Spørgsmålet opstår naturligvis: hvor er virussen opbevaret, hvor er reservoiret, hvor kommer dets nye sorter fra? Dette spørgsmål er meget vigtigt, og videnskabsmænd gør en stor indsats for at finde svaret på det.

Identifikationen af ​​infektionsreservoirer gjorde det muligt at finde måder at reducere eller endda eliminere en række sygdomme betydeligt. For eksempel viste det sig, at det vigtigste reservoir af infektioner i pest, tularæmi og rabies er vilde dyr og gnavere. Elimineringen af ​​naturlige foci af disse infektioner, oprettelsen af ​​effektive afspærringer mod import af syge dyr viste sig at være tilstrækkelig til betydeligt at reducere eller fuldstændigt eliminere disse infektionssygdomme.

Er dyr ikke også reservoirer for influenza? Denne idé opstod allerede i 1931, da en virus, der ligner den menneskelige influenzavirus, blev isoleret fra syge grise. Forskere vendte tilbage til denne idé efter 1957. I undersøgelsen af ​​influenzalignende sygdomme hos husdyr og fugle blev vira igen isoleret fra heste, grise, får og ænder, i nogle egenskaber relateret til type A influenzavirus, men de adskilte sig alle væsentligt fra hinanden og kunne ikke være fuldstændigt identificeret med nogen af ​​de humane influenzavirus.

Yderligere observationer viste, at influenzalignende sygdomme hos dyr og fugle er ret sjældne, og dyr er ikke kilden til influenza hos mennesker. Videnskaben har data, der viser, at det modsatte kan ske - overførsel af influenzavirus fra mennesker til grise og dens videre spredning blandt dem. Nogle dyr er således en slags sparegris af virussen.

Der er dog al mulig grund til at tro, at kun personen selv er kilden til infektion og reservoiret af vira i influenza.

Systematisk udførte undersøgelser har vist, at i store byer observeres influenza A- og B-sygdomme hele året rundt, selvom de i inter-epidemitider, især om sommeren, udgør en lille procentdel af det samlede antal observerede akutte luftvejssygdomme.

Disse individuelle sygdomme, der strækker sig i en kæde fra sag til sag, bevarer virusset i perioden mellem individuelle epidemiske bølger. Desuden er det i disse udadtil rolige inter-epidemiperioder, at nye varianter af virussen dannes.

Hvordan ændrer influenzavirus sig? Er det uendeligt, eller har det en periodicitet, og allerede eksisterende sorter kan dukke op igen? Nyligt opdagede fænomener har kastet lys over disse spørgsmål. Som tidligere nævnt, efter en sygdom, opstår antistoffer mod den type virus, der forårsagede sygdommen, i det menneskelige blod. Disse antistoffer er som spor af virussen. De kan bruges til at bestemme, hvilken type eller variation af det forårsagede sygdommen. Det blev generelt antaget, at antistoffer varede i blodet i ikke mere end et år. Men det er nu blevet fastslået, at antistoffer produceret som reaktion på den første influenza i en persons liv vedvarer indtil alderdommen. Samtidig vil antallet af originale antistoffer altid være større end antistoffer mod enhver anden type influenza, som en person er stødt på i de efterfølgende år.

Ved at kende året en person blev født og den type virus, som han har flere antistoffer mod, kan du bestemme, hvilken type influenza, der forårsagede sygdommen i barndommen.

Den systematiske udførelse af denne form for forskning gjorde det muligt for videnskabsmænd at fastslå hyppigheden af ​​forekomsten af ​​forskellige varianter af virussen og varigheden af ​​deres cirkulation blandt befolkningen. Disse observationer giver grundlag for at hævde, at variabiliteten af ​​influenzavirus ikke er kaotisk, ikke ubegrænset, men har sine egne mønstre, som kan afsløres og bruges til at bekæmpe sygdommen.

1.3. EPIDEMIOLOGI

Organisering af overvågning af introduktioner og spredning af aviær influenza under naturlige forhold på Den Russiske Føderations territorium

Dato for introduktion: fra tidspunktet for godkendelse

1. UDVIKLET af Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare (G.G. Onishchenko, E.B. Ezhlova, G.F. Lazikova); FGUN SSC VB "Vector" af Rospotrebnadzor (I.G. Drozdov, A.N. Sergeev, A.P. Agafonov, A.M. Shestopalov, E.A. Stavsky, A.Yu. Alekseev, O.K. Demina, E.B.Shemetova, A.A.Sergeev.T., V.A.Sergeev.T.; FGUZ Central Research Institute of Epidemiology of Rospotrebnadzor (G.A. Shipulin, A.T. Podkolzin, S.B. Yatsyshina); FGUZ RosNIPCHI "Microbe" af Rospotrebnadzor (A.V. Toporkov, S.A. Shcherbakova, N.V. Popov, V.P. Toporkov, A.A. Sludsky, I.N. Sharova, M.N. Lyapin, A.N.Matrosov, V.N.Chekasov, T.N.Chekasov); Statens forskningsinstitut for influenza fra det russiske akademi for medicinske videnskaber (O.I. Kiselev, L.M. Tsybalova, T.G. Lobova).

3. GODKENDT OG INTRODUCERET af lederen af ​​den føderale tjeneste for tilsyn med forbrugerrettighedsbeskyttelse og menneskelig velfærd, Chief State Sanitary Doctor of the Russian Federation G.G. Onishchenko den 26. december 2008 N 01 / 15701-8-34

Liste over forkortelser

AVAI - fugleinfluenzavirus type A

Biosikkerhed - biologisk sikkerhed

ELISA - enzymimmunoassay

IFA - metode til immunfluorescerende antistoffer

RT-PCR - omvendt transkriptionsmetode - polymerasekædereaktion

RTHA - hæmagglutinationshæmmende reaktion

WHO - Verdenssundhedsorganisationen

1 anvendelsesområde

1 anvendelsesområde

1.2. Disse retningslinjer er beregnet til specialister fra organer og institutioner i Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare og andre organisationer, uanset den juridiske form for ejerskab.

2. Almindelige bestemmelser

2.1. Formålet med at indføre disse retningslinjer er at regulere foranstaltninger til epizootologisk overvågning af aviær influenza under naturlige forhold. Komplekset af overvågningsforanstaltninger omfatter organisering af indsamling, opbevaring og transport af materiale, udførelse af laboratorietests samt sikring af den biologiske sikkerhed ved igangværende arbejde. Hovedopgaven med at overvåge aviær influenza er at identificere introduktionen af ​​patogenet og spredningen af ​​denne infektion i populationerne af vilde dyr i nærvandskomplekset for at udføre passende anti-epidemi og forebyggende foranstaltninger blandt mennesker.

2.2. Organisering og gennemførelse af aktiviteter til epizootologisk overvågning af aviær influenza under naturlige forhold på Den Russiske Føderations område udføres af organer og institutioner i Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare i samarbejde med organer og institutioner i ministeriet af Landbrug og Rosselkhoznadzor.

2.3. Mængden, arten og retningen af ​​forebyggende foranstaltninger blandt mennesker bestemmes af resultaterne af epizootiske undersøgelser og prognosen for den epizootiske og epidemiske situation for fugleinfluenza i specifikke regioner i Den Russiske Føderation.

2.4. Rospotrebnadzor-afdelingerne for de konstituerende enheder i Den Russiske Føderation, hvor der er påvist aviær influenza-epidemier, planlægger sammen med de udøvende myndigheder for de konstituerende enheder, Rosselkhoznadzor-organerne, ministeriet for nødsituationer og andre interesserede tjenester og afdelinger at træffe foranstaltninger at forhindre spredning af virussen blandt fjerkræ, fjerkræbedrifter og blandt mennesker, såvel som dem, der har til formål at minimere konsekvenserne af mulige udbrud, hvis de allerede er opstået, og deres bekæmpelse. En omfattende plan for forebyggende foranstaltninger mod aviær influenza udarbejdes af afdelingerne i Rospotrebnadzor sammen med sundhedsmyndighederne i de konstituerende enheder i Den Russiske Føderation, Rosselkhoznadzor og andre interesserede tjenester og afdelinger i en periode på mindst 2 år med årlige justeringer.

2.5. Prognosen for den epidemiologiske og epizootologiske situation for aviær influenza på Den Russiske Føderations territorium er udarbejdet af det videnskabelige og metodiske center for referencediagnostik og undersøgelse af højpatogene stammer af influenzavirus - NMCG (FGUN SRC VB "Vector" af Rospotrebnadzor ). Prognosen er lavet på baggrund af konklusionerne om den epidemiologiske og epizootologiske situation for fugleinfluenza i Rusland (1-2 gange om året), udarbejdet af Center for Økologi og Epidemiologi af Influenza - CEEG (State Research Institute of Virology opkaldt efter D.I. Ivanovsky RAMS) og Federal Influenza Center - FCG (GU Research Institute of Influenza RAMS). Disse konklusioner er dannet på grundlag af oplysningerne givet til CEEG og FCG fra de respektive institutioner, der overvåges af dem (bekæmpende peststationer og støttebaser bestemt ved Rospotrebnadzors orden af ​​31.03.05 N 373). Den formulerede generaliserede prognose og konklusioner om den epidemiologiske og epizootiske situation i Rusland sendes til Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare. Data om prognosen for den epidemiologiske og epizootiske situation for aviær influenza i Den Russiske Føderation overføres til WHO, til NICH's informationswebsted, til de nationale influenzacentre i CIS-landene og udviklingsinstitutioner (CEEG og FCG) efter aftale med Federal Service for Surveillance in the Field of Consumer Rights Protection and human wellbeing.

2.6. Rådgivende, metodisk og praktisk bistand til afdelingerne i Rospotrebnadzor i den russiske Føderations konstituerende enheder om forebyggelse og implementering af anti-epidemiforanstaltninger blandt mennesker i områder, der er ramt af en epizooti af aviær influenza, leveres af NMCG, CEEG og FCG, Anti-Plague Center, regionale centre til overvågning af infektionssygdomme I-II grupper af patogenicitet og centre for indikation og diagnostik af patogener af farlige infektionssygdomme, oprettet på grundlag af anti-pest institutioner.

3. Begrundelse for behovet for at overvåge aviær influenza

Behovet for at overvåge aviær influenza bestemmes af den reelle risiko for at introducere patogenet af denne sygdom af trækfugle og dannelsen af ​​infektionsfoci i mange regioner i Den Russiske Føderation, såvel som forekomsten af ​​epizootier blandt tamfugle og den potentielle fugleinfluenzavirusets evne til at forårsage infektion hos mennesker.

Siden 1997 har der været epizootier blandt vilde og tamfugle forårsaget af højpatogene influenza A-vira af undertypen H5N1, som også kan forårsage alvorlig sygdom blandt mennesker med høj dødelighed. I de senere år er der sket en udvidelse influenzavirus rækkevidde fugle, en stigning i artsspektret af bærere, en stigning i virulensen af ​​cirkulerende stammer. Evnen til at overleve i miljøet i lang tid, især ved lave temperaturer, bestemmer udvidelsen af ​​virusdistributionsområdet og behovet for overvågningsaktiviteter i de store territorier i Den Russiske Føderation.

Tilfælde af overførsel af influenza A-virus subtype H5N1 fra person til person er ikke blevet registreret, selvom familiære foci af sygdommen er blevet noteret gentagne gange. Samcirkulation af humane og fugleinfluenzavirusstammer øger imidlertid sandsynligheden for en gensortimentsbegivenhed og fremkomsten af ​​en pandemisk influenzavirus.

Federal Service for Veterinary and Phytosanitary Surveillance (Rosselkhoznadzor) overvåger fugleinfluenzasituationen og løser primært problemerne med at forhindre epizootiske udbrud blandt husdyr. Samtidig er epizootologisk overvågning af fugleinfluenza i naturlige biotoper i øjeblikket utilstrækkelig.

4. Organisering af epizootologisk overvågning af aviær influenza under naturlige forhold

4.1. Epizootologiske og epidemiologiske træk ved aviær influenza

4.2. Formålet med og målene for epizootologisk overvågning af aviær influenza under naturlige forhold

Hovedformålet med epizootologisk overvågning af aviær influenza er rettidig påvisning af tilfælde af introduktion af fugleinfluenzavirus i naturlige biotoper og sporing af spredningen af ​​denne infektion blandt vilde dyr i det nær-akvatiske kompleks.

For at nå målet er det nødvendigt at løse følgende opgaver:

udvælge geografiske punkter til overvågning med udarbejdelse af en matrikel af vandområder, hvor et stort antal fugle af det limnofile kompleks akkumuleres til hvile, rede og fodring;

organisere mobile felthold til at indsamle prøver af materiale til forskning;

at fastslå artssammensætningen, forekomsten, træk ved placeringen af ​​potentielle bærere af AIV i biotoperne af nærvandskomplekset;

indsamle prøver af feltmateriale til laboratorietestning for tilstedeværelsen af ​​aviær influenzavirus, bearbejde og omgående analysere resultaterne;

at studere den epizootologiske status for individuelle arter og grupper af fugle og andre dyr i nærvandsbiocenoser;

at studere parametrene for den epizootiske proces i foci af aviær influenza (sæsonbestemte træk, epizootiske områder, artsspektrum af inficerede dyr osv.);

vurdere graden af ​​risiko for infektion af forskellige typer vandområder beliggende i umiddelbar nærhed af landbebyggelser og store fjerkræfarme;

udarbejde en liste over bosættelser, hvor det er muligt for husdyr at blive smittet med aviær influenza fra vilde nærvandsfugle;

udvikle foranstaltninger til forebyggelse af epizootiske udbrud og menneskelige sygdomme;

udføre sanitært-pædagogisk og forklarende arbejde blandt lokalbefolkningen;

lave prognoser for udviklingen af ​​situationen;

tilrettelægge underretning til sundhedsmyndigheder og lokale udøvende myndigheder om resultaterne af en epizootologisk undersøgelse af territorier for tilstedeværelsen af ​​foci af aviær influenzavirus og en prognose for udviklingen af ​​den epidemiske situation.

4.3. Taktik og metoder til epizootologisk overvågning af fugleinfluenza under naturlige forhold

Grundlaget for epizootologisk overvågning af aviær influenza under naturlige forhold er undersøgelsen af ​​akvatiske og vandnære biocenotiske komplekser, som udføres på en planlagt måde. Eftersøgningen efter det forårsagende agens til aviær influenza bør først og fremmest udføres i biotoper tæt på vandet, lokaliseret både på steder med koncentration og rede, og langs og inden for de interkontinentale ruter for sæsonbestemte flyvninger eller træk af fugle, primært tilhørende fugle ordenerne af Anseriformes, Charadriiformes, lappedykker, copepoder, ankelfod, trane-lignende, due-lignende, kylling, spurvefugle. Samtidig udvælges steder til indsamling af materiale nær og (eller) på bosættelser og rekreationssteders territorium såvel som i områder, hvor fugledøden fra influenza og tilfælde af menneskelig sygdom blev noteret. Her udvælges også nøglesteder (points of long-term monitoring - PDM), hvor der vil blive forsket over flere sæsoner. Hver lokalitet undersøges mindst 3 gange om året (i forårstrækperioden, i rede- og efter-redeperioderne). Ifølge epidemiologiske indikationer udføres der akutte yderligere epizootologiske undersøgelser.

En forudsætning for at starte en epizootologisk undersøgelse af nærvandsbiotoper er begyndelsen på forårstrækket af fugle i nærvandskomplekset, oplysninger om dødelighed blandt sump-, sø- og flodfugle.

Den epizootiske situation vurderes på grundlag af en epizootisk undersøgelse, hvor tilstanden af ​​antallet af baggrundsdyrearter i nærvandsbiotoper registreres, og på grundlag af resultaterne af laboratorieundersøgelser, der bekræfter tilstedeværelsen af ​​fugleinfluenzapatogenet. i forskellige genstande. På baggrund af disse data gives en begrundet konklusion om faren for epizootier.

Under en epizootologisk undersøgelse for aviær influenza i naturlige biocenoser er det nødvendigt at være opmærksom på vandområder, hvor ensomme, flokfugle og koloniale fugle ophobes. Især på stillestående ferske eller let mineraliserede vandområder med en overflod af kystnær vand- og buskvegetation, hvor der er optimale forhold for ly, hvile, fodring og rede for fugle. Når de vælger undersøgelsessteder og bestemmer sammensætningen og antallet af prøver, styres de af funktionerne i det undersøgte områdes hydrografiske netværk: placeringen af ​​reservoirer, deres størrelse. Først og fremmest kontrolleres søer, sumpet lavland, damme, bugter, flodmundinger, eriki, flodsletter osv., der ligger tæt på landlige bebyggelser.

I processen med epizootologisk undersøgelse udføres observationer af vejrforhold, fænomenologiske fænomener, fugletællinger, arten af ​​deres fordeling, overflod og aktivitet. Det er nødvendigt at identificere og overvåge timingen, varigheden og ruterne for deres masse-sæsonmæssige flyvninger og fodervandringer. Når man søger efter foci af aviær influenza, lægges der vægt på de ydre tegn på en epizooti hos vilde fugle, især ved at bemærke et kraftigt fald i fuglenes antal og aktivitet, ændringer i deres adfærd i vandområder, udseendet af sløve individer, pjusket fjer, ubevægelighed osv. I betragtning af kyllingernes høje følsomhed over for influenzavirus er det mest sandsynligt, at syge individer bliver opdaget i yngleperioden.

Hovedobjekterne i indsamlingen af ​​prøver til laboratorieanalyse er vandfugle og nærvandsfugle: gæs, svaner, ænder, sandpiper, måger og terner, hejrer og hyrder. Andre vandfugle, herunder daglige rovfugle (falconiformes) og spurvefugle, bør også jages for fuldstændig information. Det er obligatorisk at studere fugle af synantropiske arter: duer, skater, krager og spurve. Alle døde fugle fundet på et reservoir eller i en kystzone er nødvendigvis genstand for indsamling og laboratorieanalyse. Det er også nødvendigt at fange små pattedyr, der lever langs bredden af ​​vandområder: vandmuslinger, bisamrotter, mus, spidsmus mv.

Vilkårene og varigheden af ​​ekspeditionsfeltarbejde bestemmes af vejrregimet, årets fænomenologiske fænomener og fugleøkologiens særegenheder. De optimale perioder for indsamling af materiale i undersøgelsen af ​​aviær influenza bør betragtes som perioderne med sæsonbestemte massetræk af trækfugle om foråret og efteråret (april, september) samt rede- og yngleperioderne fra ungernes udseende til deres opgang. til fløjen (maj-juli).

På den indledende fase, før afrejse til feltet, udføres undersøgelsen af ​​kartografiske materialer, topografiske, hydrografiske, geobotaniske eller landskabskort og skemaer i skala 1:25000-1:200000 erhverves. På grundlag af disse dokumenter udarbejdes kalender-territoriale planer og arbejdsplaner, parkeringspladser og bevægelsesruter for zoologiske grupper skitseres.

Epizootologisk undersøgelse udføres ved sekventiel radial omvej af territoriet. Ruter, rækkefølge af overførsler, steder, antal og varighed af stop bestemmes afhængigt af situationen, terrænets art, arbejdsforhold, bekvemmelighed for adgang og transport af de indsamlede prøver til laboratoriet.

Ekspeditionsgruppens opgaver har også til opgave at overvåge befolkningen: dens størrelse, økonomiske aktivitet og arten af ​​dens ophold på reservoirerne. Der lægges særlig vægt på bevægelsen af ​​landbrugsarbejdere, jægere, fiskere, turister og feriegæster i perioden med mulig forværring af situationen med fugleinfluenza. Det er nødvendigt at udføre aktivt forklarende og sanitært-pædagogisk arbejde blandt den lokale og midlertidige befolkning i tæt kontakt med repræsentanter for lokale sundhedsmyndigheder, myndigheder, politi og repræsentanter for veterinærtjenesten.

Den mindste sammensætning af feltholdet: en ornitolog, en teriolog, en virolog, en epidemiolog, en laboratorieassistent, en chauffør, en kok. Skydning af fugle kan udføres på kontraktbasis af et særligt hold af jægere.

Under den epizootologiske undersøgelse anvendes almindeligt anerkendte zoologiske og økologiske metoder, reguleret af de gældende reguleringsdokumenter (f.eks. MU 3.1.1029-01).

4.4. Regler for indsamling, opbevaring og transport af materiale til laboratorieforskning

Alt arbejde med indsamling, opbevaring og transport af feltmateriale, der mistænkes for at indeholde type A aviær influenzavirus (subtype H5 og H7) udføres i overensstemmelse med gældende SP 1.2.036-95 og MU 3.1.1027-01. Arbejdet med indsamling af markmateriale udføres i sæsonbestemt beskyttelsesdragt, suppleret med åndedrætsværn, beskyttelsesbriller og gummihandsker (bilag 6 til SP 1.3.1285-03).

For laboratorieforskning fra naturlige biotoper skal du tage:

fugle, kyllinger;

fugleæg;

fuglefæces og (eller) udstrygning fra cloaca og luftrør;

små pattedyr af semi-akvatiske biotoper;

vand og silt på redepladser.

Høstede kyllinger, småfugle og pattedyr(levende og pinefulde individer dræbes først med en pincet) anbringes i poser af tæt hvidt stof (hvert dyr i en separat pose), kanterne af poserne foldes to gange og bindes tæt. Brug poserne med arret ude. De er forsynet med etiketter, der angiver dato, nøjagtig adresse, station, dyretype og plukkerens navn. Til transport lægges stofposer med dyrekroppe i en oliedugspose.

Hos store fugle tag en smøre fra cloacaen og skær hovedet af med en del af halsen. Hovedet lægges i en separat voksdugpose, som er forsynet med en etiket.

Opbevaringsforhold. Ved en temperatur på 2 til 8 °C - i løbet af dagen, hvis langtidsopbevaring er nødvendig, åbnes dyrene, organer og væv fryses ved en temperatur under minus 40 °C.

Transportforhold. Dyrekroppe og hoveder - i løbet af dagen ved en temperatur på 2 til 8 ° C. Organer - frosset i en Dewar-beholder eller termisk beholder med tøris.

Udtværinger fra kloaken tag tørre sterile prober med vatpinde. Efter at have taget materialet, anbringes podepinden (den arbejdende del af sonden) i et sterilt engangsmikrorør med 500 µl af en steril 0,9 % natriumchloridopløsning eller fosfatbuffer. Enden af ​​sonden brækkes af eller skæres af, så den gør det muligt at lukke rørets låg. Reagensglasset med opløsningen og den arbejdende del af sonden lukkes og placeres i et stativ, som derefter placeres i en termisk beholder med køleelementer.

Opbevaringsforhold. Ved en temperatur på 2 til 8 ° C - i 3 dage. Hvis langtidsopbevaring er nødvendig, fryses materialet ved en temperatur under minus 40 °C.

Transportforhold. Ved en temperatur på 2 til 8 ° C - i 3 dage. Frosset - i en Dewar-beholder eller termisk beholder med tøris.

Hvis fuglen skal efterlades i live ( repræsentanter for sjældne arter), tages podninger fra hendes kloak efter indfangning.

fugleæg taget fra reden (ikke mere end 50% af koblingen), markeret og anbragt i plastikbeholdere med huller til æg, skiftende med vat. Beholderne anbringes i en metalbeholder og leveres til laboratoriet.

Opbevaringsforhold. Opbevares ved 2 til 8°C i 3 dage. Hvis langtidsopbevaring er påkrævet, overføres æggenes indhold til sterile plastflasker med skruelåg og fryses ved en temperatur under minus 40 °C.

Transportforhold. Inden for et par timer efter opsamling - ved omgivelsestemperatur. Inden for 3 dage - ved en temperatur på 2 til 8 °C. Indholdet af æggene fryses ved en temperatur under minus 40 ° C i en termisk beholder med tøris.

fugleafføring(4-5 g) opsamles med engangsspatler (spatler) i sterile plastbeholdere (plastikflasker med skruelåg).

Opbevaringsforhold. Ved en temperatur på 2 til 8 °C - inden for 3 dage, ved en temperatur på minus 40 °C - 30 dage.

Transportforhold. Ved en temperatur på 2 til 8 ° C - i 3 dage. Frosset materiale - i en termisk beholder med køleelementer ved en temperatur på minus 70 °C.

vand og silt indsamlet på redepladser i kystzonen. Slam (5-10 g) opsamles med scoops og overføres til sterile plastflasker med skruelåg. Vand i et volumen på 1 liter opsamles i sterile plastikflasker med skruelåg. Beholdere og flasker er mærket og anbragt i en metalbeholder med absorberende materiale, hvis mængde skal være tilstrækkelig til at absorbere indholdet i tilfælde af krænkelse af forsendelsesbeholderens integritet.

Opbevaringsforhold. Ved temperaturer fra 2 til 8 °C.

Transportforhold

Ved prøveudtagning af organer anvendes et sterilt kirurgisk instrument (saks, skalpeller, pincet) og sterile fade.

Indre organer(fragmenter af luftrør, lunger, milt, hjerne, bihuler, luftsække, tarme) fra slagtede eller døde fugle, kyllinger og små pattedyr opnås ved obduktion af dyr. Før åbning nedsænkes slagtekroppen i en desinfektionsopløsning (5 % kloramin B) i 20-30 sekunder. Når der tages prøver af dyreorganer, behandles stedet for det fremtidige snit med en 5% jodopløsning eller 70% ethanolopløsning, og huden, musklerne i bugvæggen eller kranieknoglerne skæres med sterile instrumenter. Et snit i væggen af ​​bughulen laves med et "forklæde", hvilket bringer sidelinjerne af snittet langs ribbenene over hjertets niveau, og den resulterende flap foldes tilbage for at blotlægge de indre organer. Før man tager hjernen, skæres hele den occipitale del af kraniet af. Ved hjælp af det andet sæt instrumenter skæres stykker af indre organer af i størrelse fra en lille ært til en hasselnød, prøverne placeres over brænderflammen i sterile engangsplastikreagensglas eller -beholdere, hermetisk forseglet.

Opbevaringsforhold. Frys ved temperaturer under minus 40 °C.

Transportforhold. Frosset - i en Dewar-beholder eller termisk beholder med tøris.

Udtværinger-aftryk, opnået fra slimhinden i de øvre luftveje (bedre) og indre organer, fremstilles på rene glasobjektglas affedtet med ether, hvortil der presses slimhinder eller friske dele af organer. Præparaterne tørres i luft og fikseres i 20 minutter i kemisk ren acetone afkølet fra 2 til 8 °C. Placeret i stativer til glasglas (på kanten). Læg mærke til, at stregerne er faste.

Opbevaringsforhold. Ved en temperatur på 2 til 8 ° C i en uge, ved en temperatur på minus 20 ° C - op til 6 måneder.

Transportforhold. Ved temperaturer fra 2 til 8 °C.

Temperaturen under minus 40 °С leveres i en Dewar-beholder fyldt med flydende nitrogen (minus 196 °С) eller i en termisk beholder med tøris (minus 70 °С).

Transport af prøver udføres i overensstemmelse med SP 1.2.036-95. Termobeholderen og Dewar-beholderen er pakket ind med papir (beklædt med materiale), snøret, forseglet og transporteret til laboratoriet med kurer. Det leverede materiale er ledsaget af et følgebrev, en pakkehandling. Termobeholderen og Dewar skal have et særligt skilt (mærkat med et mærke) "Fare! Må ikke åbnes under transport." Hvis materialet skal opbevares og transporteres i en Dewar-beholder eller i en termisk beholder med tøris, anvendes forseglede plastbeholdere, der er modstandsdygtige over for lave temperaturer eller kryovialer til at opsamle materialet. Dewars- og tørisbeholdere må ikke lukkes hermetisk for ikke at forhindre frigivelse af langsomt fordampende nitrogen eller kuldioxid.

Inden afgang til marken, skal Dewar-fartøjer kontrolleres i laboratoriet for overensstemmelse med pasdata og egnethed til drift og transport. Ved påfyldning, lastning, losning og transport af Dewar-fartøjer er det nødvendigt at have almindelige overalls, sko og lærredshandsker, så det i tilfælde af spild eller sprøjt af kvælstof er umuligt at få det på åbne dele af kroppen. Under transporten skal Dewars omhyggeligt sikres for at forhindre væltning, sprøjt eller spild af nitrogen.

Kun engangsfrysning og optøning af materiale er tilladt.

5. Metoder til laboratorieforskning

Laboratorieundersøgelser udføres i overensstemmelse med de nuværende sanitære og epidemiologiske regler SP 1.3.1285-03, der regulerer arbejdet med mikroorganismer af I-II grupper af patogenicitet (fare), MUK 4.2.2136-06 "Organisation og gennemførelse af laboratoriediagnostik af sygdomme forårsaget af meget virulente stammer af influenzavirus type A fugle (VGPA).

Fluorescerende antistofmetode (MFA)

Til MFA anvendes faste udstrygninger-aftryk af dyreorganer og slimhinder. Reaktionen udføres i overensstemmelse med instruktionerne til det diagnostiske præparat "Fluorescerende immunoglobuliner til tidlig differentialdiagnose af influenza A (H5)", fremstillet af LLC "Enterprise til produktion af diagnostiske produkter" State Research Institute of Influenza RAMS (St. Petersborg).

Ved hver udstrygning undersøges mindst 20-25 synsfelter.

Vurderingen af ​​graden af ​​lysstyrke af luminescensen af ​​virale antigener farvet med luminescerende immunglobuliner udføres i henhold til den generelt accepterede skala:

++++ (4+) - lys fluorescens inde i vævsceller;

+++ (3+) - moderat fluorescens inde i vævsceller;

++ og + (2+ og 1+) - svag fluorescens inde i (eller uden for) vævsceller.

Et positivt resultat af immunfluorescensundersøgelsen er påvisningen i præparationen af ​​mindst 5-8 celler af organvævet, som har karakteristiske indeslutninger med specifik fluorescens for tre og fire plusser.

Polymerasekædereaktion (PCR)

Molekylærgenetiske undersøgelser udføres i overensstemmelse med de gældende reguleringsdokumenter: MU 1.3.1794-03 "Organisering af arbejdet under PCR-undersøgelser af materiale inficeret med mikroorganismer af patogenicitetsgruppe I-II"; WHO-retningslinjer for påvisning af H5N1 aviær influenzavirus i prøver fra personer med mistanke om sygdom (WHO, Genève, august 2007); Instruktioner til brug af testsystemet til påvisning af influenza A-virus-RNA og identifikation af undertyperne H5 og H7 ved omvendt transkription og polymerasekædereaktion (f.eks. AmpliSense-kits Influenza virus En H5N1-FL" eller "FLU", produceret af det centrale forskningsinstitut for epidemiologi i Rospotrebnadzor).

"FLU"-kittet giver dig mulighed for at detektere influenza A-virus-RNA og identificere H5- og H7-undertyper i materiale fra døde og syge dyr og miljøgenstande. Materialet til undersøgelsen er: kuld, udstrygninger fra cloaca og luftrør, indre organer (fragmenter af luftrør og lunger, milt, hjerne), vand, vask fra æg og æggehvide. Testsystemet inkluderer reagenssæt: til RNA-ekstraktion, til opnåelse af cDNA på en RNA-matrix, til amplifikation af cDNA-regioner (PCR) og påvisning af amplifikationsfragmenter i elektroforetisk analyse og hybridiserings-fluorescensdetektionsformater (FEP og FRT), og indeholder også kontrolprøver .

Indstil "AmpliSense" Influenza virus A H5N1-FL" giver dig mulighed for at påvise influenza A-virus-RNA og identificere H5N1-undertypen i materialet fra døde og syge dyr og miljøobjekter. Materialet til undersøgelsen er: ekskrementer, udstrygninger fra cloaca og luftrør, indre organer (fragmenter) af luftrøret og lungerne, milten, hjernen), vand, vask fra æg og æggehvide. Testsystemet omfatter kits af reagenser: til RNA-ekstraktion, til opnåelse af cDNA på en RNA-skabelon, til amplifikation af cDNA-regioner (PCR) og detektion af amplifikationsfragmenter i hybridiseri(FEP og FRT) og indeholder også kontrolprøver.

Enzym immunoassay (ELISA)

Til undersøgelsen anvendes individuelle blodsera fra fugle uden tegn på hæmolyse og bakteriel kontaminering i volumen på 0,3-0,5 ml. Reaktionen er sat op i henhold til den midlertidige instruktion om brug af et kit til påvisning af antistoffer mod aviær influenzavirus (AIV) ved enzymimmunoassay (f.eks. "Kit til påvisning af antistoffer mod fugleinfluenzavirus ved ELISA " produceret af NPP "AVIVAC").

Resultaterne optages på et spektrofotometer ved en bølgelængde på 492 nm (ved brug af OFD) eller 450 nm (ved brug af TMB).

Alle inkubationsstadier udføres i 30 minutter ved en temperatur på 20-30 °C.

Hæmagglutinationshæmmende reaktion (HITA)

Påvisningen af ​​specifikke antistoffer mod aviær influenzavirus i blodsera fra fugle udføres ved en mikrometode i overensstemmelse med brugsanvisningen til "Sæt antigener og sera til diagnosticering af aviær influenza i hæmagglutinationshæmningstesten (HITA) )".

Regnskab for reaktionen udføres visuelt efter fuldstændig sedimentering af erytrocytter i kontrolbrøndene (i form af "knapper"). Serumantistoftiter anses for at være den højeste fortynding, hvor agglutination af erytrocytter af influenzavirusantigenet er fuldstændig fraværende.

Positive prøver identificeret under laboratorietesten sendes til virusisolering og identifikation til FGUN SRC VB "Vector" af Rospotrebnadzor.

6. Sikring af kravene til biologisk sikkerhed under epizootologisk overvågning af aviær influenza under naturlige forhold

For at sikre den biologiske sikkerhed ved arbejde under epidemiologisk overvågning i potentielle naturlige foci af aviær influenza, bør følgende tages i betragtning:

ansatte fra pestbekæmpende institutioner deltager i undersøgelsen, og ansatte i andre medicinske og biologiske organisationer og institutioner, der har adgang til at arbejde med PBA af I-II patogenicitetsgrupper, kan også inddrages. Hjælpepersonale (førere, skytter osv.) har tilladelse til at arbejde efter briefingen;

Hele sammensætningen af ​​løsrivelsen eller ekspeditionen skal være bekendt med kravene til biologisk sikkerhed ved arbejde med patogener af naturlige fokale infektioner, der cirkulerer i området. Lederen (chefen) af den epidemiologiske afdeling (ekspeditionen) er ansvarlig for overholdelse af disse krav ved fangst af vilde dyr og indsamling af markmateriale;

ethvert materiale anses for at være potentielt farligt i forhold til det mulige indhold af patogener af naturlige fokale sygdomme, karakteristisk for den landskabszone, inden for hvilken det blev indsamlet;

rekognosceringsundersøgelse af området, installation af fiskeredskaber udføres i speciel beklædning (overalls eller anti-encephalitis-dragt, støvler);

eftersyn af det udsatte fiskegrej og opsamling af markmateriale udføres i arbejdstøj, suppleret med forklæder og ærmer af vandtæt stof (film), gummihandsker (2 par) [ved arbejdets afslutning er forklæder, ærmer og handsker desinficeret];

for at beskytte åndedrætsorganerne, brug engangsbind af bomuldsgaze eller anti-støv åndedrætsværn (præference gives til åndedrætsværn "Petal" eller åndedrætsværn af en klasse, der ikke er lavere end FFP2);

beskyttelse af synsorganerne udføres med tætsiddende briller;

desinfektion af fiskeredskaber og andre værktøjer udføres dagligt ved arbejdets afslutning ved at varme op i solen (om sommeren), koge, behandle med desinfektionsopløsninger, efterfulgt af ventilation, kasser og jigger behandles med desinfektionsopløsninger;

analyse af feltmateriale, obduktion af dyr udføres i en type I anti-pest dragt (åndedrætsværn svarer til paragraf 6 i dette afsnit, funktionerne ved at tage materiale og forberede prøver til transport til laboratoriet er beskrevet i afsnit 4.4 " Indsamling af feltmateriale til laboratorieforskning");

efter afslutning af arbejdet specificeret i paragraf 9 desinficeres værktøj og beskyttelsesbeklædning (se bilag 4), brugte spidser, pipetter desinficeres ved nedsænkning i en 6% hydrogenperoxidopløsning i 60 minutter, dispensere desinficeres ved at tørre to gange med et interval af 15 minutter 6 % hydrogenperoxidopløsning (eksponering 120 min);

resterne af feltmateriale, der ikke er genstand for laboratorieforskning, brændes eller desinficeres ved autoklavering, det resulterende affald anbringes i særligt gravede gruber, som derefter begraves;

transport af materialet til det diagnostiske laboratorium udføres ved transport af ekspeditionen;

medlemmer af ekspeditionen udsættes for daglig termometri, efter arbejdets afslutning etableres en observation i en periode på 7 dage;

førstehjælpskassen til nødforebyggelse skal udfyldes i overensstemmelse med SP 1.3.1285-03

7. Sikring af biologisk sikkerhed under laboratoriediagnostiske undersøgelser

7.1. Udførelse af arbejde, der ikke er relateret til akkumulering af virus, dannelse af aerosoler af inficeret materiale (farvningsudstrygninger, opsætning af serologiske reaktioner med ikke-desinficeret diagnostisk materiale, serologiske undersøgelser med ikke-desinficeret materiale, RNA-isolering) udføres i en type IV anti-pest dragt, suppleret med en bomuldsgaze bandage (respirator) og to par gummihandsker. Arbejdet udføres i et klasse II biologisk sikkerhedsskab*.
________________

7.2. Udførelse af arbejde med infektion af cellekulturer eller kyllingeembryoner, samt arbejde relateret til muligheden for aerosoldannelse, udføres i klasse III sikkerhedsbokse. Arbejdet udføres i en type IV anti-pest dragt, en bomuldsgaze bandage (respirator) og gummihandsker (to par)*.
________________
* I mangel af biologiske sikkerhedsskabe udføres arbejdet i en type I anti-pest-dragt, suppleret med et vandtæt forklæde og et andet par handsker.

7.3. Ved at arbejde med inaktiveret materiale, udføre den omvendte transkriptionsreaktion og PCR, udføres elektroforetisk påvisning af resultaterne af undersøgelsen i en type IV anti-pestdragt, suppleret med gummihandsker (to par).

7.4. Før arbejdet påbegyndes, skal personalet instrueres i, hvordan det skal forholde sig i tilfælde af en ulykke, herunder følgende scenarier: en ulykke i et biologisk sikkerhedsskab; ulykke uden for det biologiske sikkerhedsskab; aerosolulykke.

7.5. Metoderne til desinfektion af forskellige genstande i laboratoriediagnosen af ​​aviær influenzavirus udføres i overensstemmelse med SP 1.3.1285-03:

7.5.1. Desinfektion af rumoverflader (gulv, vægge, døre), udstyr, skriveborde og andet ved dobbelt aftørring med et interval på 15 minutter med en 6% hydrogenperoxidopløsning eller en 3% kloraminopløsning (eksponering 120 minutter) efterfulgt af UV-behandling i 30 minutter minutter.

7.5.2. Desinfektion af beskyttelsestøj udføres:

a) kogning i en 2% sodaopløsning i 30 minutter fra kogeøjeblikket;

b) iblødsætning i 30 minutter ved 50 °C i en 3 % hydrogenperoxidopløsning med tilsætning af 0,5 % rengøringsmiddel.

7.5.3. Desinfektion af handsker - ved iblødsætning i 60 minutter i en 6% hydrogenperoxidopløsning med tilsætning af 0,5% rengøringsmiddel eller i en 3% kloraminopløsning.

7.5.4. Desinfektion af laboratorieglasvarer, autoklaverbare dispensere, spidser, virusholdige væsker, agarosegel, metalinstrumenter udføres ved autoklavering - tryk 2,0 kgf / cm (0,2 MPa), temperatur (132 ± 2) ° C, tid 45 min.

7.5.5. Desinfektion af dispensere - dobbelt aftørring med et interval på 15 minutter med en 6% hydrogenperoxidopløsning (eksponering 120 minutter), efterfulgt af UV-behandling i 30 minutter.

7.6. Førstehjælpssættet til nødforebyggelse skal udfyldes i overensstemmelse med SP 1.3.1285-03 og suppleres med to af følgende antivirale lægemidler: arbidol, rimantadin, algirem, oseltamivir, zanamivir.

8. Lovmæssige referencer

1. Grundlæggende om lovgivningen i Den Russiske Føderation om beskyttelse af borgernes sundhed. M., 1993 .. - Notat fra databaseproducenten.

6. SP 1.2.036-95 "Procedure for bogføring, opbevaring, overførsel og transport af mikroorganismer af I-IV patogenicitetsgrupper".

7. Proceduren for udvikling, undersøgelse, godkendelse, offentliggørelse og distribution af regulatoriske og metodologiske dokumenter for systemet for sanitær og epidemiologisk regulering: Samling R 1.1.001-1.1.005-96. M., 1998.

8. SP 3.1.097-96 "Forebyggelse og kontrol af infektionssygdomme, der er almindelige for mennesker og dyr: Indsamling af sanitære og veterinære regler".

9. MU 3.1.1029-01 "Retningslinjer for fangst, opgørelse og prognose af antallet af små pattedyr og fugle i naturlige foci af zoonoser".

10. MU 1.3.1794-03 "Organisering af arbejdet under PCR-undersøgelser af materiale inficeret med mikroorganismer af patogenicitetsgruppe I-II".

11. MU 4.2.2039-05 "Teknik til indsamling og transport af biomaterialer til mikrobiologiske laboratorier".

12. MUK 4.2.2136-06 "Organisation og gennemførelse af laboratoriediagnostik af sygdomme forårsaget af meget virulente stammer af aviær influenza A-virus (AVAI) hos mennesker".

16. Retningslinjer "Hurtig diagnosticering af influenza og andre akutte luftvejsvirusinfektioner ved immunfluorescerende metode". St. Petersborg, 2006, godkendt. Leder af Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare G.G. Onishchenko 25. april 2006

17. Retningslinjer "Isolering af influenzavirus i cellekulturer og deres identifikation". St. Petersborg, 2006, godkendt. Leder af Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare G.G. Onishchenko 25. april 2006

18. SP 1.2.1318-03 "Proceduren for udstedelse af en sanitær-epidemiologisk konklusion om muligheden for at arbejde med patogener af humane infektionssygdomme af I-IV patogenicitet (fare) grupper, genetisk modificerede mikroorganismer, giftstoffer af biologisk oprindelse og helminths. "

19. Interstate standard GOST 25581-91 "Landbrugs-, synantropiske, vilde, eksotiske fugle". Dato for introduktion 01.01.93. Metoder til laboratoriediagnostik af influenza.

20. Bekendtgørelse fra ministeriet for sundhed og social udvikling i Rusland af 31. maj 2005 N 376 "Om levering af ekstraordinære rapporter om nødsituationer af sanitær og epidemiologisk karakter".

21. Bekendtgørelse fra Federal Service for Surveillance on Consumer Rights Protection and Human Welfare nr. 373 af 31. marts 2005 "Om forbedring af systemet for epidemiologisk overvågning og kontrol af influenza og akutte luftvejsvirusinfektioner".

22. Bekendtgørelse fra Federal Service for Surveillance on Consumer Rights Protection and Human Welfare dateret 10. maj 2007 N 144 "Om etablering af et videnskabeligt og metodologisk center for referencediagnostik og undersøgelse af højpatogene influenzavirusstammer".

23. Bekendtgørelse fra det russiske landbrugsministerium af 27. marts 2006 N 90 (registreringsnummer 7756) "Om godkendelse af reglerne for bekæmpelse af fugleinfluenza".

24. Anbefalinger til beskyttelse af personer i kontakt med inficerede fugle og involveret i masseslagtning af dyr, der potentielt er inficeret med aviær influenzavirus, godkendt. Chief State Sanitary Doctor of the Russian Federation 05.08.05 N 0100/6198-0523.

25. WHO-retningslinjer for diagnosticering og kontrol af dyreinfluenza (WHO/CDC/CSR/NSC/2002.5).

26. WHO-retningslinjer for påvisning af H5N1 aviær influenzavirus i prøver fra mistænkte individer. WHO, Genève, august 2007. (Anbefalinger for laboratorieprocedurer til påvisning af aviær influenza A H5N1-virus i prøver fra mistænkte humane tilfælde. WHO Geneve, august 2007).

27. Onishchenko G.G., Kiselev O.I., Sominina A.A. Styrkelse af influenzaovervågning og -kontrol som et kritisk element i beredskabet til sæsonbestemte epidemier og den næste pandemi (vejledning). Moskva-St. Petersborg, 2004.

28. Fugleinfluenza. Kliniske træk, standardiserede principper for diagnose, behandling og forebyggelse, godkendt. Leder af Federal Service for Supervision of Consumer Rights Protection and Human Welfare G.G. Onishchenko 02.09.05.

29. Neklyudova L.I., Gumennik A.E., Fedorova Yu.B. et al. Praktisk virologi (del III). M., 1981.

30. Påvisning af cirkulation af arbovirus. Metoder til virologiske og serologiske undersøgelser. Kliniske og epidemiologiske karakteristika for lidt undersøgte arbovirusinfektioner. Tilgange til overvågning af naturlige foci af arbovirus / Ed. acad. RAMS D.K.Lvova //Itogi videnskab og teknologi. Ser. Virologi. T.25. M., 1991.

31. Syurin V.N., Famuilenko A.Ya., Soloviev B.V. osv. Virussygdomme hos dyr. M.: VNITIBL, 1998.

Bilag 1. Liste over dokumenter, der tillader indsamling af biologisk feltmateriale som led i overvågning af aviær influenza inden for Den Russiske Føderations grænser

Bilag 1

1. Tilladelse til at skyde fugle.

A) Tilladelsen udstedes af det regionale jagtsyn. En organisation, der planlægger at skyde fugle for at opdage individer, der er ramt af fugleinfluenzavirus, skriver et begrundelsesbrev til lederen af ​​den regionale jagtinspektion. Brevet skrives på virksomhedens brevpapir i den foreskrevne form.

B) Skydning af fugle kan kun udføres af et medlem af det regionale jægerselskab, der er udstyret med de relevante dokumenter. Det er tilrådeligt at inddrage personer, der har ret til at drive jagt, blandt medarbejderne i organisationen, der udfører den epizootologiske undersøgelse. Anskaffelse af forbrugsvarer (patroner) i tilstrækkelige mængder bør foretages fra rejseudgifter.

2. Tilladelse til at udføre epizootologisk forskning i vandnære levesteder med ret til at oprette en midlertidig lejr i et vandbeskyttelsesområde.

Tilladelsen udstedes af det regionale fiskesyn. Det er nødvendigt at give forklaringer om formålet med og målene for den planlagte forskning i de områder, der kontrolleres af fiskeinspektionen, som er skrevet på brevpapir i den foreskrevne form.

3. Koordinering med regionale miljømyndigheder.

En klar forklaring af de planlagte aktiviteter er nødvendig i forbindelse med den reelle trussel om komplikation af den epidemiologiske situation. Der skrives et forklarende brev til lederen af ​​det regionale udvalg for økologi på brevpapir i den foreskrevne form.

4. Koordinering med grænsetjenesten i Den Russiske Føderation.

Koordinering udføres kun i tilfælde af epidemiologiske undersøgelser i grænseområderne. Anmodningen om tilladelse til at arbejde i grænsezonen er skrevet i navnet på lederen af ​​grænsetjenesten i den givne region på et brevpapir i den foreskrevne form.
Der opstod en fejl

Betalingen blev ikke gennemført på grund af en teknisk fejl, midler fra din konto
blev ikke afskrevet. Prøv at vente et par minutter og gentag betalingen igen.

Federal Agency for Education

Statens uddannelsesinstitution

Moscow State University of Applied Biotechnology

Fakultet for Veterinær og Sanitær

i veterinær virologi

Emne: "Avian influenza virus"

Moskva - 2007

Introduktion

Fugleinfluenza blev først beskrevet af Perroncito i 1878. I nogen tid blev det forvekslet med Newcastle disease, men efter at ætiologien var etableret, blev sidstnævnte kaldt asiatisk, og fugleinfluenza - europæisk (klassisk) fuglepest. Udbrud af europæisk fuglepest forekom regelmæssigt i begyndelsen af ​​forrige århundrede i Europa, Afrika og Asien. Sygdommen nåede først Nordamerika i 1925.

I løbet af de sidste 50 år af det sidste århundrede blev 18 af de største epizootier af denne sygdom registreret i udlandet: 5 forekom i Storbritannien, 5 i Australien, 3 i andre europæiske lande og en hver i Pakistan, Hong Kong, Canada, USA og Mexico. Den europæiske fuglepest gik heller ikke uden om vores land - den forårsagede især stor skade: på fjerkræavl i de centrale regioner i Rusland i 60'erne ... 70'erne i det sidste århundrede.

I det nye årtusinde er sygdom blevet en af ​​de største bekymringer for veterinærer og læger over hele verden. I 2002 blev den første gang registreret i Sydamerika. Epizootien, som begyndte næste år i Sydøstasien, adskiller sig fra de foregående i den øgede forekomst af sygdom og død blandt mennesker, varigheden og omfanget, der truer dens overgang til en pandemi.

I denne publikation vil vi kun diskutere nogle funktioner i biologien af ​​AIV *, som kan forklare årsagerne til, hvad der sker, og også dvæle ved de praktiske aspekter, der er vigtige for den korrekte diagnose og forebyggelse af den udbredte spredning af sygdommen .

* Forkortelser: AIV, fugleinfluenzavirus; EC - kyllingeembryoner; RHA - hæmagglutinationsreaktion; RDP - diffusionsfældningsreaktion; PCR - polymerasekædereaktion

1. Fugleinfluenzavirus

1.1. Patogen

Influenzavirus er agenser med enkeltstrenget RNA inkluderet i fam. Orthomyxoviridae. De er opdelt i 3 slægter: A, B og C. Hos fjerkræ i marken er infektionen forårsaget af AIV, som er en del af A-type human influenzavirus.

Type B- og C-virus findes normalt kun hos pattedyr, og type A - hos mennesker, grise, heste, sæler, hvaler, mink og andre pattedyr, såvel som i mange typer fjerkræ (kyllinger, kalkuner, ænder, fasaner, marsvin) fugle, vagtler). , strudse), alle andre synantropiske, prydfugle, stillesiddende og trækfugle, især vandfugle, især trækænder.

Graden af ​​beslægtethed af AIV-stammer bedømmes af overfladeglykoproteiner - hæmagglutinin (H) og neuraminidase (N). AIV-stammerne isoleret over den overskuelige periode fra tamfugle og vilde fugle tilhørte undertyper med en kombination af 15 H(H1…H15) og 9 N (N1…N9) varianter. Ved samtidig infektion med flere AIV-undertyper er en udveksling af segmenter mulig mellem deres nukleinsyrer (der er 8 af dem i virusets nukleinsyre). Derfor er hypotetisk (under hensyntagen til antallet af H- og N-varianter) 256 modifikationer af patogenet mulige, forskellige i genotype og fænotype.

Mange undertyper af AIV (kaldet lav patogenicitet) er udbredte, men deres infektion er asymptomatisk eller mild. Mødet af en modtagelig fugl med højpatogene undertyper af AIV (i øjeblikket er de kendte 2 - H5 og H7) er meget farligere - infektionen kan tage en generaliseret form og være dødelig. Men ikke alle stammer af AIV med H5 eller H7 antigener er højpatogene for fjerkræ.

Grænsen mellem lavpatogene og højpatogene stammer af AIV er ekstremt tynd. En glimrende illustration af dette er udbruddet af fugleinfluenza i Chile (2002), forårsaget af en meget virulent stamme af H7N3-subtypen. Det udviklede sig fra mildt patogene stammer af samme undertype af AIV, der er udbredt i Sydamerika, men som aldrig tidligere har forårsaget influenzasymptomer hos fugle.

I de senere år har udbrud af højpatogen aviær influenza i Amerika (USA, 2004), Pakistan (2004) og Holland (2004) forårsaget subtype H7, og i Sydøstasien og andre europæiske lande - subtype H5. H5N1-undertypen, som i øjeblikket er den mest udbredte, ser ud til at være dukket op i Hong Kong i 1997. Den kom derefter ind i Sydkorea, Kina, Vietnam, Japan, Thailand, Cambodja, Laos, Indonesien, Malaysia og Filippinerne og vandrede derefter fugle bragte den til Mongoliet, Kasakhstan, Rusland, Tyrkiet, Grækenland, Kroatien og Kuwait.

De specifikke naturligt-klimatiske og socioøkonomiske forhold i Sydøstasien har gjort denne region til en "genetisk kedel", hvor farlige varianter af AIV forekommer periodisk. For eksempel, i Thailand i de senere år er ikke kun H5N1-undertypen, men også H5N2 blevet isoleret fra en syg fugl.

Populationer af influenzavirus er karakteriseret ved en usædvanlig høj frekvens af rekombinationer, som kommer til udtryk både i deres evne til at tilpasse sig og i naturlig variabilitet. Det er kendt, at den menneskelige influenzavirus i årene med epidemier kan overføres til husdyr (svin, heste, kvæg, hunde, katte) såvel som til fugle og cirkulere i deres kroppe i nogen tid. Der er ingen tegn på direkte infektion af mennesker med influenzavirus fra dyr og fugle, med undtagelse af enkeltstående tilfælde. Direkte antigent forhold observeret i humane, pattedyr og fugleinfluenzavirus gennem H-genet antyder tilstedeværelsen af ​​en fælles cirkulation af influenzavirus i naturen (akademiker VN Syurin et al. 1983).

Faktisk er fuglen i evolutionære termer et af de ældste reservoirer af patogener. Hvad er lettet af funktionerne i deres liv: kolonialitet og et højt antal individer i et begrænset område. Under træk af fugle øges deres koncentration på overvintringspladser og trækruter, hvor der opstår forbindelsesbroer mellem biocenoser tusindvis af kilometer væk fra hinanden. Det er trækfuglene, at sygdommenes naturlige foci og patogenets genetiske variabilitet i høj grad skylder deres eksistens.

Fuglenes partnere i den epizootiske proces er forskellige hvirveldyr: fisk, padder, krybdyr, pattedyr, herunder rotter og mus, små rovdyr og husdyr, herunder katte og hunde. Ud over fugle transporteres patogener også over lange afstande af flyvende insekter.

Da alle influenza A-vira er genetisk labile og udsat for permanent variabilitet med en successiv ændring af antigener og epizootiske (epidemi) konsekvenser, kan potentialet for fremkomsten af ​​subtypevarianter af aviær influenzavirus med overførsel til den menneskelige befolkning ikke udelukkes.

Ifølge de serologiske egenskaber af det vigtigste overfladeantigen, hæmagglutinin (H), er influenza A-vira opdelt i 15 i øjeblikket kendte undertyper (H1-H15). Der er en lignende intraspecifik diversitet for det andet overfladeantigen, neuraminidase (N1-N9). Mennesker og mange dyrearter er modtagelige for influenza A-virus, især svin, heste, sæler, forskellige hvaler, tamfugle og vilde fugle. I økologien af ​​influenza A-vira er sidstnævnte af særlig betydning, da de er deres naturlige reservoir; alle undertyper af virussen cirkulerer blandt vilde fugle. Som et resultat er de 15 undertyper af influenza A-virus, der inficerer fugle, blevet navngivet aviær influenzavirus (4, 8, 10).

HSV'er forårsager ikke influenza hos mennesker og har ingen direkte forbindelser til dens epidemier, folk er ikke involveret i deres naturlige kredsløb. Kun de tre første undertyper (H1, H2 og H3) er i stand til at sprede sig epidemisk blandt mennesker (1, 3, 13).

Hos vilde fugle forårsager HSV'er ingen sygdomme i nosologisk forstand, de fortsætter i populationer af overvejende vandrende vandfugle af visse arter (i tarmene og i miljøet, f.eks. i reder). Virus findes i spyt, næsesekret og afføring. Deres omsætning sker, når modtagelige fugle kommer i kontakt med forurenet næse-, luftvejs-, fækalt materiale fra inficerede fugle, hovedsageligt ad fækal-oral vej. Hos sidstnævnte er infektionen sædvanligvis asymptomatisk eller med milde et eller flere symptomer, afhængig af virusstamme og fugleart (7, 10, 11).

HSV'er findes i to epidemiologiske former: lav eller højpatogen. Det er kendt, at graden af ​​patogenicitet af HSV (såvel som andre orthomyxo- og paramyxovira) i sidste ende bestemmes af den primære struktur af hæmagglutininmolekylet - dets evne til proteolytisk spaltning på et specifikt sted, som er genstand for mutationsændringer (2 , 3).

Det er AIV med lav patogenicitet (med uopdelt hæmagglutinin), der er i stand til langsigtet asymptomatisk persistens i populationer af både vilde og tamme fugle. Samtidig er HSV-undertyper isoleret fra fugle, hovedsageligt ænder, karakteriseret ved snesevis af antigene kombinationer af hæmagglutinin + neuraminidase (H + N). I mangel af kontrol er mikroevolutionære processer imidlertid uundgåelige under betingelser med kontinuerlige naturlige generationer, især mutationer med dannelse af højpatogene varianter af virussen [med den primære struktur af spaltningsstedet Pro-Glu-Ile-Pro -Lys-Arg-Arg-Arg-Arg Gly-Leu -Fen og spaltet hæmagglutinin] og deres mulige fordeling uden at ændre undertypen, hvilket kommer til udtryk i fremkomsten af ​​nye epidemiske udbrud af infektion med massedødelighed. Så i 1983-84 i USA, efter seks måneder med endemisk HSV H5N2-infektion med lav dødelighed, dukkede et højpatogent patogen op, der forårsager sygelighed med 90% død (tab beløb sig til $65 millioner). I en lignende situation i 1999-2001. i Italien, oprindeligt lavpatogen H7N1 AIV muteret til en højpatogen variant ni måneder senere (3, 4). Disse fakta, såvel som manglen på afklaring af infektionskilderne og fraværet af epidemiske forbindelser i langt de fleste primære (eller enkeltstående) tilfælde af fugleinfluenza i 2003, vidner snarere om den oprindelige end epidemiske, eksogene, "indførte" "i en triviel forstand, karakteren af ​​udbrud netop på grund af den mutationelle oprindelse højpatogene HSV.

Imidlertid kan den epidemiske cirkulation af højpatogen HSV være ret lang; i Mexico forårsagede en højpatogen mutant af H5N2-virussen, der dukkede op i 1992, en høj-dødelig morbiditet i tre år (indtil 1995) (2, 4).

Evnen til en sådan "saltistisk" transformation med konsekvenser i form af massemorbiditet og dødelighed blandt tamfugle (kyllinger, kalkuner) og vilde fugle af visse arter er især iboende i HSV-undertyperne H5 og H7. [Disse data er af stor praktisk betydning, da underbygge behovet for obligatorisk affolkning som en standard i bekæmpelsen og forebyggelsen af ​​forekomsten og spredningen af ​​fugleinfluenza på en skala af ugunstigt stillede tilstande.] Samtidig skyldes alvorlige patologiske ændringer op til dødelige (især lungeskader) til den patogene effekt af selve virussen, mens forværrende virkninger ved influenza hos mennesker hovedsageligt skyldes sekundær infektion (4, 7, 10, 12).

HSV'er er ret modstandsdygtige over for påvirkning af miljøfaktorer og forbliver i ekstraorganismens tilstand i lang tid, især ved lave temperaturer. På grund af den høje smitsomhed spredes smitten hurtigt mellem gårde ved hjælp af mekaniske midler og indirekte kontaktfaktorer, for eksempel gennem forurenet udstyr, transport, foder, celler og forskellige blodpropper. I modsætning til luftbåren overførsel af infektion ved klassisk human influenza på grund af direkte, tæt kontakt med kilden til patogenet, dominerer i dette tilfælde fækal-oral infektion og indirekte overførsel af infektion med indirekte kontakt (10, 11).

1.2. Hvad er højpatogen aviær influenza?

Orthomyxovirusinfektion hos fugle blev først beskrevet af Perroncito for 125 år siden i Italien. Den meget dødelige sygdom for høns og kalkuner, som siden da har spredt sig i forskellige regioner i verden med et højt epizootisk indeks, kaldes klassisk fuglepest, hvis forårsagende agens tilhørte influenza A-virus af undertyperne H7N1 og H7N7, i de seneste årtier er det ikke blevet registreret som en nosologisk form. Med fremkomsten af ​​nye fuglevarianter af influenza A-virus, ifølge anbefalingerne fra I-st ​​International Symposium on Avian Influenza (1981), fik infektionen navnet Avian Influenza, og dens nye variant med høj dødelighed (mindst 75 %) er højpatogen aviær influenza (Højpatogen fugleinfluenza).

Fugleinfluenza har fået særlig betydning på nuværende tidspunkt i forbindelse med den nye spredning i slutningen af ​​2003 i 10 lande i Sydøstasien af ​​højpatogen HSV H5N1. [I foråret 2003 forekom store udbrud af højpatogen H7N7 fugleinfluenza i Vesteuropa; de er nu blevet elimineret ved drastiske foranstaltninger.] Den mest fuldt dokumenterede statistik fra officielle data er opsummeret i tabellen. Situationens alvor bestemmes af tilfælde af menneskelig sygdom, herunder dødelige tilfælde, for første gang forårsaget af HSV som et nyt patogen på vej.

1.3. Fugleinfluenza hos mennesker

I 1997 og 1999 blev der rapporteret tilfælde af human influenza forårsaget af HSV med en relativt høj dødelighed blandt de ramte. Smitten opstod ved direkte kontakt (infektion) med syge fugle, overførsel fra person til person blev ikke observeret. Det første udbrud gav et folkesundhedsmæssigt udgangspunkt for overvågning af den potentielle spredning af AIV i den menneskelige befolkning. I 2003 i Holland, blandt personer, der affolkede under de ovenfor beskrevne udbrud af fugleinfluenza, var 349 personer inficeret (med kliniske tegn på conjunctivitis), HSV H7 blev isoleret fra 89 (19,6%), i tre tilfælde var der overførsel af infektion fra person til person (inklusive familieforhold fra far til datter), døde en person.

Tilfælde af fugleinfluenza hos mennesker, ledsaget af dødelighed, er fortsat registreret på grund af situationen i Sydøstasien; i to lande var det samlede antal tilfælde 23, 18 døde, og dødeligheden var 82,6 %. Baseret på rapporterede tilfælde kan en person være modtagelig for HSV subtype H5, H7 og H9.

Symptomer på HSV-infektion hos mennesker spænder fra det typiske influenzasyndrom med almindelig sæsonbestemt epidemisk influenza (feber, hoste, ondt i halsen, muskelsmerter) til øjenskade, akut åndedrætsbesvær, viral lungebetændelse og andre livstruende komplikationer.

Da alle influenza A-vira er genetisk labile og udsat for permanent progressiv variabilitet med en successiv ændring af antigener og epidemiske konsekvenser, kan potentialet for fremkomsten af ​​subtypevarianter af HSV med menneske-til-menneske overførsel og epidemisk spredning i den menneskelige befolkning ikke være udelukket. Dette lettes i vid udstrækning af to af deres immanente egenskaber - fraværet af mekanismer til at korrigere læsning ("korrekturlæsning") og reparation af fejl i genomreplikation, som forårsager genetisk drift, og evolutionær-økologisk polyhostalitet som en vigtig faktor i valget af nye skifte virale undertyper. Et sandsynligt eksempel på en sådan disponerende mekanisme er den velkendte kendsgerning, at grise, der er modtagelige for influenzavirus fra både fugle og pattedyr, kan tjene som et "blandekar" af det genetiske materiale af humane influenzavira og HSV med fremkomsten af ​​nye undertyper. Efter at den naturlige infektion af humant HSV er blevet reel, kan sidstnævnte også potentielt spille rollen som en "mixer".

Af særlig betydning kan være den globale spredning af nye influenzavirus. I den forbindelse er erfaringerne fra det 20. århundrede lærerige, hvor tre influenzapandemier fik dramatiske konsekvenser med ekstrem høj sygelighed, dødelighed, sociale omvæltninger og økonomiske tab. Alle tre pandemier blev kendetegnet ved den eksplosive karakter af udvikling inden for et år og fremkomsten af ​​nye (pandemi) undertyper med forskydninger i hæmagglutinin til det globale niveau, hvilket understreger den potentielle fare ved nye undertyper for mennesker, især H5.

Den første pandemiske spredning af H1N1-influenzavirus i 1918-1919. ("Spansk syge") var ledsaget af en dødsrate på 20 til 50 millioner mennesker, og sygdommen, som foregik i en meget akut form, ramte mennesker uanset alder og andre trivielle faktorer af individuel modtagelighed *. I 1957-1958. H2N2-influenza-pandemien ("asiatisk influenza"), der startede i Kina, spredte sig til USA fire måneder senere, hvor omkring 70.000 mennesker døde. I 1968-1969 influenza H3N2 ("Hongkong-influenza") opnåede også meget hurtigt, inden for et år, en pandemisk fordeling med en høj dødelighed (ca. 34 tusinde dødsfald blev registreret alene i USA).

For at beskytte mennesker mod HSV, især dem, der har forskellige kontakter med fugle, anbefales særlige foranstaltninger. Fysisk beskyttelse af den sanitære og hygiejniske orden involverer brug af overalls, masker, briller. Vaccination mod human influenza, især med polyvalente vacciner, skaber en samtidig effekt mod fugleinfluenza. Effektive antivirale lægemidler til behandling af viral konjunktivitis og deres forebyggelse.

Bæredygtighed

VIV er i stand til at vare ved i lang tid i fjerkræets afføring og slagtekroppe, især ved lave temperaturer: ved 60 ° C - i flere år, ved 4 ° C - i flere uger. Afhængigt af substratet, hvori virusset er placeret, inaktiveres det ved 56°C i 1...3 timer, ved 60°C i 10...30 minutter, ved 70°C i 2...5 minutter. Sur pH, formalin, natriumdodecylsulfat, fedtopløsningsmidler, α-propiolacton, jodpræparater, meget anvendte desinfektionsmidler (klor, creolin, carbolsyre osv.) har en skadelig effekt på VGP.

De fleste af os opfatter influenza som blot en af ​​de mindre gener. Men dette er en misforståelse: influenza skal ikke undervurderes. Smitten spredes med luftbårne dråber så let, at den hvert år rammer en betydelig del af verdens befolkning. Influenza og andre infektionssygdomme i luftvejene er de mest almindelige humane virussygdomme. De er dødsårsagen for mange mennesker. På grund af massesygelighed er den økonomiske skade fra dem enorm i alle lande.

Influenzavirussen ændrer sig så hurtigt, at ingen er immune over for alle dens varianter, og hvert år skal eksperter udvikle en ny vaccine. Hidtil har vi talt om de sædvanlige typer af influenza, men siden december 2003 er der sket et hidtil uset udbrud af fugleinfluenza i verden, der dækker 38 lande. Først og fremmest blev landene i Sydøstasien ramt. På nuværende tidspunkt er en epizooti af fugleinfluenza forårsaget af H5N1-influenza A-virus blevet noteret i mange lande i Europa, Asien og Afrika. Menneskelige tilfælde er blevet rapporteret i 7 lande. 3 lande ud af dette antal grænser op til Rusland.

Trods nødforanstaltninger for at forhindre spredning af fugleinfluenza, som resulterede i ødelæggelsen af ​​mere end 100 millioner flokke fjerkræ, har H5N1-virussen fået fodfæste i den naturlige bestand af vilde fugle og har fået evnen til at inficere mennesker, hvilket er grundlaget for at betragte det som en mulig forløber for en pandemisk virus. Den 21. marts 2006 blev 185 mennesker syge i verden, hvoraf 104 døde.

Det er ikke usædvanligt, at høns får influenza. Der er mange flere sorter af fugleinfluenza end menneskers influenza. Fugleinfluenza er en meget smitsom virusinfektion, der rammer alle typer fugle. De mest følsomme husdyrarter er høns og kalkuner. Det naturlige reservoir for fugleinfluenzavirus er vandfugle, som oftest er ansvarlige for at bringe infektionen ind i husholdninger.

Fugleinfluenza har altid eksisteret. Hos vilde fugle opstår sygdommen i form af enteritis (tarmskader) uden synlige tegn på almen sygdom. Dette indikerer en høj grad af tilpasning af influenza A-virus til vilde fugle, som er deres naturlige værter. Virusset forbliver i vand i lang tid (6-8 måneder), og den vand-fækale infektionsvej for fugle er hovedmekanismen for influenzavirusets persistens i naturen, hvorfra den trænger ind i populationer af fjerkræ og dyr . En højpatogen virus kan overleve i miljøet i lang tid, især ved lave temperaturer. For eksempel kan den overleve i fugleklatter i op til 35 dage ved 4 grader C. Ved 37 grader C forbliver virussen levedygtig i ekskrementer i mindst 6 dage.

Fugleinfluenzavirus kan overføres fra gård til gård, når levende fugle flyttes, såvel som af mennesker gennem sko og tøj, forurenede transporthjul, udstyr og foder. Af disse grunde rådes fjerkræarbejdere til ikke at holde fjerkræ. Disse krav skal tages alvorligt. Når en sygdom opstår, er de vigtigste og mest effektive ihurtig ødelæggelse af hele bestanden af ​​syge fugle eller kontaktfugle, obligatorisk indsamling og nedgravning eller afbrænding af fuglekroppe, indførelse af karantæne og grundig desinfektion af alle lokaler og udstyr. Det er også nødvendigt at indføre restriktioner for flytning af levende fugle og fjerkræprodukter både inden for en bebyggelse eller region og i bredere omfang, afhængigt af situationen.

Strenge restriktive foranstaltninger er især nødvendige for fjerkræbedrifter og fjerkræbedrifter, hvor antallet af fugle holdes i lukkede rum. Fugleinfluenzavirus kan overføres til gårde ved at leve på deres territorium af forskellige fuglearter: duer, krager, spurve og andre. I en række tilfælde forblev smittevejene uklare, hvilket kan tyde på endnu ukendte smittekilder. I disse tilfælde er der spekulationer om fuglenes mulige rolle eller brugen af ​​fugleklatter som gødning.

Infektionsbekæmpelsesforanstaltninger er meget sværere at implementere på de enkelte bedrifter. I dem er det vanskeligt at sikre isolering af fjerkræ fra kontakt med vilde fugle, især i vandområder. Faktisk, om sommeren går alt fjerkræ i landsbyerne på vandet eller græsplænerne, græsser rundt i boligen på jagt efter føde. Dette er især farligt, når man græsser tamænder eller gæs. Derudover, selv med vellykkede forsøg på at isolere fjerkræ, er der et problem med at fodre dem.

Ud over vanskelighederne med at kontrollere, er udbrud af influenza i husholdninger fyldt med en høj risiko for, at mennesker udsættes for infektionen. Tilfælde af infektion af børn, der leger i områder, der er stærkt forurenet med fugleafføring, er beskrevet. Infektion kan ske gennem vand forurenet med fugleafføring. Derfor er der brug for omhu, når man bader og indtager råvand. I Thailand har der været tilfælde af smitte hos ejere af kamphaner. I husholdninger er det ikke ualmindeligt, at syge fugle bliver slagtet til føde. I dette tilfælde opstår der en farlig situation under slagtning af fugle, fjernelse af fjer, slagtning af slagtekroppen og madlavning. For eksempel blev 2 børn smittet og døde i Tyrkiet i februar i år, som blev instrueret i at slagte syge kyllinger.

Mange fugle er kendt for at yngle i de nordlige territorier og trækker sydpå om vinteren. Fugleflyvninger kan ikke aflyses eller forbydes. Migrationen af ​​mange millioner fugle kan sammenlignes med en kæmpe pumpe, der to gange om året pumper patogener af forskellige sygdomme tilpasset fugle fra kontinent til kontinent. Med begyndelsen af ​​foråret flyttede fuglene nordpå, og listen over lande, der var involveret i influenza-eposen, blev straks udvidet betydeligt. Den 21. februar så det således ud (i den rækkefølge, som H5N1-virussen blev opdaget): Irak, Aserbajdsjan, Bulgarien, Grækenland, Italien, Slovenien, Iran, Østrig, Tyskland, Egypten, Indien, Frankrig. Siden da har denne liste ændret sig markant.

Overføres H5N1-virus let fra fugle til mennesker? Heldigvis nej. Som allerede nævnt er det rapporterede antal tilfælde af mennesker ubetydeligt sammenlignet med antallet af fugle, der er ramt af denne virus. Det var ikke klart, hvorfor nogle mennesker bliver smittet og bliver syge, mens andre ikke gør det. Data er netop dukket op for at forklare dette faktum. Det viste sig, at hos mennesker er epitelceller, der er følsomme over for H5N1-influenzavirus, placeret i de dybeste dele af lungerne, næsten omkring alveolerne, hvor iltudveksling finder sted. Derfor er det usandsynligt, at hoste eller nysen vil fjerne virussen fra en inficeret person. Men i fremtiden, efterhånden som virussen tilpasser sig den menneskelige krop, vil den erhverve evnen til at inficere andre dele af vores åndedrætssystem, hvilket vil bidrage til dens spredning fra person til person.

Hvad er risikoen for en influenzapandemi? Det kan starte under tre forhold. Den første er fremkomsten af ​​en ny undertype af influenzavirus. Den anden - tilfælde af infektion af en person med et alvorligt sygdomsforløb. Den tredje er virussens evne til let at sprede sig fra person til person. De to første betingelser er allerede på plads. H5N1-virussen har aldrig cirkuleret i naturen før, heller ikke hos mennesker. Mennesker er ikke immune over for denne virus. Pointen er således kun virussens evne til hurtigt at sprede den fra person til person. Risikoen for, at denne virus får denne evne, vil fortsat være, når der observeres menneskelige tilfælde, hvilket igen afhænger af dets cirkulation i fjerkræ og vilde fugle.

Hvilke ændringer er nødvendige for at H5N1-virussen kan blive pandemi? Virussen kan øge dens overførbarhed hos mennesker gennem to mekanismer. Den første er udvekslingen af ​​genetisk materiale med samtidig infektion af et menneske eller en gris med et menneske- og fuglevirus. Den anden er en trinvis proces med adaptive mutationer, der forbedrer virusets evne til at inficere menneskelige celler. Adaptive mutationer optræder i starten som små udbrud hos mennesker med etableret menneske-til-menneske overførsel af virussen. Registreringen af ​​sådanne tilfælde vil være et signal om aktivt at forberede sig på en pandemi og sætte planer i gang for at reducere dens ødelæggende virkninger.

Med spredningen af ​​H5N1-virus uden for Sydøstasien har der været en stigning i menneskelige infektioner fra tamme og vilde fugle. Hver ny human infektion giver virussen mulighed for at øge dens overførbarhed hos mennesker, hvilket fører til fremkomsten af ​​en pandemisk stamme. Hvornår og hvor dette vil ske, er umuligt at forudsige, men det vil uundgåeligt ske.

En gammel ven - fugleinfluenza

"Hvad siger du til høns, kære professor? - Bronsky råbte ... Han understregede med en skarp lakeret finger af utrolig størrelse overskriften på tværs af hele avisens side: "Hønsepest i republikken." M. Bulgakov "Fatale æg"

Folk har længe været bekendt med sygdommen, opkaldt i det XIX århundrede. "influenza" (fra fransk. gribe- fatte). Denne uønskede følgesvend af menneskeheden indsamler ikke kun fra ham en årlig hyldest i form af epidemier, men forårsager også massedød af fugle, sygdomme hos svin og heste og nogle gange endda hos mink og havpattedyr.

Influenza er forårsaget af vira, der tilhører familien af ​​orthomyxovira (Orthomyxoviridae): Influenzavirus A, Influenzavirus B og Influenzavirus C. De er klassificeret ud fra de såkaldte antigene forskelle i deres proteiner, nukleoprotein og matrix. Husk på, at antigener er stoffer, der forårsager kroppens immunrespons i form af dannelsen af ​​specifikke antistoffer.

Type B og C virus inficerer kun mennesker. Den mest patogene virus er type A, som vil blive diskuteret yderligere. Det er ham, der er i stand til at inficere en række forskellige dyrearter, hvilket med jævne mellemrum forårsager ødelæggende pandemier i den menneskelige befolkning. På basis af to forskellige glykoproteiner placeret på overfladen af ​​virussen - hæmagglutinin og neuraminidase - opdeles influenza A-virussen i såkaldte undertyper. I alt kendes 16 undertyper af hæmagglutinin og 9 undertyper af neuraminidase. Men ud af 144 mulige par af kombinationer forekommer kun 86 i naturen, og 83 af dem findes blandt fugleinfluenzavirus, mens vira af relativt få kombinationer af undertyper er blevet isoleret fra pattedyr. Men kun vira af tre undertyper af hæmagglutinin (H1, H2 og H3) og to typer neuraminidase (N1 og N2) cirkulerer bredt blandt mennesker.

naturligt reservoir

Type A-influenzavirussen, som nu er blevet den "fashionable" fugleinfluenza, blev først isoleret for omkring 100 år siden. I alt siden 1961 i Nordamerika, Europa, Indien, Japan, Sydafrika og Australien er virussen blevet isoleret i mindst 90 arter - repræsentanter for 12 fugleordener. Samtidig blev virussen i Anseriformes-ordenen fundet i mere end en fjerdedel af de 149 tilgængelige arter, og i Charadriiformes-ordenen i omkring 20 arter. Repræsentanter for sidstnævnte orden (hejrer, plovere, terner) er udbredt over hele verden og er kendetegnet ved deres tendens til at migrere over lange afstande.

Således er det primære reservoir for næsten alle undertyper af influenza A-viruset forskellige fugle, der tilhører Anseriformes og Charadriiformes-ordenerne. Andre arter er selvfølgelig ikke så vigtige i influenzaviruss naturhistorie som disse trækfugle, der fører en akvatisk og semi-akvatisk livsstil.

Som et resultat af at studere genotyperne af influenzavirus i forskellige fuglearter, viste det sig, at de udviklede sig uafhængigt i Eurasien og Amerika. Migration mellem disse to kontinenter (latitudinel migration) synes således at spille en lille rolle i udviklingen af ​​influenzavirus, mens fugle, der trækker langs længdegraden, yder et afgørende bidrag til denne proces.

nyere historie

Det er klart, at fugleinfluenzavirussen i århundreder og årtusinder "fredeligt" cirkulerede i dyreverdenen, idet den var en af ​​faktorerne for naturlig udvælgelse og befolkningsregulering. Men med udviklingen af ​​landbruget og massefjerkræavl åbnede sig billedligt talt "nye horisonter" for ham. Dette blev lettet af både den uundgåelige overfyldning af fjerkræ og kunstig selektion med det formål at øge individers produktivitet, hvilket også uundgåeligt fører til et fald i deres stabilitet. Men i lang tid var problemet med "fugleinfluenza" kun bekymret for virologer, dyrlæger og husdyrspecialister.

Alt ændrede sig i 1997 med en masse epizooti af "fugleinfluenza" i Hong Kong, hvis skyldige var influenza A-virus af H5N1-serotypen. Denne begivenhed ville sandsynligvis være forblevet ubemærket af verdenssamfundet. Men som det viste sig, blev den samme virus synderen bag sygdommen hos 18 mennesker, hvilket førte til døden hos seks inficerede mennesker. Det eneste effektive våben i kampen mod infektionen, der ramte fjerkræindustrien i Hong Kong, var den fuldstændige ødelæggelse af fjerkræbestanden. Men ånden var allerede ude af flasken, og i de følgende år begyndte H5N1-influenzavirussen at sprede sig over hele Sydøstasien og Kina og forårsagede enorme økonomiske skader.

Efter fugletræk, fra Sydøstasien, hastede virussen sammen med trækfugle i efteråret 2005 til Mellemøsten, Nordafrika og Sydeuropa. Således begyndte epizootien af ​​"fugleinfluenza" at blive til en praktisk talt "panzootik", hvilket forårsagede skade på fjerkræindustrien i mange lande i verden og begyndte desuden at udgøre en trussel mod menneskers sundhed. Verdenssamfundet og medierne har talt højt om, at der kommer en ny "pest" af menneskeheden.

Den lumske "spanier" og Hongkong-morderen

Historien om "fugleinfluenzaen" vidner endnu engang til fordel for sandheden, som siger: hvis du ikke ved noget, betyder det ikke, at dette "noget" ikke eksisterer.

Vi har alle gentagne gange i vores liv stået over for en sygdom, som læger diagnosticerer som influenza. Og som det nu er blevet fastslået, er den primære kilde til denne sygdom hos mennesker oftest efterkommere af de samme "fugleinfluenza"-virus, som har gennemgået mange års udvikling i den menneskelige befolkning, hvilket forårsager epidemier og pandemier mere end én gang.

Den første historisk registrerede pandemi var den berygtede "spanske syge", hvis forfader var "fugleinfluenzaen" H1N1-virus, og som forårsagede 20 til 50 millioner menneskers død på verdensplan. Mange mennesker døde i løbet af de første dage af sygdommen og mange som følge af influenza-fremkaldte komplikationer.

1957-1958 "Asian influenza", som krævede omkring en million menneskeliv. Først registreret i februar 1957, "dækkede" den halvdelen af ​​verden på kun fem måneder og nåede det amerikanske kontinent.

1968-1969 Den seneste pandemi er "Hong Kong-influenzaen", og igen døden for omkring en million mennesker rundt om i verden. Serotypen af ​​H3N2-virussen, der forårsagede det, cirkulerer stadig i den menneskelige befolkning.

Alle disse pandemier havde flere fælles træk. Således opstod de første udbrud af sygdomme i Sydøstasien. Forekomsten af ​​H2N2- og H3N2-vira blev ledsaget af forsvinden fra den menneskelige befolkning af influenzavirus, der cirkulerede før dem (henholdsvis undertyperne H1N1 og H2N2). Årsagen til sidstnævnte fænomen er indtil videre uklar.

Når vi bevæger os fra historie til moderne tid, så lad os vende tilbage til det allerede nævnte udbrud af fjerkræsygdom i Hong Kong i 1997, som blev ledsaget af menneskelig infektion. Patienternes alder varierede fra 1 til 60 år, alle havde høj feber, mave-tarmsygdomme og hepatitis. Seks patienters død skete som følge af primær viral lungebetændelse.

Og det var kun de første tegn. Fra 2003 til begyndelsen af ​​februar 2006 blev der ifølge WHO således officielt registreret omkring 170 tilfælde af fugleinfluenza blandt mennesker i verden med mere end 50 % dødelighed. Det største antal tilfælde blev registreret i Vietnam (93 personer), den højeste dødelighed var i Cambodja og Indonesien.

Ledig stilling massemorder

De seneste års begivenheder kunne ikke hjælpe med at alarmere influenzaeksperter. Siden det blev konstateret, at hyppigheden af ​​pandemier hos mennesker er cirka 30-40 år, ved slutningen af ​​forrige århundrede, kom perioden, som de siger, lige op. Hvem er kandidaten til titlen som den nye "massemorder"?

Lavpatogene underarter af influenza type A H5 og H7, der tidligere har cirkuleret i vilde vandfugle som et naturligt reservoir, har i det sidste årti mærkbart øget deres patogenicitet både for den naturlige vært og for andre arter af fugle og pattedyr. Fire nye varianter af virussen er blevet opdaget, der har forårsaget døden af ​​ikke kun fugle, men også mennesker: H5N1, H9N2, H7N7 og H7N3. H5N1-influenzavirus har været mest almindeligt i de sidste ti år. Det er denne højpatogene asiatiske variant af "fugleinfluenza", der fortsætter med at "mestre" planeten og spredes vidt omkring i Eurasien og Nordafrika. Blandt hans ofre er udover et utal af fjerkræ indbyggerne i disse lande.

Kilden til det forårsagende infektionsmiddel er som regel sygt eller dødt fjerkræ, som de syge var i tæt kontakt med. Samtidig meldes der om tilfælde, hvor smitte kan være opstået inden for familien, mens der er plejet syge. Man skal også huske på, at langvarig cirkulation af H5N1-subtypen i vilde fugle kan føre til udbredt spredning af virussen i vandområder, hvilket udgør en yderligere potentiel risiko for infektion for mennesker.

Og alligevel, hvor sandsynligt er endnu en influenzapandemi i dag? Ja, nu er "fugleinfluenza"-virussen blevet mere virulent og har i princippet overvundet fugle-menneske-barrieren. Og alligevel ser den endnu ikke ud til at have evnen til at overføre direkte fra person til person og hurtigt spredes gennem den menneskelige befolkning, hvilket er en nødvendig betingelse for fremkomsten af ​​en pandemi. Sidstnævnte behøver dog kun at foretage en "korrekt" udveksling af genetisk materiale mellem f.eks. en H5N1-stamme og en human influenzastamme, hvilket meget vel kan ske, hvis en person eller et dyr bliver syg af menneskelig og fugleinfluenza på samme tid.

Sådanne virale afkom kan teoretisk modtage arvelige sæt, som er rekombinationer af RNA-segmenterne af begge forældrevira, hvilket vil sikre dets effektive overførsel i den menneskelige befolkning. Almindelige tamsvin, vores nærmeste genetiske og fysiologiske slægtninge, kan blive en slags "blandekar" for dannelsen af ​​en ny pandemisk virus. Hidtil er det heldigvis ikke sket, hvorfor udvikling og implementering af forebyggende tiltag for biosikkerhed i fjerkræavl er det mest relevante i dag. Naturligvis sammen med fortsat forskning i virussens økologi i dets naturlige miljø.

I de sibiriske vidder

Og dog – hvorfor tog sibiriske videnskabsmænd, virologer og ornitologer, som på ingen måde bor og arbejder i Sydøstasien, problemet med "fugleinfluenza" så "tæt på hjertet"? Sagen er, at i den sydlige del af det vestlige Sibirien konvergerer trækstrømme af fugle og overvintrer i forskellige regioner i verden - Europa, Afrika, Mellemøsten og Centralasien, Hindustan og Sydøstasien. De generøst vandede sibiriske territorier er et ideelt sted for både rede og stop for millioner af fugle.

Massefugletræk finder sted her fra slutningen af ​​marts til første halvdel af juni og fra anden halvdel af juli næsten til midten af ​​oktober, hvorfor der periodisk observeres masseansamlinger af fugle i visse områder af skovsteppen fra kl. forår til efterår. Antallet af kolonier af vandfugle og semakvatiske fugle skabt i redeperioden kan nå flere tusinde individer. Alt dette giver særligt gunstige betingelser for spredning af forskellige virale og andre sygdomme, der er farlige for mennesker.

Siden 2002 har Statens Forskningscenter for Virologi og Bioteknologi "Vektor" sammen med Instituttet for Økologi og Systematik i den sibiriske gren af ​​det russiske videnskabsakademi overvåget fugleinfluenzavirus i vilde trækfugle fundet i Novosibirsk-regionen. Til laboratorieundersøgelser blev der udtaget prøver både fra levende fugle fanget i net (udvaskninger fra kloakområdet) og fra fugle skudt under forårs- og efterårsjagt - i perioder med massetræk.

I 30 ud af 1120 prøver indsamlet fra vilde fugle i perioden fra 2002 til maj 2005 blev der fundet forskellige stammer af influenzavirus, herunder den højpatogene H5N1. Bærere af den potentielle infektion var som forventet forskellige arter af vildænder.

Siden efteråret 2003 begyndte vores forskere at studere cirkulationen af ​​influenzavirus i vilde fugle og i de områder, der støder op til Rusland - i Mongoliet. Men dette er kun begyndelsen på et stort forskningsarbejde. Vores specialisters øjne er rettet mod det sibiriske nord - hvor titusinder og hundreder af millioner af fugle flyver til de store vidder fra Taimyr til Beringhavet hvert forår fra Afrika, Europa, Asien, Amerika og Australien, og hvorfra nye varianter af " fugleinfluenza" spredte sig efterfølgende praktisk talt over hele verden.

Publikationen bruger fotografier af A. Yurlov (IS&EZh SB RAS, Novosibirsk)