этикеткой.

Условия хранения . При температуре от 2 до 8 °С - в течение суток, при необходимости длительного хранения животных вскрывают, органы и ткани замораживают при температуре ниже минус 40 °С.

Условия транспортирования . Тушки животных и головы - в течение суток при температуре от 2 до 8 °С. Органы - в замороженном виде в сосуде Дьюара или термоконтейнере с сухим льдом.

Мазки из клоаки берут сухими стерильными зондами с ватными тампонами. После забора материала тампон (рабочую часть зонда) помещают в стерильную одноразовую микропробирку с 500 мкл стерильного 0,9%-го раствора натрия хлорида или фосфатного буфера. Конец зонда отламывают или отрезают с расчетом, чтобы он позволил закрыть крышку пробирки. Пробирку с раствором и рабочей частью зонда закрывают и ставят в штатив, который затем помещают в термоконтейнер с охлаждающими элементами.

Условия хранения . При температуре от 2 до 8 °С - в течение 3 сут. При необходимости длительного хранения замораживают материал при температуре ниже минус 40 °С.

Условия транспортирования . При температуре от 2 до 8 °С - в течение 3 сут. В замороженном виде - в сосуде Дьюара или термоконтейнере с сухим льдом.

Если птицу необходимо оставить живой (представители редких видов ), у нее после отлова берут мазки из клоаки.

Яйца птиц забирают из гнезда (не более 50% кладки), маркируют и помещают в пластиковые емкости с углублениями для яиц, перекладывая ватой. Емкости помещают в металлический контейнер и доставляют в лабораторию.

Условия хранения . В течение 3 сут хранят при температуре от 2 до 8 °С. При необходимости длительного хранения содержимое яиц переносят в стерильные пластиковые флаконы с завинчивающимися крышками и замораживают при температуре ниже минус 40 °С.

Условия транспортирования . В течение нескольких часов после сбора - при температуре окружающей среды. В течение 3 сут - при температуре от 2 до 8 °С. Содержимое яиц - в замороженном виде при температуре ниже минус 40 °С в термоконтейнере с сухим льдом.

Фекалии птиц (4-5 г) собирают одноразовыми лопатками (шпателями) в стерильные пластиковые контейнеры (пластиковые флаконы с завинчивающимися крышками).

Условия хранения . При температуре от 2 до 8 °С - в течение 3 сут, при температуре минус 40 °С - 30 дней.

Условия транспортирования . При температуре от 2 до 8 °С - в течение 3 сут. Замороженный материал - в термоконтейнере с охлаждающими элементами при температуре минус 70 °С.

Воду и ил собирают в местах гнездовий в прибрежной зоне. Ил (5-10 г) собирают черпаками и переносят в стерильные пластиковые флаконы с завинчивающимися крышками. Воду в объеме 1 л собирают в стерильные пластмассовые бутылки с завинчивающимися крышками. Контейнеры и бутылки маркируют и помещают в металлический контейнер с поглощающим материалом, количество которого должно быть достаточным для адсорбции содержимого в случае нарушения целостности транспортной тары.

Условия хранения . При температуре от 2 до 8 °С.

Условия транспортирования

При заборе проб органов используют стерильный хирургический инструмент (ножницы, скальпели, пинцеты) и стерильную посуду.

Внутренние органы (фрагменты трахеи, легких, селезенки, мозга, синусы, воздухоносные мешки, кишечник) от забитой или павшей птицы, птенцов, а также мелких млекопитающих получают при вскрытии животных. Перед вскрытием тушку погружают в дезинфицирующий раствор (5% хлорамин Б) на 20-30 с. При взятии проб органов животных место будущего разреза обрабатывают 5%-м раствором йода или 70%-м раствором этилового спирта и стерильными инструментами разрезают кожу, мышцы брюшной стенки или кости черепа. Разрез стенки брюшной полости делают "фартуком", доводя боковые линии разреза по ребрам выше уровня сердца, и откидывают образовавшийся лоскут, чтобы обнажить внутренние органы. Перед взятием головного мозга срезают всю затылочную часть черепа. С помощью второго набора инструментов отсекают кусочки внутренних органов размером от небольшой горошины до лесного ореха, над пламенем горелки укладывают пробы в стерильные одноразовые пластиковые пробирки или контейнеры, герметично закрывают.

Условия хранения . Замораживают при температуре ниже минус 40 °С.

Условия транспортирования . В замороженном виде - в сосуде Дьюара или термоконтейнере с сухим льдом.

Мазки-отпечатки , полученные со слизистой оболочки верхних дыхательных путей (лучше) и внутренних органов, готовят на чистых обезжиренных эфиром предметных стеклах, к которым прижимают слизистые или свежие срезы органов. Препараты высушивают на воздухе и фиксируют в течение 20 мин в охлажденном от 2 до 8 °С химически чистом ацетоне. Помещают в штативы для предметных стекол (на ребро). Делают пометку, что мазки фиксированы.

Условия хранения . При температуре от 2 до 8 °С в течение недели, при температуре минус 20 °С - до 6 мес.

Условия транспортирования . При температуре от 2 до 8 °С.

Температура ниже минус 40 °С обеспечивается в сосуде Дьюара, наполненном жидким азотом (минус 196 °С) или в термоконтейнере с сухим льдом (минус 70 °С).

Транспортирование образцов осуществляют в соответствии с СП 1.2.036-95 . Термоконтейнер и сосуд Дьюара обертывают бумагой (обшивают материалом), ошнуровывают, опечатывают и транспортируют в лабораторию с нарочным. К доставляемому материалу прилагают сопроводительное письмо, акт упаковки. На термоконтейнере и сосуде Дьюара должен быть особый знак (ярлык с отметкой) "Опасно! Не открывать во время перевозки". Если предполагается хранение и транспортирование материала в сосуде Дьюара или в термоконтейнере с сухим льдом, для забора материала используют герметичные пластиковые контейнеры, устойчивые к низким температурам, или криопробирки. Сосуды Дьюара и контейнеры с сухим льдом запрещается закрывать герметически, чтобы не препятствовать выходу медленно испаряющихся азота или углекислоты.

Перед выездом в полевые условия сосуды Дьюара должны быть проверены в лаборатории на соответствие паспортным данным и пригодность для эксплуатации и перевозки. При заправке, погрузке, выгрузке и переноске сосудов Дьюара необходимо иметь обычную спецодежду, обувь и брезентовые рукавицы, чтобы в случае разлива или разбрызгивания азота исключить возможность попадания его на открытые части тела. При транспортировании сосуды Дьюара должны быть тщательно закреплены, чтобы исключить опрокидывание, разбрызгивание или разлив азота.

Допускается только однократное замораживание и оттаивание любого материала.

5. Методы лабораторных исследований

Лабораторные исследования проводят в соответствии с действующими санитарно-эпидемиологическими правилами СП 1.3.1285-03 , регламентирующими работу с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности), МУК 4.2.2136-06 "Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высоковирулентными штаммами вируса гриппа птиц типа А (ВГПА).

Метод флуоресцирующих антител (МФА)

Для МФА используют фиксированные мазки-отпечатки органов животных и слизистых оболочек. Реакцию проводят в соответствии с инструкцией к диагностическому препарату "Флуоресцирующие иммуноглобулины для ранней дифференциальной диагностики гриппа А (Н5)", выпускаемого в ООО "Предприятие по производству диагностических препаратов" ГУ НИИ гриппа РАМН (г.Санкт-Петербург).

В каждом мазке просматривают не менее 20-25 полей зрения.

Оценку степени яркости свечения вирусных антигенов, окрашенных люминесцирующими иммуноглобулинами, проводят по общепринятой шкале:

++++ (4+) - яркая флуоресценция внутри клеток тканей;

+++ (3+) - умеренная флуоресценция внутри клеток тканей;

++ и + (2+ и 1+) - слабая флуоресценция внутри (или вне) клеток тканей.

Положительным результатом иммунофлуоресцентного исследования является обнаружение в препарате не менее 5-8 клеток ткани органа, имеющих характерные включения со специфической флуоресценцией на три и четыре плюса.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Молекулярно-генетические исследования проводят в соответствии с действующими нормативными документами: МУ 1.3.1794-03 "Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного микроорганизмами I-II групп патогенности"; Рекомендациями ВОЗ по обнаружению вируса гриппа птиц субтипа H5N1 в образцах от людей с подозрением на заболевание (ВОЗ, Женева, август 2007); Инструкцией по применению тест-системы для выявления РНК вируса гриппа А и идентификации субтипов Н5 и Н7 методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (например, наборы "АмплиСенс Influenza virus A H5N1-FL" или "ГРИПП", производство ЦНИИ эпидемиологии Роспотребнадзора).

Набор "ГРИПП" позволяет выявлять РНК вируса гриппа А и идентифицировать субтипы Н5 и Н7 в материале от павших и больных животных и объектах окружающей среды. Материалом для исследования являются: помет, мазки из клоаки и трахеи, внутренние органы (фрагменты трахеи и легких, селезенка, мозг), вода, смывы с яиц и белок яйца. Тест-система включает комплекты реагентов: для экстракции РНК, для получения кДНК на матрице РНК, для амплификации участков кДНК (проведения ПЦР) и детекции фрагментов амплификации в форматах электрофоретического анализа и гибридизационно-флуоресцентной детекции (FEP и FRT), а также содержит контрольные образцы.

Набор "АмплиСенс Influenza virus A H5N1-FL" позволяет выявлять РНК вируса гриппа А и идентифицировать субтип H5N1 в материале от павших и больных животных и объектах окружающей среды. Материалом для исследования являются: помет, мазки из клоаки и трахеи, внутренние органы (фрагменты трахеи и легких, селезенка, мозг), вода, смывы с яиц и белок яйца. Тест-система включает комплекты реагентов: для экстракции РНК, для получения кДНК на матрице РНК, для амплификации участков кДНК (проведения ПЦР) и детекции фрагментов амплификации в форматах гибридизационно-флуоресцентной детекции (FEP и FRT), а также содержит контрольные образцы.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Для исследования используют индивидуальные сыворотки крови птиц без признаков гемолиза и бактериальной контаминации объемом 0,3-0,5 мл. Постановку реакции осуществляют согласно временному наставлению по применению набора для выявления антител к вирусу гриппа птиц (ВГП) иммуноферментным анализом (например, "Набор для выявления антител к вирусу гриппа птиц методом ИФА" пр-во НПП "АВИВАК").

Учет результатов проводят на спектрофотометре при длине волны 492 нм (при использовании ОФД) или 450 нм (при использовании ТМБ).

Все этапы инкубации проводят в течение 30 мин при температуре 20-30 °С.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)

Выявление специфических антител к вирусу гриппа птиц в сыворотках крови птиц осуществляют микрометодом в соответствии с наставлением по применению "Набора антигенов и сывороток для диагностики гриппа птиц в реакции торможения гемагглютинации (РТГА)".

Учет реакции проводят визуально после полного оседания эритроцитов в контрольных лунках (в виде "пуговки"). Титром антител в сыворотке считают наибольшее ее разведение, в котором полностью отсутствует агглютинация эритроцитов антигеном вируса гриппа.

Выявленные в ходе лабораторного исследования положительные пробы отправляют для выделения вируса и его идентификации в ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора.

6. Обеспечение требований биологической безопасности при проведении эпизоотологического мониторинга за гриппом птиц в природных условиях

Для обеспечения биологической безопасности работ при проведении эпизоотологического мониторинга в потенциальных природных очагах гриппа птиц необходимо учитывать следующее:

в проведении обследования участвуют сотрудники противочумных учреждений, а также могут привлекаться сотрудники других медико-биологических организаций и институтов, имеющих допуск к работе с ПБА I-II групп патогенности. Вспомогательный персонал (водители, стрелки и т.п.) допускается к работе после проведения инструктажа;

весь состав отряда или экспедиции должен быть ознакомлен с требованиями биологической безопасности при работе с возбудителями природно-очаговых инфекций, циркулирующих на данной территории. Ответственным за соблюдение этих требований при проведении отлова диких животных и сбора полевого материала является руководитель (начальник) эпидемиологического отряда (экспедиции);

любой материал считается потенциально опасным в отношении возможного содержания возбудителей природно-очаговых болезней, свойственных той ландшафтной зоне, в пределах которой он собран;

рекогносцировочное обследование местности, установку орудий лова осуществляют в специальной одежде (комбинезон или противоэнцефалитный костюм, сапоги);

проверку выставленных орудий лова и сбор полевого материала проводят в рабочей одежде, дополненной фартуками и нарукавниками из водонепроницаемой ткани (пленки), резиновыми перчатками (2 пары) [по окончании работ фартуки, нарукавники и перчатки дезинфицируют];

для защиты органов дыхания используют одноразовые ватно-марлевые повязки или противопылевые респираторы (предпочтение отдается респираторам "Лепесток" или респираторам класса не ниже FFP2);

защиту органов зрения осуществляют плотно прилегающими очками;

дезинфекцию орудий лова и других инструментов проводят ежедневно по окончании работы путем прогревания на солнце (в летнее время), кипячения, обработки дезинфицирующими растворами с последующим проветриванием, ящики и отсадники обрабатываются дезинфицирующими растворами;

разбор полевого материала, вскрытие животных проводят в противочумном костюме I типа (защита органов дыхания аналогична п.6 настоящего раздела, особенности забора материала и подготовки проб для транспортировки в лабораторию изложены в разделе 4.4 "Сбор полевого материала для лабораторного исследования");

по окончании работ, приведенных в п.9, инструменты и защитную одежду дезинфицируют (см. прилож.4), использованные наконечники, пипетки обеззараживают погружением в 6%-й раствор перекиси водорода на 60 мин, дозаторы обеззараживают двукратным протиранием с интервалом 15 мин 6%-м раствором перекиси водорода (экспозиция 120 мин);

остатки полевого материала, не подлежащего лабораторному исследованию, сжигают или обеззараживают автоклавированием, образовавшиеся отходы помещают в специально вырытые ямы, которые затем закапывают;

транспортировку материала в диагностическую лабораторию осуществляют транспортом экспедиции;

участники экспедиции подвергаются ежедневной термометрии, по окончании работ устанавливается обсервация сроком 7 дней;

аптечка экстренной профилактики должна быть укомплектована в соответствии с СП 1.3.1285-03

7. Обеспечение биологической безопасности при проведении лабораторных диагностических исследований

7.1. Проведение работ, не связанных с накоплением вируса, образованием аэрозолей инфицированного материала (окраска мазков, постановка серологических реакций с необеззараженным, диагностическим материалом, серологические исследования с необеззараженным материалом, выделение РНК) осуществляют в противочумном костюме IV типа, дополненном ватно-марлевой повязкой (респиратором) и двумя парами резиновых перчаток. Работы проводят в боксе биологической безопасности II класса*.
________________

7.2. Проведение работ по заражению культур клеток или куриных эмбрионов, а также работ, связанных с возможностью образования аэрозоля, осуществляют в боксах безопасности III класса. Работы проводят в противочумном костюме IV типа, ватно-марлевой повязке (респираторе) и резиновых перчатках (две пары)*.
________________
* При отсутствии боксов биологической безопасности работы проводят в противочумном костюме I типа, дополненном водонепроницаемым фартуком и второй парой перчаток.

7.3. Работа с инактивированным материалом, проведение реакции обратной транскрипции и ПЦР, электрофоретической детекции результатов исследования осуществляют в противочумном костюме IV типа, дополненном резиновыми перчатками (две пары).

7.4. Перед началом работ персонал должен быть проинструктирован о порядке действий в случае возникновения аварий, включающих следующие сценарии: авария в боксе биологической безопасности; авария вне бокса биологической безопасности; авария с образованием аэрозоля.

7.5. Режимы обеззараживания различных объектов при лабораторной диагностике вируса гриппа птиц проводятся в соответствии с СП 1.3.1285-03 :

7.5.1. Обеззараживание поверхностей помещения (пол, стены, двери), оборудования, рабочих столов и другого двукратным протиранием с интервалом 15 мин 6%-м раствором перекиси водорода или 3%-м раствором хлорамина (экспозиция 120 мин) с последующей обработкой УФ в течение 30 мин.

7.5.2. Обеззараживание защитной одежды осуществляют:

а) кипячением в 2%-м растворе соды в течение 30 мин с момента закипания;

б) замачиванием на 30 мин при 50 °С в 3%-м растворе перекиси водорода с добавлением 0,5% моющего средства.

7.5.3. Обеззараживание перчаток - замачиванием на 60 мин в 6%-м растворе перекиси водорода с добавлением 0,5%-го моющего средства или в 3%-м растворе хлорамина.

7.5.4. Обеззараживание лабораторной посуды, автоклавируемых дозаторов, наконечников, вируссодержащих жидкостей, агарозного геля, инструментария из металла проводится методом автоклавирования - давление 2,0 кГс/см (0,2 МПа), температура (132±2) °С, время 45 мин.

7.5.5. Обеззараживание дозаторов - двукратным протиранием с интервалом 15 мин 6%-м раствором перекиси водорода (экспозиция 120 мин), с последующей обработкой УФ в течение 30 мин.

7.6. Аптечка экстренной профилактики должна быть укомплектована в соответствии с СП 1.3.1285-03 и дополнена двумя из следующих противовирусных препаратов: арбидол, ремантадин, альгирем, озельтамивир, занамивир.

8. Нормативные ссылки

1. Основы законодательства Российской Федерации об охране здоровья граждан . М., 1993.. - Примечание изготовителя базы данных.

6. СП 1.2.036-95 "Порядок учета, хранения, передачи и транспортировки микроорганизмов I-IV групп патогенности".

7. Порядок разработки, экспертизы, утверждения, издания и распространения нормативных и методических документов системы санитарно-эпидемиологического нормирования: Сборник Р 1.1.001-1.1.005-96. М.,1998.

8. СП 3.1.097-96 "Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных: Сборник санитарных и ветеринарных правил".

9. МУ 3.1.1029-01 "Методические указания по отлову, учету и прогнозу численности мелких млекопитающих и птиц в природных очагах зоонозов".

10. МУ 1.3.1794-03 "Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного микроорганизмами I-II групп патогенности".

11. МУ 4.2.2039-05 "Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории".

12. МУК 4.2.2136-06 "Организация и проведение лабораторной диагностики заболеваний, вызванных высоковирулентными штаммами вируса гриппа птиц типа А (ВГПА) у людей".

16. Методические рекомендации "Быстрая диагностика гриппа и других ОРВИ иммунофлюоресцентным методом". С-Петербург, 2006, утв. Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Г.Г.Онищенко 25 апреля 2006 г.

17. Методические рекомендации "Выделение вирусов гриппа в клеточных культурах и их идентификация". Санкт-Петербург, 2006, утв. Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Г.Г.Онищенко 25 апреля 2006 г.

18. СП 1.2.1318-03 "Порядок выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами".

19. Межгосударственный стандарт ГОСТ 25581-91 "Птица сельскохозяйственная, синантропная, дикая, экзотическая". Дата введения 01.01.93. Методы лабораторной диагностики гриппа.

20. Приказ Минздравсоцразвития России от 31.05.05 N 376 "О предоставлении внеочередных донесений о чрезвычайных ситуациях санитарно-эпидемиологического характера".

21. Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 31.03.05 N 373 "О совершенствовании системы эпидемиологического надзора и контроля за гриппом и острыми респираторными вирусными инфекциями".

22. Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 10.05.07 N 144 "О создании научно-методического центра по референс-диагностике и изучению высокопатогенных штаммов вируса гриппа".

23. Приказ Минсельхоза России от 27.03.06 N 90 (регистрационный номер 7756) "Об утверждении Правил по борьбе с гриппом птиц".

24. Рекомендации по защите людей, контактирующих с инфицированной птицей и участвующих в массовом забое животных, потенциально инфицированных вирусами гриппа птиц, утв. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации 05.08.05 N 0100/6198-0523.

25. Руководство ВОЗ по диагностике и контролю над гриппом животных (WHO/CDC/CSR/NSC/2002.5).

26. Рекомендации ВОЗ по обнаружению вируса гриппа птиц субтипа H5N1 в образцах от людей с подозрением на заболевание. ВОЗ, Женева, август 2007. (Recommendations for laboratory procedures to detect avian influenza A H5N1 virus in specimens from suspected human cases. WHO Geneva, August 2007).

27. Онищенко Г.Г., Киселев О.И., Соминина А.А. Усиление надзора и контроля за гриппом как важнейший элемент подготовки к сезонным эпидемиям и очередной пандемии (руководство). Москва-Санкт-Петербург, 2004.

28. Птичий грипп. Клинические особенности, стандартизованные принципы диагностики, лечения и профилактики, утв. Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека Г.Г.Онищенко 02.09.05.

29. Неклюдова Л.И., Гуменник А.Е., Федорова Ю.Б. и др. Практическая вирусология (Часть III). M., 1981.

30. Выявление циркуляции арбовирусов. Методы вирусологических и серологических исследований. Клинико-эпидемиологические характеристики малоизученных арбовирусных инфекций. Подходы к мониторингу природных очагов арбовирусов /Под ред. акад. РАМН Д.К.Львова //Итоги науки и техники. Сер. Вирусология. Т.25. M., 1991.

31. Сюрин В.Н., Фамуйленко А.Я., Соловьев Б.В. и др. Вирусные болезни животных. M.: ВНИТИБЛ, 1998.

Приложение 1. Перечень документации, разрешающей сбор полевого биологического материала в рамках мониторинга за гриппом птиц в границах Российской Федерации

Приложение 1

1. Разрешение на отстрел птиц.

А) Разрешение выдается региональной охотоинспекцией. Организация, планирующая отстрел птиц с целью обнаружения особей, пораженных вирусом гриппа птиц, пишет письмо-обоснование на имя руководителя региональной охотоинспекции. Письмо пишется на фирменном бланке по установленной форме.

Б) Отстрел птиц может осуществлять только член регионального общества охотников, наделенный соответствующими документами. Целесообразно привлекать из числа сотрудников организации, проводящей эпизоотологическое обследование, лиц, имеющих право на ведение охотничьего промысла. Приобретение расходных материалов (патроны) в достаточном количестве осуществлять из статьи командировочных расходов.

2. Разрешение на проведение эпизоотологических исследований в околоводных стациях с правом разбивания временного лагеря на водоохранной территории.

Разрешение выдается региональной рыбинспекцией. Необходимо предоставить разъяснения о цели и задачах планируемых исследований на контролируемых рыбинспекцией территориях, которые пишутся на фирменном бланке по установленной форме.

3. Согласование с региональными органами по экологии.

Необходимо четкое разъяснение планируемых мероприятий в связи с реальной угрозой осложнения эпидситуации. Пишется разъяснительное письмо на имя руководителя регионального комитета по экологии на фирменном бланке по установленной форме.

4. Согласование с пограничной службой РФ.

Согласование проводится только в случаях проведения эпизоотологических исследований в приграничных зонах. Просьба о разрешении работы в приграничной зоне пишется на имя начальника погранслужбы данного региона на фирменном бланке по установленной форме.
Произошла ошибка

Платеж не был завершен из-за технической ошибки, денежные средства с вашего счета
списаны не были. Попробуйте подождать несколько минут и повторить платеж еще раз.

Федеральное агентство по образованию

Государственное образовательное учреждение

Московский государственный университет прикладной биотехнологии

Ветеринарно-санитарный факультет

по ветеринарной вирусологии

Тема: «Вирус гриппа птиц»

Москва – 2007год

Введение

Грипп птиц впервые описал Перрончито 1878 г. Некоторое время его путали с болезнью Ньюкасла, но после установления этиологии последнюю стали называть азиатской, а грипп птиц - европейской (классической) чумой птиц. Вспышки европейской чумы птиц регулярно происходили в начале минувшего века в странах Европы, Африки и Азии. В Северную Америку болезнь попала только в 1925 г.

За последние 50 лет минувшего столетия за рубежом зарегистрировали 18 наиболее крупных эпизоотий этого заболевания: 5 произошло в Великобриатнии, 5 в Австралии, 3 в других странах Европы, и по одной в Пакистане, Гонконге, Канаде, США и Мексике. Не обошла стороной европейская чума птиц и нашу страну - особенно большой ущерб она нанесла: птицеводству центральных районов России в 60…70-х годах минувшего столетия.

В новом тысячилетии болезнь стала одной из основных причин беспокойства ветеринарных и медицинских специалистов всего мира. В 2002 г. ее впервые зарегистрировали в Южной Америке. Эпизоотия, начавшаяся на следующий год в Юго-Восточной Азии, отличается от предыдущих участившимися случаями заболевания и смерти людей, продолжительностью и масштабами, грозящими ее переходом в пандемию.

В данной публикации обсудим лишь некоторые особенности биологии ВГП*, которые могут объяснить причины происходящего, а также остановимся на аспектах практического плана, важных для правильной диагностики и предотвращения широкого распространения заболевания.

* Сокращения: ВГП - вирус гриппа птиц; КЭ - куриные эмбрионы; РГА - реакция гемагглютинации; РДП - реакция диффузионной преципитации; ПЦР - полимеразная цепная реакция

1. Вирус гриппа птиц

1.1. Возбудитель

Вирусы гриппа - агенты с одноцепочечной РНК, входящие в сем. Orthomyxoviridae. Их делят на 3 рода: A,B и C. У птицы в полевых условиях инфекцию вызывает ВГП, входящий в состав рода А. Генетический анализ показал, что ВГП был прародителем исчезнувшего 15 лет тому назад и современного вирусов гриппа лошадей, вируса гриппа свиней и вируса гриппа человека.

Вирусы типа В и С обычно встречаются только у млекопитающих, а типа А - у человека, свиней, лошадей, тюленей, китов, норок и других млекопитающих, а также у многих видов домашней птицы (куры, индейки, утки, фазаны, цесарки, перепела, страусы), всех других синантропных, декоративных, осёдлых и перелётных птиц, особенно водоплавающих, прежде всего перелётных уток.

О степени родства штаммов ВГП судят по поверхностным гликопротеинам - гемагглютинину (Н) и нейраминидазе (N). Выделенные за обозримый период времени от домашних и диких пернатых штаммы ВГП относились к подтипам, обладающим комбинацией 15 вариантов H(H1…H15) и 9 вариантов N (N1…N9). При одновременной инфекции несколькими подтипами ВГП между их нуклеиновыми кислотами возможен обмен сегментами (в нуклеиновой кислоте вируса их 8). Поэтому гипотетически (с учетом числа вариантов Н и N) возможно 256 модификаций возбудителя, различающихся по генотипу и фенотипу.

Многие подтипы ВГП (их называют слабопатогенными) широко распространены, но их инфекция протекает бессимптомно или в легкой форме. Встреча восприимчивой птицы с высокопатогенными подтипами ВГП (в настоящее время их известно 2 - H5 и H7) значительно опаснее - инфекция может принять генерализованную форму и завершиться летальным исходом. Но далеко не все штаммы ВГП, имеющие антигены H5 или H7, высокопатогенны для домашней птицы.

Грань между слабопатогенными и высокопатогенными штаммами ВГП крайне тонка. Прекрасной иллюстрацией этому служит вспышка птичьего гриппа в Чили (2002 г.), вызванная высоковирулентным штаммом подтипа H7N3. Он эволюционировал из слабопатогенных штаммов ВГП того же подтипа, широко распространенных в Южной Америке, но ранее никогда не вызывавших у птицы симптомов гриппа.

В последние годы вспышки высокопатогенного гриппа птиц на Американском континенте (США, 2004 г.), в Пакистане (2004 г) и Нидерландах (2004 г.) вызвал подтип Н7, а в Юго-восточной Азии и других странах Европы - подтип Н5. Подтип H5N1, получивший в настоящее время наиболее широкое распространение, появился, по всей видимости, в Гонконге в 1997 г. Затем он проник в Южную Корею, Китай, Вьетнам, Японию, Таиланд, Камбоджу, Лаос, Индонезию, Малазию и Филиппины, а затем перелетные птицы занесли его в Монголию, Казахстан, Россию, Турцию, Грецию, Хорватию и Кувейт.

Специфические природно-климатические и социально-экономические условия Юго-восточной Азии сделали этот регион «генетическим котлом», в котором периодически возникают опасные варианты ВГП. Например, в Таиланде в последние годы от заболевшей птицы изолировали не только подтип H5N1, но и H5N2.

Популяции вирусов гриппа свойственна необычайно высокая частота рекомбинаций, что выражается как в их способности к адаптации, так и к естественной изменчивости. Известно, что в годы эпидемий вирус гриппа человека может переходить на домашних животных (свиней, лошадей, крупный рогатый скот, собак, кошек), а также на птиц и некоторое время циркулировать в их организме. Доказательств прямого заражения человека вирусом гриппа животных и птиц, за исключением единичных случаев, не имеется. Прямая антигенная связь, наблюдающаяся у вирусов гриппа человека, млекопитающих и птиц через ген Н, позволяет предполагать наличие общего круговорота вирусов гриппа в природе (академик В.Н. Сюрин и др.. 1983).

Действительно птица в эволюционном отношении - один из древнейших резервуаров возбудителей болезней. Чему способствуют особенности их жизнедеятельности: колониальность и высокая численность особей на ограниченной территории. При миграции птиц повышаются их концентрация на зимовках и перелётных путях, где появляются связующие мостики между биоценозами, удалёнными друг от друга на тысячи километров. Именно перелётным птицам во многом обязаны своим существованием природные очаги болезней и генетическая изменчивость возбудителя.

Партнёрами птиц по эпизоотическому процессу выступают различные позвоночные: рыбы, амфибии, рептилии, млекопитающие, в т. ч. Крысы и мыши, мелкие хищники и домашние животные, включая кошек и собак. Кроме птиц возбудителей болезни на дальние расстояния переносят и летающие насекомые.

Поскольку все вирусы гриппа А генетически лабильны и подвержены перманентной изменчивости с последовательной сменой антигенов и эпизоотическими (эпидемическими) последствиями, не исключается потенциальная вероятность возникновения субтиповых вариантов вируса гриппа птиц с передачей в человеческую популяцию.

Вирусы гриппа А по серологическим свойствам важнейшего из поверхностных антигенов - гемагглютинина (Н) делятся на 15 субтипов, известных в настоящее время (Н1-Н15). Существует аналогичное внутривидовое их разнообразие и по второму поверхностному антигену - нейраминидазе (N1-N9). К вирусам гриппа А восприимчивы человек и многие виды животных, в частности, свиньи, лошади, тюлени, различные китообразные, домашние и дикие птицы. В экологии вирусов гриппа А последние имеют особое значение, поскольку являются их природным резервуаром; все субтипы вируса циркулируют среди диких птиц. В связи с этим 15 субтипов вируса гриппа А, инфицирующие птиц, получили название вирусов птичьего гриппа (ВПГ) (Avian Influenza Viruses) (4, 8, 10).

ВПГ не вызывают гриппа человека и не имеют прямых связей с его эпидемиями, люди не вовлекаются в их естественную циркуляцию. Среди людей к эпидемическому распространению способен вирус гриппа А только первых трех субтипов (Н1, Н2 и Н3) (1, 3, 13).

У диких птиц ВПГ не вызывают каких-либо болезней в нозологическом понимании, сохраняются в популяциях преимущественно мигрирующих водоплавающих птиц определенных видов (в кишечнике и окружении, например, в гнездах). Вирусы содержатся в слюне, носовых секретах и фекалиях. Их кругооборот происходит при контакте восприимчивых птиц с контаминированным назальным, респираторным, фекальным материалом от инфицированных птиц преимущественно фекально-оральным путем. У последних инфекция, как правило, протекает бессимптомно или со слабо выраженными одним или несколькими симптомами в зависимости от штамма вируса и вида птиц (7, 10, 11).

ВПГ существуют в двух эпидемиологических формах: низко- или высокопатогенной. Известно, что степень патогенности ВПГ (как и других ортомиксо- и парамиксовирусов) определяется в конечном счете первичной структурой молекулы гемагглютинина - ее способностью к протеолитическому расщеплению в определенном сайте, который подвержен мутационным изменениям (2, 3).

Именно ВГП низкой патогенности (с нерасщепленным гемагглютинином) способны к длительному бессимптомному сохранению в популяциях как диких, так и домашних птиц. При этом от птиц, главным образом, уток, выделяются субтипы ВПГ, характеризующиеся десятками антигенных комбинаций гемагглютинин+нейраминидаза (H + N). Однако, в отсутствие контроля, в условиях непрерывных естественных генераций неизбежны микроэволюционные процессы, в частности, мутации с образованием высокопатогенных вариантов вируса [с первичной структурой сайта расщепления Про-Глу-Иле-Про-Лиз-Арг-Арг-Арг-Арг Гли-Лей-Фен и расщепленным гемагглютинином] и их возможное распространение без изменения субтиповой принадлежности, что выражается в возникновении эмерджентных эпидемических вспышек инфекции с массовой летальностью. Так, в 1983-84 гг в США после шести месяцев эндемичной инфекции ВПГ H5N2 с низкой летальностью возник высокопатогенный возбудитель, вызывающий заболеваемость с 90% гибелью (потери составили 65 млн $). В аналогичной ситуации в 1999-2001 гг. в Италии изначально низкопатогенный ВГП H7N1 через девять месяцев мутировал в высокопатогенный вариант (3, 4). Эти факты, а также невыясненность источников инфекции и отсутствие эпидемических связей в абсолютном большинстве первичных (или единичных) случаев гриппа птиц в 2003 году, свидетельствуют скорее об индигенной, чем эпидемической, экзогенной, "заносной" в тривиальном понимании природе вспышек именно за счет мутационного происхождения высокопатогенных ВПГ.

Вместе с тем эпидемическая циркуляция высокопатогенного ВПГ может быть достаточно длительной; в Мексике высокопатогенный мутант вируса H5N2, возникший в 1992 году, обусловливал заболеваемость с высокой летальностью в течение трех лет (до 1995 года) (2, 4).

Способность к такому "сальтистскому" преобразованию с последствиями в виде массовой заболеваемости и смертности среди домашних (цыплят, индеек) и диких птиц отдельных видов особенно присуща ВПГ субтипов Н5 и Н7. [Эти данные имеют важное практическое значение, т.к. обосновывают необходимость обязательной депопуляции как стандарта в контроле и профилактике возникновения и распространения птичьего гриппа в масштабах неблагополучных государств.] При этом тяжелые патологические изменения вплоть до фатальных (в частности, поражение легких) обусловливаются патогенным действием самого вируса, в то время как отягчающие эффекты при гриппе человека в основном обусловливаются вторичной инфекцией (4, 7, 10, 12).

ВПГ достаточно устойчивы к воздействию факторов среды и длительно сохраняются во внеорганизменном состоянии, особенно при низкой температуре. В связи с высокой контагиозностью инфекция быстро распространяется между фермами механическим путем и факторами непрямого контакта, например, через контаминированное оборудование, транспорт, корма, клетки, различные сгустки. В отличие от воздушно-капельной передачи инфекции при классическом гриппе человека за счет прямого, близкого контакта с источником возбудителя в данном случае преобладает фекально-оральное заражение и опосредованная передача инфекции с непрямым контактом (10, 11).

1.2. Что такое высокопатогенный грипп птиц?

Ортомиксовирусная инфекция птиц впервые описана Perroncito 125 лет назад в Италии. Распространявшаяся с тех пор в различных регионах мира с высоким индексом эпизоотичности высоколетальная для цыплят и индеек болезнь под названием классическая чума птиц, возбудитель которой относился к вирусам гриппа А субтипов Н7N1 и Н7N7, в последние десятилетия как нозологическая форма не регистрируется. С возникновением новых птичьих разновидностей вирусов гриппа А, по рекомендациям I-st International Symposium on Avian Influenza (1981), инфекция получила название грипп птиц (Avian Influenza), а ее новый вариант с высокой летальностью (не менее 75%) - высокопатогенный грипп птиц (Highly Pathogenic Avian Influenza).

Особое значение грипп птиц приобрел в настоящее время в связи с эмерджентным распространением в конце 2003 года в 10 странах Юго-Восточной Азии высокопатогенного ВПГ Н5N1. [Весной 2003 года крупные вспышки высокопатогенного гриппа птиц Н7N7 произошли в Западной Европе; в настоящее время они ликвидированы радикальными мерами.] Наиболее полно документированные статистические сведения по официальным данным суммированы в таблице. Серьезность ситуации обусловливают случаи заболевания человека, в том числе с летальным исходом, впервые вызванные ВПГ как новым, эмерджентным патогеном.

1.3. Птичий грипп у людей

В 1997 и 1999 гг зарегистрированы случаи гриппа людей, вызванного ВПГ, со сравнительно высоким уровнем летальности среди заболевших. Инфекция возникла при прямом контакте (заражении) с больными птицами, передачи от человека к человеку не наблюдалось. Первая вспышка явилась для здравоохранения стартовой точкой мониторинга потенциального распространения ВГП в человеческой популяции. В 2003 году в Голландии среди людей, проводивших депопуляцию в течение описанных выше вспышек гриппа птиц, 349 человек были инфицированы (с клиническими признаками конъюнктивита), от 89 (19.6%) выделен ВПГ Н7, в трех случаях произошла передача инфекции от человека к человеку (в том числе условиях семьи от отца дочери), один человек умер.

Случаи птичьего гриппа у людей, сопровождающиеся летальностью, продолжают регистрироваться в связи с ситуацией в Юго-Восточной Азии; в двух странах общее число заболевших составило 23, умерло 18, летальность составила 82.6 %. Судя по зарегистрированным случаям, человек может быть восприимчив к ВПГ субтипов Н5, Н7 и Н9.

Симптомы инфекции у человека, вызванной ВПГ, варьируют от типичного гриппозного синдрома, характерного для регулярного сезонного эпидемического гриппа (лихорадка, кашель, воспаление горла, мышечные боли), до поражения глаз, острого респираторного дистресса, вирусной пневмонии и других осложнений с угрозой для жизни.

Поскольку все вирусы гриппа А генетически лабильны и подвержены перманентной прогрессивной изменчивости с последовательной сменой антигенов и эпидемическими последствиями, не исключается потенциальная вероятность возникновения субтиповых вариантов ВПГ с передачей типа человек-человек и эпидемическим распространением в человеческой популяции. Этому во многом способствуют два их имманентных свойства - отсутствие механизмов корректировки считывания ("proofreading") и репарации ошибок репликации генома, обусловливающее генетический дрейф, и эволюционно-экологическая полигостальность как важный фактор движущего отбора новых, шифтовых вирусных субтипов. Вероятным примером подобного предрасполагающего механизма служит известный факт, что свиньи, чувствительные к вирусам гриппа как птиц, так и млекопитающих, могут служить "смесителем" ("mixing vessel") генетического материала вирусов гриппа человека и ВПГ с эмерджентным возникновением новых субтипов. После того, как реальным стало естественное заражение ВПГ человека, последний также потенциально может выполнять роль "смесителя".

Особое значение может представлять глобальное распространение новых вирусов гриппа. В этом отношении поучителен опыт ХХ в., когда драматические последствия имели три пандемии гриппа с чрезвычайно высокой заболеваемостью, смертностью, социальными потрясениями и экономическими потерями. Все три пандемии отличались эксплозивным характером развития в пределах одного года и выходом на глобальный уровень новых (пандемических) субтипов с шифтовыми изменениями гемагглютинина, чем подчеркивается потенциальная опасность новых для человека субтипов, в частности, H5.

Первое пандемическое распространение вируса гриппа H1N1 в 1918-1919 гг. ("испанка") сопровождалось смертностью от 20 до 50 млн человек, причем протекавшая в очень острой форме болезнь поражала людей независимо от возраста и иных тривиальных факторов индивидуальной восприимчивости*. В 1957-1958 гг. пандемия гриппа H2N2 ("азиатский грипп"), стартовавшая в Китае, уже через четыре месяца получила распространение в США, где умерли около 70 тысяч человек. В 1968-1969 гг. грипп H3N2 ("гонконгский грипп") также очень быстро, в течение года, приобрел пандемическое распространение с высоким уровнем смертности (только в США зарегистрировано около 34 тысяч смертельных исходов).

Для защиты людей от ВПГ, прежде всего имеющих различные контакты с птицей, рекомендованы специальные меры. Физическая защита санитарно-гигиенического порядка предполагает применение спецодежды, масок, очков. Вакцинация против гриппа человека, особенно поливалентными вакцинами, создает симультанный эффект и против птичьего гриппа. Эффективны антивирусные препараты для лечения вирусных конъюнктивитов и их предупреждения.

Устойчивость

ВГП способен длительно сохраняться в фекалиях и тушках птицы, особенно при низкой температуре: при 60 °C- в течение нескольких лет, при 4 °C - несколько недель. В зависимости от субстрата, в котором находится вирус, он инактивируется при температуре 56°Cза 1…3ч., при 60°Cза 10…30мин, при 70°Cза 2…5мин. На ВГП губительно действуют кислая pH, формалин, додецилсульфат натрия, растворители жиров, ?-пропиолактон, препараты йода, широко применяемые средства дезинфекции (хлорная известь, креолин, карболовая кислота и др.).

Грипп большинство из нас воспринимает всего лишь как одну из мелких неприятностей. Но это ошибочное мнение: грипп нельзя недооценивать. Инфекция распространяется воздушно-капельным путем столь легко, что каждый год поражает значительную часть населения земли. Грипп и другие инфекционные заболевания дыхательного тракта - наиболее распространенные вирусные заболевания человека. Они являются причиной смерти многих людей. Вследствие массовой заболеваемости экономический ущерб от них огромен во всех странах.

Вирус гриппа так быстро меняется, что ни у кого нет иммунитета ко всем его разновидностям, и каждый год специалистам приходится разрабатывать новую вакцину. До сих пор речь шла о привычных видах гриппа, но, начиная с декабря 2003 года, в мире возникла беспрецедентная по масштабам вспышка гриппа птиц, охватившая 38 стран. В первую очередь были поражены страны Юго-Восточной Азии. В настоящее время эпизоотия гриппа птиц, вызванная вирусом гриппа А H5N1, отмечена во многих странах Европы, Азии и Африки. В 7 странах зафиксированы случаи заболевания людей. 3 страны из этого числа граничат с Россией.

Несмотря на чрезвычайные меры по предотвращению распространения гриппа птиц, в результате которых было уничтожено более 100 миллионов поголовья домашних птиц, вирус H5N1 закрепился в природной популяции диких птиц и приобрел способность инфицировать людей, что является основанием считать его возможным предшественником пандемического вируса. На 21 марта 2006 года в мире заболели 185 человек, из которых 104 - умерли.

Нет ничего необычного в том, что куры заболели гриппом. Разновидностей птичьего гриппа гораздо больше, чем человеческого. Грипп птиц - высокозаразная вирусная инфекция, поражающая все виды пернатых. Наиболее чувствительными из домашних видов являются куры и индюки. Естественным резервуаром для вирусов гриппа птиц являются водоплавающие, которые чаще всего и ответственны за занос инфекции в домашние хозяйства.

Грипп среди птиц был всегда. У диких птиц болезнь протекает в виде энтерита (поражение кишечника) без видимых признаков общего заболевания. Это указывает на высокую степень адаптации вирусов гриппа А к диким птицам, которые являются их естественными хозяевами. Вирус сохраняется в воде в течение длительного времени (6 - 8 месяцев), а водно-фекальный путь инфицирования птиц является основным механизмом сохранения вируса гриппа в природе, откуда он проникает в популяции домашних птиц и животных. Высокопатогенный вирус может выживать в окружающей среде длительное время, особенно при низких температурах. Например, он может выживать в помете птиц до 35 суток при 4 градусах C. При температуре 37 градусов C вирус сохраняет жизнеспособность в помете не менее 6 дней.

Вирусы гриппа птиц могут переноситься с фермы на ферму при перемещении живой птицы, а также людьми через обувь и одежду, загрязненными колесами транспорта, оборудованием, кормами. По этим причинам работникам птицеводческих хозяйств не рекомендуется держать домашних птиц. К таким требованиям надо отнестись серьезно. При возникновении заболевания наиболее важными и эффективными мерами контроля за инфекцией является быстрое уничтожение всего поголовья заболевших или контактировавших с ними птиц, обязательный сбор и захоронение или сжигание трупов птиц, введение карантина и тщательная дезинфекция всех помещений и оборудования. Необходимо также введение ограничений на перемещение живой птицы и продуктов птицеводства как внутри населенного пункта или региона, так и в более широких масштабах, в зависимости от ситуации.

Строгие ограничительные меры особенно необходимы для птицеводческих хозяйств и птицефабрик, где поголовье птиц содержится в закрытых помещениях. Вирусы птичьего гриппа могут передаваться в хозяйства путем обитания на их территории различных видов птиц: голубей, ворон, воробьев и других. В ряде случаев пути передачи остались невыясненными, что может свидетельствовать об еще не известных источниках инфекции. В этих случаях возникает предположение о возможной роли птиц или использовании птичьего помета в качестве удобрения.

Меры по контролю инфекции гораздо труднее осуществить в индивидуальных хозяйствах. В них трудно обеспечить изоляцию домашней птицы от контактов с дикой, особенно на водоемах. Ведь в летнее время вся домашняя птица в деревнях выгуливается на воде или лужайках, пасется вокруг жилища в поисках корма. Особенно это опасно в случае выпаса домашних уток или гусей. Кроме того, даже при успешных попытках изолировать домашнюю птицу возникает проблема ее кормления.

Кроме трудностей контроля, вспышки гриппа в домашних хозяйствах чреваты высоким риском контакта человека с инфекцией. Описаны случаи заражения детей, игравших на участках, значительно загрязненных испражнениями птиц. Заражение может произойти через воду, загрязненную фекалиями птиц. Поэтому необходима осторожность при купании и потреблении сырой воды. В Таиланде наблюдались случаи заражения хозяев бойцовских петухов. В домашних хозяйствах нередки случаи, когда заболевших птиц забивают для употребления в пищу. При этом возникает опасная ситуация во время забоя птицы, удаления перьев, разделки тушки и приготовления пищи. Например, в Турции в феврале этого года заразились и погибли 2 ребенка, которым было поручено забить заболевших цыплят.

Известно, что многие птицы размножаются на северных территориях и на зимовку перелетают на юг. Перелеты птиц невозможно ни отменить, ни запретить. Миграцию многих миллионов птиц можно сравнить с гигантским насосом, дважды в год перекачивающим адаптированных к птицам возбудителей различных заболеваний с континента на континент. С началом весны птицы потянулись на север, и список стран, вовлеченных в гриппозную эпопею, сразу значительно расширился. На 21 февраля он выглядел следующим образом (в порядке регистрации выявления вируса H5N1): Ирак, Азербайджан, Болгария, Греция, Италия, Словения, Иран, Австрия, Германия, Египет, Индия, Франция. С тех пор этот список значительно изменился.

Легко ли передается вирус H5N1 от птиц человеку? К счастью, нет. Как уже отмечалось, зарегистрированное число случаев заболевания человека ничтожно мало по сравнению с количеством птиц, пораженных этим вирусом. Было неясно, почему одни люди заражаются и заболевают, а другие нет. Только что появились данные, объясняющие этот факт. Оказалось, что у человека клетки эпителия, чувствительные к вирусу гриппа H5N1, расположены в самых глубоких отделах легких, практически вокруг альвеол, где осуществляется кислородный обмен. Поэтому при кашле или чихании маловероятно выделение вируса от инфицированного человека. Но в дальнейшем, по мере адаптации вируса к организму человека, он приобретет способность поражать и другие отделы нашей дыхательной системы, что будет способствовать его распространению от человека к человеку.

Каков риск пандемии гриппа? Она может начаться при наличии трех условий. Первое - появление нового подтипа вируса гриппа. Второе - случаи инфицирования человека с тяжелым течением заболевания. Третье - способность вируса легко распространяться от человека к человеку. Первые два условия уже налицо. Вирус H5N1 никогда раньше не циркулировал в природе, в том числе среди людей. Люди не имеют иммунитета к этому вирусу. Таким образом, дело только за способностью вируса к быстрому распространению его от человека к человеку. Риск того, что этот вирус приобретет эту способность, будет сохраняться всегда, когда будут наблюдаться случаи заболевания человека, что в свою очередь зависит от его циркуляции среди домашних и диких птиц.

Какие изменения необходимы, чтобы вирус H5N1 стал пандемическим? Вирус может усилить свою трансмиссивность среди людей с помощью двух механизмов. Первый - это обмен генетическим материалом при одновременном инфицировании человеческим и птичьим вирусом человека или свиньи. Второй - это ступенчатый процесс адаптивных мутаций, усиливающих способность вируса поражать клетки человека. Адаптивные мутации проявляются первоначально небольшими вспышками заболевания людей с установленными случаями передачи вируса от человека к человеку. Регистрация таких случаев будет сигналом для активной подготовки к пандемии и для приведения в действие планов снижения ее разрушительных последствий.

С распространением вируса H5N1 за пределы Юго-Восточной Азии происходит увеличение числа случаев заражения человека от домашних и диких птиц. Каждый новый случай заражения человека дает вирусу возможность усиливать его трансмиссивность среди людей, что приведет к появлению пандемического штамма. Когда и где это произойдет, предсказать невозможно, но это неизбежно случится.

Старый знакомый – птичий грипп

« – Что вы скажете за кур, дорогой профессор? – крикнул Бронский… Он подчеркнул острым лакированным пальцем невероятной величины заголовок через всю страницу газеты: "Куриный мор в республике"». М. Булгаков «Роковые яйца»

Люди с давних времен знакомы с заболеванием, именованным в XIX в. «гриппом» (от франц. grippe – схватывать). Этот нежеланный спутник человечества не только собирает с него ежегодную дань в виде эпидемий, но служит также причиной массовой гибели птиц, заболеваний у свиней и лошадей, а иногда – даже у норок и морских млекопитающих

Вызывается грипп вирусами, относящимися к семейству ортомиксовирусов (Orthomyxoviridae): Influenzavirus A, Influenzavirus B и Influenzavirus C. Классифицированы они на основании так называемых антигенных различий в их белках, нуклеопротеидном и матричном. Напомним, что антигенами называются вещества, вызывающие иммунный ответ организма в виде образования специфических антител.

Вирусы типа В и С поражают только человека. Наиболее же патогенным считается вирус типа А, о котором и пойдет речь дальше. Именно он способен инфицировать разнообразные виды животных, периодически вызывая опустошительные пандемии в человеческой популяции. На основании двух разных гликопротеинов, располагающихся на поверхности вируса – гемагглютинина и нейраминидазы – вирус гриппа А подразделяют на так называемые субтипы. Всего известно 16 субтипов гемагглютинина и 9 субтипов нейраминидазы. Однако из 144 возможных пар комбинаций в природе встречаются только 86, и 83 из них найдены среди вирусов гриппа птиц, в то время как от млекопитающих были изолированы вирусы сравнительно немногих комбинаций субтипов. При этом только вирусы трех субтипов гемагглютинина (Н1, Н2 и Н3) и двух типов нейраминидазы (N1 и N2) широко циркулируют среди людей.

Природный резервуар

Вирус гриппа типа А, ставший ныне «модным» птичьим гриппом, был впервые выделен около 100 лет назад. Всего же начиная с 1961 г. в Северной Америке, Европе, Индии, Японии, Южной Африке и Австралии вирус был выделен, по крайней мере, у 90 видов – представителей 12 отрядов птиц. При этом в отряде Гусеобразных (Anseriformes) вирус был обнаружен более чем у четверти от 149 имеющихся видов, и в отряде Ржанкообразных (Charadriiformes) – примерно у 20 видов. Представители последнего отряда (цапли, ржанки, крачки) широко распространены по всему миру и отличаются склонно­стью к миграциям на далекие расстояния.

Таким образом, первичным резервуаром практически всех субтипов вируса гриппа А являются различные птицы, принадлежащие к отрядам Гусеобразных и Ржанкообразных. Прочие же виды, несомненно, не имеют столь большого значения в естественной истории вирусов гриппа, как эти перелетные птицы, ведущие водный и околоводный образ жизни.

В результате изучения генотипов вирусов гриппа у различных видов птиц выяснилось, что в Евразии и Америке они эволюционировали независимо. Таким образом, миграция между этими двумя континентами (широтная миграция), по-видимому, практически не играет роли в эволюции вируса гриппа, в то время как птицы, мигрирующие по долготе, вносят решающий вклад в этот процесс.

Новейшая история

Очевидно, что в течение столетий и тысячелетий вирус гриппа птиц «мирно» циркулировал в животном мире, являясь одним из факторов естественного отбора и регуляции численности. Однако с развитием сельского хозяйства и массового птицеводства перед ним, образно говоря, открылись «новые горизонты». Этому способствовали как неизбежная скученность домашней птицы, так и искусственная селекция, направленная на повышение продуктивности особей, что также неизбежно ведет к снижению их устойчивости. Однако долгое время проблема «птичьего гриппа» была предметом заботы лишь ученых-вирусологов, ветеринаров да зоотехников.

Все изменилось в 1997 г. с массовой эпизоотии «птичьего гриппа» в Гонконге, виновником которой явился вирус гриппа типа А Н5N1 серотипа. Это событие, вероятно, осталось бы не замеченным мировым сообществом. Однако, как выяснилось, этот же вирус стал виновником заболевания 18 человек, приведшего к летальному исходу у шести инфицированных. Един­ственным действенным оружием в борьбе с инфекцией, поразившей птицеводство Гонконга, стало полное уничтожение поголовья домашней птицы. Но джинн был уже выпущен из бутылки, и в последующие годы вирус гриппа Н5N1 стал распространяться по странам Юго-Восточной Азии и Китаю, нанося огромный экономический ущерб.

Следуя путями птичьих миграций, из Юго-Восточной Азии вирус вместе с перелетными птицами устремился осенью 2005 г. на Ближний Восток, в Северную Африку, на юг Европы. Так эпизоотия «птичьего гриппа» начала превращаться практически в «панзоотию», нанося урон птицеводству многих стран мира и, более того, начиная представлять угрозу здоровью людей. Мировая общественность и средства массовой информации во весь голос заговорили о пришествии новой «чумы» человечества.

Коварная «испанка» и гонконгский убийца

История с «птичьим гриппом» очередной раз свидетельствует в пользу истины, гласящей: если вы чего-то не знаете, это не означает, что этого «чего-то» не существует.

Все мы неоднократно в своей жизни сталкивались с заболеванием, которое врачи диагностируют как грипп. И, как сейчас установлено, чаще всего первоисточником этого заболевания у человека являются потомки тех самых вирусов «птичьих гриппов», которые прошли многолетнюю эволюцию в человеческой популяции, не раз вызывая эпидемии и пандемии.

Первой исторически зафиксированной пандемией явилась печально известная «испанка», чьим родоначальником был вирус «птичьего гриппа» Н1N1 и которая стала причиной гибели от 20 до 50 миллионов людей во всем мире. Множество людей погибло в течение первых дней заболевания и множество – в результате спровоцированных гриппом осложнений.

1957-1958 гг. «Азиатский грипп», унесший около миллиона человеческих жизней. Впервые зарегистрированный в феврале 1957 г., он всего за пять месяцев «покрыл» полмира, достигнув Американского континента.

1968-1969 гг. Последняя пандемия – «гонконгский грипп», и снова гибель около миллиона людей во всем мире. Вызвавший его серотип вируса H3N2 циркулирует в человеческой популяции до сих пор.

Все эти пандемии имели несколько общих особенностей. Так, первые вспышки заболеваний происходили в Юго-Восточной Азии. Появление вирусов Н2N2 и Н3N2 сопровождалось исчезновением из человеческой популяции вирусов гриппа, циркулировавших до них (подтипов Н1N1 и Н2N2, соответственно). Причина последнего явления остается неясной до сих пор.

Переходя от истории к новейшему времени, вернемся к уже упомянутой вспышке заболевания домашней птицы в Гонконге в 1997 г., сопровождавшейся инфицированием людей. Возраст заболевших колебался от 1 года до 60 лет, у всех них наблюдалась высокая температура, желудочно-кишечные расстройства, гепатит. Смерть шести заболевших произошла от первичной вирусной пневмонии.

И это были лишь «первые ласточки». Так, с 2003 г. на начало февраля 2006 г., по сообщению ВОЗ, в мире было официально зарегистрировано около 170 случаев заболевания «птичьим гриппом» среди людей при более чем 50 %-ном уровне смертности. Наибольшее число заболевших зафиксировано во Вьетнаме (93 человека), самая высокая смертность – в Камбодже и Индонезии.

Вакансия массового убийцы

События последних лет не могли не насторожить специалистов-гриппологов. Поскольку было установлено, что периодичность пандемий у людей составляет примерно 30-40 лет, то к концу прошлого столетия срок, как говорится, как раз подошел. Кто же является претендентом на звание нового «массового убийцы»?

Циркулирующие ранее в диких водоплавающих птицах как естественном резервуаре, низко патогенные подвиды вируса гриппа типа А Н5 и Н7 в последнее десятилетие заметно усилили свою патогенность как к природному хозяину, так и к другим видам птиц и млекопитающих. Обнаружено четыре новых варианта вируса, вызывавших гибель не только птиц, но и людей: H5N1, H9N2, H7N7 и H7N3. Наиболее же часто в последние десять лет встречается вирус гриппа Н5N1. Именно этот высокопатогенный азиатский вариант «птичьего гриппа» продолжает «осваивать» планету, широко распространяясь по всей Евразии и Северной Африке. Среди его жертв, помимо несметного числа домашней птицы, и жители этих стран.

Источником возбудителя инфекции, как правило, являются больные или погибшие от болезни домашние птицы, с которыми заболевшие находились в тесном контакте. Вместе с тем сообщается о случаях, когда заражение, возможно, происходило внутрисемейно, при уходе за больными. Следует иметь в виду также то, что долговременная циркуляция субтипа H5N1 в дикой птице может привести к широкому распространению вируса в водоемах, что представляет дополнительный потенциальный риск заражения для людей.

И все же – настолько сегодня велика вероятность возникновения очередной пандемии гриппа? Да, сейчас вирус «птичьего гриппа» стал более вирулентным и, в принципе, преодолел межвидовой барьер птица-человек. И все же пока он, по-видимому, не обладает способностью передаваться напрямую от человека к человеку и быстро распространяться среди популяции людей, что является необходимым условием для возникновения пандемии. Однако для последнего требуется лишь произвести «правильный» обмен генетическим материалом между, скажем, штаммом H5N1 и штаммом гриппа человека, что вполне может случиться, если человек или животное заболеет человеческим и птичьим гриппом одновременно.

Такое вирусное потомство теоретически может получить наследственные наборы, представляющие собой рекомбинации РНК-сегментов обоих родительских вирусов, которые обеспечат его эффективную передачу в человеческой популяции. Своеобразным «смешивающим сосудом» для образования нового пандемичного вируса могут стать обыкновенные домашние свиньи – наши ближайшие генетические и физиологические родственники. Пока этого, к счастью, не произошло, почему сегодня наиболее актуальными являются разработка и проведение в птицеводстве профилактических мероприятий по биобезопасности. Естественно, наряду с продолжением исследований экологии вируса в его естественном окружении.

На сибирских просторах

И все же – почему именно сибирские ученые, вирусологи и орнитологи, живущие и работающие отнюдь не в Юго-Восточной Азии, столь «близко к сердцу» приняли проблему «птичьего гриппа»? Все дело в том, что на юге Западной Сибири сходятся миграционные потоки птиц, зимующих в различных регионах мира – Европе, Африке, на Ближнем Востоке и в Средней Азии, Индостане и Юго-Восточной Азии. Щедро обводненные сибирские территории являются идеальным местом как для гнездования, так и для остановки в пути миллионам птиц.

Массовые миграции птиц протекают здесь с конца марта до первой половины июня и со второй половины июля почти до середины октября, благодаря чему на определенных участках лесостепи с весны до осени периодически наблюдаются массовые скопления птиц. Численность создающихся на время гнездования колоний водоплавающих и околоводных птиц может достигать нескольких тысяч особей. Все это обеспечивает особенно благоприятные условия для распространения различных вирусных и других заболеваний, опасных для человека.

Начиная с 2002 г. Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» совместно с Институтом экологии и систематики СО РАН проводят мониторинг вируса «птичьего гриппа» у диких перелетных птиц, встречающихся на территории Новосибирской области. Для лабораторного исследования брались пробы как от живых птиц, пойманных сетями (смывы из клоакальной области), так и от птиц, отстреленных во время весенней и осенней охоты – в периоды массовой миграции.

В 30 из 1120 проб, собранных у диких птиц за период с 2002 г. по май 2005 г., обнаружены различные штаммы вируса гриппа, в том числе и высокопатогенного H5N1. Носителями потенциальной инфекции оказались, как и ожидалось, различные виды диких уток.

С осени 2003 г. наши ученые начали исследования циркуляции вируса гриппа у диких птиц и на сопредельных с Россией территориях – в Монголии. Но это лишь начало большой исследовательской работы. Взоры наших специалистов устремлены на сибирский Север – туда, куда на необъятные просторы от Таймыра до Берингова моря каждую весну из Африки, Европы, Азии, Америки и Австралии летят на гнездование десятки и сотни миллионов птиц и откуда новые варианты «птичьего гриппа» впоследствии разносятся практически по всему миру.

В публикации использованы фотографии А. Юрлова (ИСиЭЖ СО РАН, Новосибирск)